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  瘋狗* 2016-10-14 00:00:00

  蛋白質(zhì)組學(Proteomics)研究生物質(zhì)譜技術(shù) 對分離的蛋白質(zhì) 進行鑒定是蛋白質(zhì)組研究的重要內(nèi)容，蛋白質(zhì)微量測序、氨基酸組成分析等傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)不能滿足高通量和GX率的要求，生物質(zhì)譜技術(shù)是蛋白質(zhì)組學(Proteomics)的另一支撐技術(shù)。 生物質(zhì)譜技術(shù)在離子化方法上主要有兩種軟電離技術(shù)，即基質(zhì)輔助激光解吸電離(matrix―assisted laser desorption／ionization，MALDl)和電噴霧電離(electrospray ionization，ESl)。MALDI是在激光脈沖的激發(fā)下，使樣品從基質(zhì)晶體中揮發(fā)并離子化。ESI使分析物從溶液相中電離，適合與液相分離手段(如液相色譜和毛細管電泳(capillary electrophoresis))聯(lián)用。MALDI適于分析簡單的肽混合物，而液相色譜與ESI―MS的聯(lián)用(LC―MS)適合復(fù)雜樣品的分析。 軟電離技術(shù)的出現(xiàn)拓展了質(zhì)譜的應(yīng)用空間，而質(zhì)量分析器的改善也推動了質(zhì)譜儀技術(shù)的發(fā)展。生物質(zhì)譜的質(zhì)量分析器主要有4種：離子阱(iontrap，IT)、飛行時間(TOF)、四極桿(quadrupole)和傅立葉變換離子回旋共振(Fourier transform ion cyclotron resonance，F(xiàn)TICR)。它們的結(jié)構(gòu)和性能各不相同，每一種都有自己的長處與不足。它們可以單獨使用，也可以互相組合形成功能更強大的儀器。 離子阱質(zhì)譜靈敏度較高，性能穩(wěn)定，具備多級質(zhì)譜能力，因此被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)組學(Proteomics)研究，不足之處是質(zhì)量精度較低。與離子阱相似，傅立葉變換離子回旋共振(FTICR)質(zhì)譜也是一種可以“捕獲”離子的儀器，但是其腔體內(nèi)部為高真空和高磁場環(huán)境，具有高靈敏度、寬動態(tài)范圍、高分辨率和質(zhì)量精度(質(zhì)量準確度可很容易地小于1mg／L)，這使得它可以在一次分析中對數(shù)百個完整蛋白質(zhì)分子進行質(zhì)量測定和定量。FTICR―MS的一個重要功能是多元串級質(zhì)譜，與通常的只能選一個母離子的串級質(zhì)譜方式不同，F(xiàn)TICR―MS可以同時選擇幾個母離子進行解離，這無疑可以大大增加蛋白質(zhì)鑒定工作的通量。但是它的缺點也很明顯，操作復(fù)雜、肽段斷裂效率低、價格昂貴等，這些缺點限制了它在蛋白質(zhì)組學(Proteomics)中的廣泛應(yīng)用。MALDI通常與TOF質(zhì)量分析器聯(lián)用分析肽段的精確質(zhì)量，而ESI常與離子阱或三級四極桿質(zhì)譜聯(lián)用，通過碰撞誘導(dǎo)解離(collision―induceddissociation，CID)獲取肽段的碎片信息。

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