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- 醉愛魚62 2017-02-21 00:00:00
- 1.wash buffer中加入無水乙醇后，終濃度差不多就是70%的乙醇溶液了，在沉淀的DNA中，由于過多的鹽雜質(zhì)存在，影響DNA的酶切等反應，wash buffer就是洗去這些鹽雜質(zhì)的. 2.用無水乙醇沉淀DNA，這是實驗中Z常用的沉淀DNA的方法.乙醇的優(yōu)點是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑.DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合.一般實驗中，是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混合，其乙醇的Z終含量占67％左右.因而也可改用95％乙醇來替代無水乙醇（因為無水乙醇的價格遠遠比95％乙醇昂貴）.但是加95％的乙醇使總體積增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA損失也增大，尤其用多次乙醇沉淀時，就會影響收得率.折中的做法是初次沉淀DNA時可用95％乙醇代替無水乙酵，Z后的沉淀步驟要使用無水乙醇.也可以用0.6倍體積的異丙醇選擇性沉淀DNA.一般在室溫下放置15－30分鐘即可.如果你沒有加無水乙醇，核酸不能沉淀，都隨洗液棄掉了. 3.十二烷基硫酸鈉（sodium dodecylsulfate）遇到鉀離子后變成了十二烷基硫酸鉀（potassium dodecylsulfate， PDS），鉀離子置換了SDS中的鈉離子形成了不溶性的PDS，而高濃度 的鹽，使得沉淀更完全.大家知道SDS專門喜歡和蛋白質(zhì)結(jié)合，平均兩個氨基酸上結(jié)合一個SDS分子，鉀鈉離子置換所產(chǎn)生的大量沉淀自然就將絕大部分蛋白質(zhì) 沉淀了，讓人高興的是大腸桿菌的基因組DNA也一起被共沉淀了.這個過程不難想象，因為基因組DNA太長了，長長的DNA自然容易被PDS給共沉淀了，盡管SDS并不與DNA分子結(jié)合. 需要特別說明的是：醋酸的加入是為了中和NaOH，因為長時間的堿性條件會打斷DNA，所以要中和之.基因組DNA一旦發(fā)生斷裂，只要是50－100 kb大小的片斷，就沒有辦法再被PDS共沉淀了.所以堿處理的時間要短，而且不得激烈振蕩，不然Z后得到的質(zhì)粒上總會有大量的基因組DNA混入.
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而在影響核酸檢測結(jié)果的眾多因素當中，“核酸提取”以其重要性被視為關(guān)鍵一環(huán)，其成敗與否，直接關(guān)系到下游的檢測數(shù)據(jù)，影響檢測人員對結(jié)果的判斷。
逗點生物結(jié)合多年樣本前處理經(jīng)驗，不斷優(yōu)化試劑配方，推出全新升級不含蛋白酶K的病毒 DNA/RNA提取試劑盒（預分裝磁珠法）。
該試劑盒可用于從拭子保存液中提取新型冠狀病毒RNA，相關(guān)試劑按最優(yōu)比例預分裝在96孔深孔板中，極大簡化步驟，配合逗點生物的自動化核酸提取儀使用，可進一步實現(xiàn)高通量、全自動的核酸提取。
一、產(chǎn)品參數(shù)
二、核心優(yōu)勢
1）優(yōu)化適配性
相關(guān)試劑配合儀器特性專門優(yōu)化，保證提取效果
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兼容自動化設備，滿足不同通量提取需求
5）核酸質(zhì)量高
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