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舉例說(shuō)明三種柱層析的原理

0013408560587 2013-11-07 03:32:08 1023  瀏覽
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  • 一樣有假 2013-11-08 00:00:00
    http://www.xici.net/b389713/d45822890.htm

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  • 五月天22344543 2018-02-28 09:19:53
    在分離分析特別是蛋白質(zhì)分離分析中,層析是相當(dāng)重要、且相當(dāng)常見(jiàn)的一種技術(shù),其原理較為復(fù)雜,對(duì)人員的要求相對(duì)較高,這里只能做一個(gè)相對(duì)簡(jiǎn)單的介紹。 一、 吸附層析 1、 吸附柱層析 吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相,以有機(jī)溶劑或緩沖液為流動(dòng)相構(gòu)成柱的一種層析方法。 2、 薄層層析 薄層層析是以涂布于玻板或滌綸片等載體上的基質(zhì)為固定相,以液體為流動(dòng)相的一種層析方法。這種層析方法是把吸附劑等物質(zhì)涂布于載體上形成薄層,然后按紙層析操作進(jìn)行展層。 3、 聚酰胺薄膜層析 聚酰胺對(duì)極性物質(zhì)的吸附作用是由于它能和被分離物之間形成氫鍵。這種氫鍵的強(qiáng)弱就決定了被分離物與聚酰胺薄膜之間吸附能力的大小。層析時(shí),展層劑與被分離物在聚酰胺膜表面競(jìng)爭(zhēng)形成氫鍵。因此選擇適當(dāng)?shù)恼箤觿┦狗蛛x在聚酰胺膜表面發(fā)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的連續(xù)過(guò)程,就能導(dǎo)致分離物質(zhì)達(dá)到分離目的。 二、 離子交換層析 離子交換層析是在以離子交換劑為固定相,液體為流動(dòng)相的系統(tǒng)中進(jìn)行的。離子交換劑是由基質(zhì)、電荷基團(tuán)和反離子構(gòu)成的。離子交換劑與水溶液中離子或離子化合物的反應(yīng)主要以離子交換方式進(jìn)行,或借助離子交換劑上電荷基團(tuán)對(duì)溶液中離子或離子化合物的吸附作用進(jìn)行。` 三、 凝膠過(guò)濾 凝膠過(guò)濾又叫分子篩層析,其原因是凝膠具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),小分子物質(zhì)能進(jìn)入其內(nèi)部,而大分子物質(zhì)卻被排除在外部。當(dāng)一混合溶液通過(guò)凝膠過(guò)濾層析柱時(shí),溶液中的物質(zhì)就按不同分子量篩分開(kāi)了。 四、 親和層析 親和層析的原理與眾所周知的抗原一抗體、激素一受體和酶一底物等特異性反應(yīng)的機(jī)理相類似,每對(duì)反應(yīng)物之間都有一定的親和力。正如在酶與底物的反應(yīng)中,特異的廢物(S')才能和一定的酶(E)結(jié)合,產(chǎn)生復(fù)合物(E-S')一樣。在親和層析中是特異的配體才能和一定的生命大分子之間具有親和力,并產(chǎn)生復(fù)合物。而親和層析與酶一底物反應(yīng)不同的是,前者進(jìn)行反應(yīng)時(shí),配體(類似底物)是固相存在;后者進(jìn)行反應(yīng)時(shí),底物呈液相存在。實(shí)質(zhì)上親和層析是把具有識(shí)別能力的配體L(對(duì)酶的配體可以是類似底物、YZ劑或輔基等)以共價(jià)鍵的方式固化到含有活化基團(tuán)的基質(zhì)M(如活化瓊脂糖等)上,制成親和吸附劑M-L,或者叫做固相載體。而固化后的配體仍保持束縛特異物質(zhì)的能力。因此,當(dāng)把圍相載體裝人小層析柱(幾毫升到幾十毫升床體積)后,讓欲分離的樣品液通過(guò)該柱。這時(shí)樣品中對(duì)配體有親和力的物質(zhì)S就可借助靜電引力、范德瓦爾力,以及結(jié)構(gòu)互補(bǔ)效應(yīng)等作用吸附到固相載體上,而無(wú)親和力或非特異吸附的物質(zhì)則被起始緩沖液洗滌出來(lái),并形成了diyi個(gè)層析峰。然后,恰當(dāng)?shù)馗淖兤鹗季彌_ 液的PH值、或增加離子強(qiáng)度、或加人抑③劑等因子,即可把物質(zhì)S從固相載體上解離下來(lái),并形成了第M個(gè)層析峰(見(jiàn)圖6-2)。顯然,通過(guò)這一操作程序就可把有效成分與雜質(zhì)滿意地分離開(kāi)。如果樣品液中存在兩個(gè)以上的物質(zhì)與固相載體具有親和力(其大小有差異)時(shí),采用選擇性緩沖液進(jìn)行洗脫,也可以將它們分離開(kāi)。用過(guò)的固相載體經(jīng)再生處理后,可以重復(fù)使用。   上面介紹的親和層析法亦稱特異性配體親和層析法。除此之外,還有一種親和層析法叫通用性配體親和層析法。這兩種親和層析法相比,前者的配體一般為復(fù)雜的生命大分子物質(zhì)(如抗體、受體和酶的類似底物等),它具有較強(qiáng)的吸附選擇性和較大的結(jié)合力。而后者的配體則一般為簡(jiǎn)單的小分子物質(zhì)(如金屬、染料,以及氨基酸等),它成本低廉、具有較高的吸附容量,通過(guò)改善吸附和脫附條件可提高層析的分辨率。   五、 聚焦層析   聚焦層析也是一種柱層析。因此,它和另外的層析一樣,照例具有流動(dòng)相,其流動(dòng)相為 多緩沖劑,固定相為多緩沖交換劑。   聚焦層析原理可以從PH梯度溶液的形成、蛋白質(zhì)的行為和聚焦效應(yīng)三方面來(lái)闡述。   1、PH梯度溶液的形成   在離子交換層析中,PH梯度溶液的形成是靠梯度混合儀實(shí)現(xiàn)的。例如,當(dāng)使用陰離子 劑進(jìn)行層析時(shí),制備PH由高到低呈線性變化的梯度溶液的方法是,在梯度儀的混合室(這層析柱者)中裝高PH溶液,而在另一室裝低PH極限溶液,然后打開(kāi)層析柱的下端出口,讓洗脫液連續(xù)不斷地流過(guò)柱體。這時(shí)從柱的上部到下部溶液的PH值是由高到低變化的。而在聚焦層析中,當(dāng)洗脫液流進(jìn)多緩沖交換劑時(shí),由于交換劑帶具有緩沖能力的電荷基團(tuán),故PH梯度溶液可以自動(dòng)形成。例如,當(dāng)柱中裝陰離子交換劑PBE94(作固定相)時(shí),先用起始緩沖液(配方見(jiàn)表了一2)平衡到PHg,再用含PH6的多緩沖劑物質(zhì)(作流動(dòng)相)的淋洗液通過(guò)柱體,這時(shí)多緩沖劑中酸性Z強(qiáng)的組分與堿性陰離子交換對(duì)結(jié)合發(fā)生中和作用。隨著淋洗液的不斷加人,住內(nèi)每點(diǎn)的PH值從高到低逐漸下降。照此處理J段時(shí)間,從層析柱頂部到底部就形成了PH6~9的梯度。聚焦層析柱中的PH梯度溶液是在淋洗過(guò)程中自動(dòng)形成的,但是隨著淋洗的進(jìn)行,PH梯度會(huì)逐漸向下遷移,從底部流出液的PH卻由9逐漸降至6,并Z后恒定于此值,這時(shí)層析柱的PH梯度也就消失了。   2.蛋白質(zhì)的行為   蛋白質(zhì)所帶電荷取決于它的等電點(diǎn)(PI)和層析柱中的PH值。當(dāng)柱中的PH低于蛋白質(zhì)的PI時(shí),蛋白質(zhì)帶正電荷,且不與陰離于交換劑結(jié)合。而隨著洗脫劑向前移動(dòng),固定相中的PH值是隨著淋洗時(shí)間延長(zhǎng)而變化的。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)移動(dòng)至環(huán)境PH高于其PI時(shí),蛋白質(zhì)由帶正電行變?yōu)閹ж?fù)電荷,并與陰離子交換劑結(jié)合。由于洗脫劑的通過(guò),蛋白質(zhì)周圍的環(huán)境PH 再次低于PI時(shí),它又帶正電荷,并從交換劑解吸下來(lái)。隨著洗脫液向柱底的遷移,上述過(guò)程將反復(fù)進(jìn)行,于是各種蛋白質(zhì)就在各自的等電點(diǎn)被洗下來(lái),從而達(dá)到了分離的目的。   不同蛋白質(zhì)具有不同的等電點(diǎn),它們?cè)诒浑x子交換劑結(jié)合以前,移動(dòng)之距離是不同的,洗脫出來(lái)的先后次序是按等電點(diǎn)排列的。

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氮?dú)獍l(fā)生器是一種先進(jìn)的氣體分離技術(shù),它主要應(yīng)用領(lǐng)域?yàn)椋汉娇蘸教?、核電核能、食品醫(yī)藥、石油化工、電子工業(yè)、材料工業(yè)、國(guó)防軍和科學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域。

氮?dú)獍l(fā)生器主要由電解系統(tǒng)、壓力控制系統(tǒng)、凈化系統(tǒng)和顯示系統(tǒng)組成。氮?dú)獍l(fā)生器能否很好地應(yīng)用于氣相色譜分析實(shí)驗(yàn),與發(fā)生器的原理有很大關(guān)系。

氮?dú)獍l(fā)生器的工作原理大致分為三種:1.以電化學(xué)分離法和物理吸附法相結(jié)合的方式;2.采用中空纖維膜分離;3.采用氣相色譜技術(shù)用新型合成分子篩分離。

下面我們就具體來(lái)介紹一下:

一、電化學(xué)法制氮。在氫氣電解池的陰極(產(chǎn)氫氣一側(cè))通入高壓空氣,在催化劑作用下,氫氣和氧氣形成微觀燃料電池,完成氧化還原反應(yīng)生產(chǎn)水,宏觀上表現(xiàn)即為空氣中的氧氣被除去,剩余氮?dú)?。這種方法可以產(chǎn)出高99.995%的氮?dú)?,這類氮?dú)獍l(fā)生器作為一種小流量氮?dú)鈦?lái)源,總費(fèi)用不過(guò)幾千元,常被用于色譜載氣和小容量保護(hù),是一種低成本的解決方案。

二、膜分離制氮。高壓空氣通過(guò)中空纖維膜組件,氮?dú)夥肿雍脱鯕夥肿拥臄U(kuò)散速度差別積累,在膜組件輸出端形成高純度的氮?dú)?,終形成的產(chǎn)品氣純度高可達(dá)99%,氣體流量>5000ml/min,并且可以累加使用,不影響產(chǎn)品質(zhì)量,在不考慮其它限制條件的情況下,氣體裝置可以無(wú)限擴(kuò)充。這種膜分離制氮在工業(yè)上有不少的應(yīng)用,在實(shí)驗(yàn)室主要用于對(duì)氣體純度要求不特別高的吹掃、保護(hù)、對(duì)氧氣的置換等。這類發(fā)生器的主要優(yōu)點(diǎn)是流量大,實(shí)驗(yàn)室級(jí)別產(chǎn)品一般在50L/min上下,并可隨意擴(kuò)充,同時(shí)壽命長(zhǎng),膜組件作為核心部件,在空氣源穩(wěn)定的情況下,壽命可達(dá)10年,且維護(hù)成本極低;缺點(diǎn)是氮?dú)饧兌炔荒苓_(dá)到高純級(jí),膜組件目前均為進(jìn)口,國(guó)內(nèi)不能提供,成本較高,儀器價(jià)格也相對(duì)高。我公司生產(chǎn)的氮?dú)獍l(fā)生器中,型號(hào)QPN-30L即為膜分離制氮產(chǎn)品,可供對(duì)氮?dú)馐褂昧吭趲咨?、幾十升到幾百升每分鐘的用戶選用;膜分離氮?dú)獍l(fā)生器可以很好的適用液質(zhì)聯(lián)用儀的用氮要求。

三、PSA變壓吸附制氮。利用氮?dú)馀c其它氣體分子在分子篩中的吸附能力差異,形成濃度差異的積累,在分子篩柱末端產(chǎn)出高純度氮?dú)?。同時(shí)利用兩根分子篩柱,一根吸附的同時(shí)引出一部分產(chǎn)品氣為另一根解析,實(shí)現(xiàn)分子篩在線再生,整體表現(xiàn)即為儀器持續(xù)輸出高純氮?dú)?。這類發(fā)生器可根據(jù)需要,調(diào)節(jié)氮?dú)獾募兌群土髁?,可生產(chǎn)99.999%的氮?dú)猱a(chǎn)品,流量可從幾百毫升到幾十升到幾立方每分鐘,純度大小配置靈活,可根據(jù)每個(gè)需求具體定制, PSA變壓吸附技術(shù)在工業(yè)中應(yīng)用很廣泛,已發(fā)展幾十年,是很成熟的技術(shù)。技術(shù)難點(diǎn)主要是分子篩柱填裝技術(shù),分子篩填裝不好,會(huì)造成分子篩在氣體高低壓頻繁變化中互相摩擦碰撞粉化,微孔數(shù)量減少,分子篩性能急劇降低。


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結(jié)構(gòu)組成

 

揚(yáng)塵在線監(jiān)測(cè)儀由采樣泵、切割器、β源、電源、檢測(cè)系統(tǒng)、溫濕聯(lián)控系統(tǒng)(DHS)、數(shù)據(jù)采集處理單元、數(shù)據(jù)傳送單元、配套軟件及輔助單元組成。

可選配風(fēng)向、風(fēng)速、視頻監(jiān)控、LED顯示屏。

 

性能特點(diǎn)

 

數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠;

配置不同切割器,可實(shí)現(xiàn)TSPPM10PM2.5質(zhì)量濃度的實(shí)時(shí)在線監(jiān)測(cè);

具備開(kāi)機(jī)自啟動(dòng)、開(kāi)機(jī)自檢、自動(dòng)校準(zhǔn)功能;

儀器配置溫濕聯(lián)控系統(tǒng)(DHS),去除濕度對(duì)測(cè)量數(shù)據(jù)的影響;

4G網(wǎng)絡(luò)無(wú)線傳輸數(shù)據(jù),傳輸穩(wěn)定可靠;

采用7寸工業(yè)屏及精簡(jiǎn)安卓系統(tǒng),系統(tǒng)穩(wěn)定可靠,簡(jiǎn)單易懂,操作簡(jiǎn)便,兼容性強(qiáng);

大容量存儲(chǔ),可能實(shí)現(xiàn)一年以上的數(shù)據(jù)存儲(chǔ);

外觀設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單大方,安裝方式多樣,可選壁掛式、立桿安裝、支架安裝等。


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1. 液體擺無(wú)線傾角計(jì)

液體擺傾角計(jì)的結(jié)構(gòu)是在玻璃殼內(nèi)裝有導(dǎo)電液,并用三根鉑電極和外部進(jìn)行連接,三根電極互相平行且具有相同的間距。在液體擺的應(yīng)用中也有根據(jù)液體位置變化引起應(yīng)變片的變化,從而引起輸出電信號(hào)變化而感知傾角的變化。在實(shí)用中除此類型外,還有在電解質(zhì)溶液中留下一氣泡,當(dāng)裝置傾斜時(shí)氣泡會(huì)運(yùn)動(dòng)使電容發(fā)生變化而感應(yīng)出傾角的“液體擺”。

2. 固體擺無(wú)線傾角計(jì)

固體擺在設(shè)計(jì)中廣泛采用力平衡式伺服系統(tǒng),其由擺錘、擺線、支架組成,其中,擺錘受重力G和擺拉力T的作用,其合外力F =G sinθ=mg sinθ,θ為擺線與垂直方向的夾角。在小角度范圍內(nèi)測(cè)量時(shí),可以認(rèn)為F與θ成線性關(guān)系。如應(yīng)變式傾角傳感器就基于此原理。

3. 氣體擺無(wú)線傾角計(jì)

氣體在受熱時(shí)受到浮升力的作用,如同固體擺和液體擺也具有的敏感質(zhì)量一樣,熱氣流總是力圖保持在鉛垂方向上,因此也具有擺的特性。“氣體擺”式慣性元件由密閉腔體、氣體和熱線組成。當(dāng)腔體所在平面相對(duì)水平面傾斜或腔體受到加速度的作用時(shí),熱線的阻值發(fā)生變化,并且熱線阻值的變化是角度q或加速度的函數(shù),因而也具有擺的效應(yīng)。其中熱線阻值的變化是氣體與熱線之間的能量交換引起的。

 

以上就是對(duì)三種無(wú)線傾角計(jì)工作原理的簡(jiǎn)單介紹,知道了工作原理之后,我們需要了解無(wú)線傾角計(jì)的用途,傾角計(jì)是用來(lái)對(duì)各種建筑物做傾斜監(jiān)測(cè)的,基本都能實(shí)現(xiàn)高精度的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)獲取。比如ZDHD-ZWQJ款無(wú)線低功耗傾角計(jì),出自中地恒達(dá),能在-40—85℃的寬溫環(huán)境中保持較高的測(cè)量精度、并且超低功耗和響應(yīng)速度快,非常適合長(zhǎng)期的野外監(jiān)測(cè)工作。無(wú)需人工值守。


2021-07-16 16:27:44 1900 0

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