全部評論(1條)
-
- asling1231211 2016-12-27 00:00:00
- 1、常用玻璃儀器的準備 制備培養(yǎng)基所用的吸管、錐形瓶、毛細吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷后用清水沖洗干凈，晾干后備用. （1）平皿用紙或布包好，或裝在金屬盒內(nèi)，于121℃高壓蒸汽菌3min后烘干，備用. （2）試管管口用棉花塞或硅氟塑料試管塞塞好，再用布或報紙包扎好，121℃高壓蒸汽滅菌20℃后烘干，備用. （3）吸管及滴管先用少許棉花塞于吸口端（防止污染物吸出，或橡皮帽內(nèi)的氣體污染），然后用紙包后或裝入金屬吸管筒內(nèi)，于121℃高壓蒸汽滅菌20min后烘干，備用.其他玻璃器皿均應(yīng)按上法處理，也應(yīng)裝金屬筒內(nèi)160℃干熱滅菌2h后，備用. 2、培養(yǎng)基的制備及儲存 （1）溶化：一般應(yīng)放在玻璃器皿或搪瓷齊內(nèi).加入蒸餾水，隔水加熱以促其溶解，加熱時應(yīng)經(jīng)常攪拌，防止焦結(jié)，待其溶解后補足水分. 在使用干燥培養(yǎng)基時，先將蒸餾水按定量加入容器中，然后稱取一定量培養(yǎng)基干粉放入水中，靜置10—15min，攪拌，振蕩，或延長時間以促進溶解，一般不要熱，必要時加熱，但時間不宜過長，溫度不宜過高，避免某些營養(yǎng)成分被破壞. （2）校正酸堿度（調(diào)節(jié)pH）：培養(yǎng)基必須有適當(dāng)?shù)膒H.因此測定pH是培養(yǎng)基配制過程中的重要步驟之一，測定pH的標準溫度為25士2℃.調(diào)節(jié)pH可用無菌的1mol/l氫氧化鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液.當(dāng)調(diào)節(jié)緩沖液的pH時，宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧化鉀溶液.滅菌后的pH會比滅菌前的pH升高或降低，一般高壓滅菌前培養(yǎng)基的pH會比Z終pH調(diào)高0.2左右，滅菌后基本合適.因此對培養(yǎng)基、緩沖液、試劑在滅菌前后的pH均進行測定，并記下每次pH的測定結(jié)果，有助于積累數(shù)據(jù)考察每種培養(yǎng)基、緩沖液、試劑對滅菌程序的耐受性，從而指導(dǎo)滅菌前pH的調(diào)節(jié).干燥培養(yǎng)基一般已校正過pH，用時也必須再驗證.測定時，一般用指示劑滴入培養(yǎng)基觀察其顏色的變化，或用pH計校正，如與所需pH不符，可用以上的酸或堿液加以校正.調(diào)整pH后要加熱過濾，使培養(yǎng)基澄清. （3）培養(yǎng)基的分裝：大批量配制時使用的自動分配器須經(jīng)校準和確認.每次使用前后，均要對分配器的管道系統(tǒng)進行沖洗，在分裝無菌培養(yǎng)基前，則要采用無菌硅膠管. 固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中，高壓滅菌后根據(jù)需要分裝平皿或試管. 平皿：傾注平皿，應(yīng)在無菌室中放置3—4h，如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱 中倒置30—60min.讓水蒸汽自然蒸發(fā). 斜面：制備低層斜面分裝于試管，約占容積1/5，滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上，使成斜度，分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基，如沾有培養(yǎng)基應(yīng)用布抹去，以避免污染. 高層斜面：制備高層斜面分裝于試管，約占試管容積的1/3，滅菌后趁熱放置成高層短斜面，待其凝固后應(yīng)用. 分裝好的培養(yǎng)基或緩沖液等及時密封后必須在配制當(dāng)天（2h內(nèi)Z佳）進行滅菌處理.液體、半固體培養(yǎng)基一般在高壓滅前分裝，約裝試管容積的1/3，在滅菌后還要加其他成分的液體、半固體培養(yǎng)基，滅菌后再分裝于滅菌試管或錐形瓶中. 培養(yǎng)基的滅菌：培養(yǎng)基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌，各種培養(yǎng)基的滅菌時間和壓力，按其成分不同而定.普通培養(yǎng)基采用121℃、103.42kPa滅菌15min，但容器和裝量較大時，應(yīng)延長至20min.含糖培養(yǎng)基115℃、68.85kPa滅菌30min.含糖、血清、雞蛋等培養(yǎng)基可用流動蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min，連續(xù)3d，間歇滅菌.血清或組織液，采用低熱56—58水浴1h，連續(xù)5—6d滅菌，一些遇高溫即被破壞的物質(zhì)如尿素、腹水等，可用細菌過濾器，過濾CJ.高壓滅菌應(yīng)嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行，必須逐漸加熱，徹底排除滅菌器內(nèi)的空氣，再逐漸升壓保持預(yù)定的壓力和時間，達到全部殺滅微生物.以上的滅菌時間和溫度要經(jīng)過驗證確認，如不同類型培養(yǎng)基混合一起滅菌時宜采用115℃、68.85kPa滅菌30min為好.
-
贊(9)
回復(fù)(0)
熱門問答
- 微生物實驗中培養(yǎng)基的配置應(yīng)該注意什么
- 微生物實驗中培養(yǎng)基的配置應(yīng)該注意什么
- 微生物實驗中培養(yǎng)基的配置應(yīng)該注意什么？
- 培養(yǎng)基的配置應(yīng)該注意哪幾大步驟?
- PDA培養(yǎng)基配置需注意事項及微生物實驗需要注意的細節(jié)問題
- 微生物配置培養(yǎng)基用什么水
- 微生物實驗中用到培養(yǎng)基的有哪些?
- 微生物方面... 微生物方面 展開
- 微生物中什么叫EMS培養(yǎng)基
- 在免疫印跡實驗檢測蛋白的實驗中應(yīng)該注意什么問題
- 土壤微生物的DNA提取應(yīng)該注意哪些
- 微生物在固體斜面和液體培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)接的注意點？？？
- 微生物限度用培養(yǎng)基適應(yīng)性檢查中的對照培養(yǎng)基指的是什么？
- 配置培養(yǎng)基的基本步驟有哪些？應(yīng)注意什么問題
- 微生物實驗怎么配培養(yǎng)基的成分??？
- 能詳細到各類微生物更好
- 微生物實驗室長菌的培養(yǎng)基怎么處理
- 怎么樣配置培養(yǎng)基
- 我要配置很普通的培養(yǎng)基，只要細菌可以存活即可。我試過直接用瓊脂，但不行。瓊脂中是不是沒有糖分？我該怎么配置？哪位高手告訴我啊謝謝
- 使用微生物限度檢查儀應(yīng)該注意的相關(guān)要點
微生物限度檢查儀適用于純化水和注射用水的微生物限度檢測,也可以用于其他樣品的微生物負載檢測。作為微生物限度檢測的設(shè)備，操作該儀器除了正確的方法以外，還應(yīng)該注意下列的相關(guān)要點：
1、添加供試液時的液體高度不能超過濾杯大刻度。
2、隨時注意抽濾瓶情況，液體不能淹沒進氣口?？梢愿鶕?jù)實際情況選擇抽濾瓶的容積。
3、若無菌室采用化學(xué)劑消毒時，將儀器置密封罩內(nèi)，或搬出無菌室，以免損壞電子部件腐蝕金屬部件。
4、環(huán)境溫度控制在10℃～30℃。相對濕度≤80%RH無水珠凝結(jié)現(xiàn)象。
5、當(dāng)供試品中含有不溶性的顆粒，懸浮物時，可能導(dǎo)致濾膜堵塞影響過濾，應(yīng)將供試液進行預(yù)處理，出去顆?；驊腋∥?。
6、抽濾前，應(yīng)確保管道密封性良好。
7、微生物限度檢查儀有效接地。
8、每次使用結(jié)束后，儀器表面用酒精擦拭。
9、使用一次性微生物限度過濾器，打開無菌包裝前，先檢查包裝是否破損。
10、根據(jù)供試品性狀來選擇濾膜材質(zhì)，過濾前后應(yīng)保證濾膜的完整性。
11、儀器不工作時，斷開電源。儀器待機時，將電磁閥關(guān)閉，設(shè)置為“off”狀態(tài)。
12、不能抽濾強酸?強堿?強氧化劑?強腐蝕等液體。
13、根據(jù)供試品性狀來選擇濾膜材質(zhì)，過濾前后應(yīng)保證濾膜的完整性。
14、儀器不工作時，請斷電。
15、不能抽濾強酸、強堿、強氧化劑、強腐蝕等液體。
16、當(dāng)供試品中含有不溶性的顆粒，懸浮物時，可能導(dǎo)致濾膜堵塞影響過濾，應(yīng)將供試品進行預(yù)處理，除去顆?；驊腋∥?。
17、抽濾前，應(yīng)確保管道密封性良好。
- 在微生物的培養(yǎng)基的配置過程怎樣進行PH的調(diào)節(jié)
- 微生物檢驗原始記錄里需要寫培養(yǎng)基配置記錄嗎
- 氣體檢測儀在使用中應(yīng)該注意什么呢？
4月突出貢獻榜
推薦主頁
最新話題
滬公網(wǎng)安備 31011502008050號
參與評論
登錄后參與評論