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- 楊沐雨12 2017-05-17 00:00:00
- 培養(yǎng)瓶的清洗與使用 1.浸泡:A.新的培養(yǎng)瓶由于在生產(chǎn)過程中使玻璃表面呈堿性并帶有鉛、砷等對細胞有毒的物質(zhì),故要先將培養(yǎng)瓶于5%稀鹽酸溶液中浸泡過夜。浸泡時,完全浸入,瓶內(nèi)無氣泡空隙殘留。 B.使用過后的培養(yǎng)瓶應(yīng)立即于加有洗衣粉的自來水中浸泡,至少6h。浸泡時,完全浸入,瓶內(nèi)無氣泡空隙殘留。(浸泡過5%稀鹽酸溶液的新培養(yǎng)瓶,初步刷洗,浸入加有洗衣粉的自來水中,同1.B.) 2.刷洗:用軟毛刷刷洗培養(yǎng)瓶,以去除瓶內(nèi)外表面的雜質(zhì)。需注意兩點:一是防止損壞培養(yǎng)瓶內(nèi)表面光潔度以影響細胞的生長,刷洗時不宜用力過猛;二是不能留有死角,要特別注意瓶角和細胞貼壁面的刷洗。刷洗后要將培養(yǎng)瓶沖洗干凈,一般至少要沖20遍,直至瓶壁不掛水珠。放入烘箱內(nèi)(四樓),烘干。(烘干是為了防止酸液被稀釋。) 3.泡酸:泡酸可完全清除殘留的未刷洗掉的微量雜質(zhì)。將培養(yǎng)瓶泡酸時,要戴3層手套,注意防止酸液濺起來,灼傷皮膚,應(yīng)將瓶子輕輕浸入酸液。瓶內(nèi)完全充滿酸液,不留氣泡空隙,一般需浸泡4~6h。(由于我們的酸液顏色不是紅棕色,需浸泡過夜。)注意:瓶蓋不能泡濃酸,應(yīng)置于5%稀鹽酸溶液中浸泡,完全沒入酸液中。 4.沖洗:用流水徹底沖洗。首先用自來水將瓶子灌滿,再倒掉,重復(fù)20遍以上,直至不留任何殘跡,瓶壁不掛水珠;然后用二蒸水洗2~3遍;Z后用三蒸水洗1遍。放入烘箱內(nèi)(四樓),烘干。備用。 5.滅菌:用前1~2天,取出瓶子,擰松蓋子,用牛皮紙(我們用報紙)包住瓶口,系上繩子,貼上滅菌指示膠帶,作好標(biāo)記?;蛘邤Q松蓋子,直接放入鋪有錫箔紙的鋁盒內(nèi),鋁盒外包上報紙,系上繩子,貼上滅菌指示膠帶,作好標(biāo)記(鋁盒上可貼上標(biāo)簽紙,寫上物品名稱、滅菌時間、名字,便于用時尋找)。放入高壓蒸汽滅菌器內(nèi)(檢查滅菌器內(nèi)的水位是否漫過Z下層籃子的底部),121℃,30min滅菌。滅菌后,待溫度降到60℃以下時,開蓋取出,放入無菌烘箱內(nèi)烘干。烘干后,擰緊瓶蓋,取出。噴灑酒精后放入超凈工作臺或放入專門放置滅菌后物品的柜子里。
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