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- 為什么用光電倍增管來(lái)進(jìn)行光子計(jì)數(shù)?
- 什么叫光子計(jì)數(shù)技術(shù)
- 光子計(jì)數(shù)探頭模塊為什么沒有增益調(diào)節(jié)能力?
歡迎大家來(lái)到《濱松光電知識(shí)小課堂》產(chǎn)品技術(shù)知識(shí)分享欄目,本欄目致力于將光電相關(guān)的產(chǎn)品技術(shù)知識(shí)掰開了,揉碎了,一點(diǎn)點(diǎn)與大家進(jìn)行分享。本期話題“光子計(jì)數(shù)探頭模塊為什么沒有增益調(diào)節(jié)能力”。
熟悉光電倍增管的客戶都知道,我們可以通過(guò)調(diào)節(jié)倍增級(jí)電壓來(lái)調(diào)節(jié)光電倍增管的增益,也可以稱為調(diào)節(jié)光電倍增管的放大倍數(shù)。我們分別以光電倍增管裸管R928和光電倍增管模塊H10721為例,前者可以調(diào)節(jié)工作電壓來(lái)調(diào)節(jié)放大倍數(shù),后者調(diào)節(jié)外部的增益電壓來(lái)調(diào)節(jié)光電倍增管模塊的放大倍數(shù)。
R928調(diào)節(jié)電壓和放大倍數(shù)之間的關(guān)系
H10721調(diào)節(jié)電壓和放大倍數(shù)之間的關(guān)系
但是,很多客戶都會(huì)問(wèn):
常見的光子計(jì)數(shù)探頭模塊,比如H10682和CH299,他們也屬于光電倍增管模塊,為什么沒有增益調(diào)節(jié)的功能呢?
首先,光子計(jì)數(shù)探頭模塊不同于常見的光電倍增管模塊,它是在電流型光電倍增管模塊的基礎(chǔ)上增加了光子信號(hào)處理電路。
該電路能將單個(gè)光子激發(fā)的脈沖信號(hào),經(jīng)過(guò)放大、鑒別、整形后輸出對(duì)應(yīng)的光子數(shù)邏輯脈沖,所以,我們能夠通過(guò)輸出的脈沖數(shù)來(lái)進(jìn)行光子的計(jì)數(shù)。
當(dāng)光電倍增管接收的光亮從一個(gè)很強(qiáng)的范圍變到單個(gè)光子信號(hào)時(shí),光電倍增管的輸出會(huì)產(chǎn)生一個(gè)很明顯的變化,可以參考以下的圖。
常規(guī)的光電倍增管模塊由于后端沒有信號(hào)處理電路,直接輸出就是光電倍增管本身的信號(hào)。此時(shí),如果我們對(duì)光電倍增管進(jìn)行增益調(diào)節(jié),可以有效地放大信號(hào)。
光子計(jì)數(shù)探頭模塊,由于探測(cè)的光強(qiáng)特別微弱,基本都是以單個(gè)光子的形式出現(xiàn),光電倍增管的輸出就會(huì)如下圖所示,每一個(gè)脈沖都代表一個(gè)光子信號(hào)。此時(shí),如果我們?cè)黾訉?duì)光子計(jì)數(shù)探頭的增益,可以看到,單個(gè)光子激發(fā)脈沖的高度會(huì)顯著提高。但是,對(duì)應(yīng)的脈沖個(gè)數(shù)沒有發(fā)生變化。也就是說(shuō),增加增益,不會(huì)對(duì)光子個(gè)數(shù)產(chǎn)生影響。
同時(shí),如果我們?cè)黾庸庾佑?jì)數(shù)探頭的增益,在放大光子激發(fā)脈沖高度的同時(shí),也會(huì)放大噪聲信號(hào)。如果放大的噪聲信號(hào)超過(guò)后面鑒別器的檢測(cè)下限,會(huì)引起由于引入噪聲計(jì)數(shù)而導(dǎo)致測(cè)量的不準(zhǔn)確。所以,光子計(jì)數(shù)探頭需要一個(gè)合適的增益,在放大微弱信號(hào)的同時(shí),還能夠做到噪聲和信號(hào)的分離,實(shí)現(xiàn)真正的光子信號(hào)探測(cè)輸出。
如下圖所示,當(dāng)我們改變光電倍增管的工作電壓時(shí),信噪比會(huì)在一段區(qū)間內(nèi)基本保持不變,這段曲線也稱之為坪特性曲線。在這段范圍內(nèi),增益的增加對(duì)計(jì)數(shù)值沒有明顯的增加。所以,一般的光子計(jì)數(shù)探頭的增益電壓設(shè)置在坪區(qū)的電壓范圍之內(nèi),可以得到一個(gè)穩(wěn)定的計(jì)數(shù)值。
光子計(jì)數(shù)探頭在出廠前,我們都已經(jīng)將光子計(jì)數(shù)探頭的工作電壓調(diào)節(jié)在一個(gè)穩(wěn)定的工作電壓范圍之內(nèi)。所以,在收到貨后,大家只需要提供供電電壓,光子計(jì)數(shù)探頭就可以正常工作了。
本期主講工程師介紹:濱松產(chǎn)品技術(shù)工程師馬進(jìn)發(fā),畢業(yè)于西安理工大學(xué),目前負(fù)責(zé)濱松光電倍增管、電子倍增器、MCP等產(chǎn)品的技術(shù)支持,主要應(yīng)用方向?yàn)榇髿饧す饫走_(dá)、質(zhì)譜等。擅長(zhǎng)機(jī)械設(shè)計(jì),已經(jīng)通過(guò)國(guó)內(nèi)CAXC計(jì)算機(jī)輔助認(rèn)證和全 球CSWP工程師認(rèn)證。
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- 熒光顯微系統(tǒng)的新高度——Luminosa單光子計(jì)數(shù)共聚焦顯微
過(guò)去的幾十年中,德國(guó)PicoQuant的研發(fā)人員一直致力于制造最具定量性和重復(fù)性的時(shí)間分辨熒光顯微鏡系統(tǒng)。現(xiàn)在他們終于邁出了這一步,完成了一套更易于使用、且不影響靈敏度的系統(tǒng)。該系統(tǒng)打破常規(guī),無(wú)需培訓(xùn)物理學(xué)支持人員便可輕松使用。全新的Luminosa可以讓每個(gè)分子生物物理學(xué)或結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究人員輕松地將單分子和時(shí)間分辨熒光顯微鏡的方法添加到他們的“工具箱”中。
Luminosa系統(tǒng)的主要功能包括一鍵式自動(dòng)對(duì)準(zhǔn)程序和基于上下文的直觀工作流程。例如,系統(tǒng)可以自動(dòng)識(shí)別單個(gè)分子,或者它可以自動(dòng)確定單個(gè)分子FRET (smFRET) 的校正因子。
對(duì)于經(jīng)驗(yàn)豐富的專家,它仍具有先進(jìn)的靈活性。所有光機(jī)組件均可訪問(wèn),數(shù)據(jù)以開放格式存儲(chǔ),工作流程和圖形用戶界面均可定制。用戶可以完全訪問(wèn)實(shí)驗(yàn)參數(shù),例如可調(diào)節(jié)的觀察量。
全新的Luminosa本身就是一套時(shí)間分辨熒光顯微的多功能“工具箱”。它用于單分子水平的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究。這些方法包括熒光壽命成像 (FLIM)、用于快速過(guò)程的rapidFLIMHiRes、FLIM-FRET、單分子FRET(突發(fā)和時(shí)間跟蹤分析)、熒光相關(guān)光譜 (FCS)、各向異性成像和微分干涉對(duì)比 (DIC) 成像。
隨著時(shí)間分辨熒光顯微技術(shù)的用戶群體不斷擴(kuò)大,對(duì)高重復(fù)性、高準(zhǔn)確性和寶貴實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)規(guī)則的需求變得尤為明顯。Luminosa已經(jīng)包含了科學(xué)家集體努力制定的經(jīng)驗(yàn)指南,例如來(lái)自于單分子FRET群體在基準(zhǔn)研究中的經(jīng)驗(yàn)指南。
Luminosa 是一款將超高數(shù)據(jù)質(zhì)量與超簡(jiǎn)日常操作相結(jié)合的單光子計(jì)數(shù)共聚焦顯微鏡。它可以輕松集成到任何研究人員的“工具箱”中,成為開始探索使用時(shí)間分辨熒光方法科學(xué)家以及想要突破極限專家的省時(shí)、可靠的“伙伴”。它是一個(gè)真正的顯微鏡系統(tǒng),每個(gè)人都可以依賴。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◆ 全軟件控制共聚焦系統(tǒng),基于倒置顯微鏡
◆ 激光波長(zhǎng)從375到1064 nm可選
◆ VarPSF:觀察量高精度調(diào)節(jié),用于FCS和單分子FRET實(shí)驗(yàn)
◆ 電動(dòng)平移臺(tái),可在傳動(dòng)和FLIM模式下進(jìn)行“圖像拼接”
◆ 掃描選項(xiàng):FLIMbee振鏡掃描和壓電物鏡掃描
◆ 最多可集成SPAD, PMT或Hybrid-PMT組成相互獨(dú)立的6通道探測(cè)單元
◆ <700 ps通道的死區(qū)時(shí)間和5 ps時(shí)間分辨率
◆ 一鍵式自動(dòng)對(duì)齊,從而獲得一致的最佳性能◆ 借助GPU加速算法和基于上下文工作流程的FCS、FLIM和單分子檢測(cè),以最少的用戶交互快速獲得結(jié)果
產(chǎn)品領(lǐng)域:
◆ 單分子水平的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)生物學(xué)
◆ 相分離驅(qū)動(dòng)的細(xì)胞機(jī)制
◆ 環(huán)境傳感◆ 細(xì)胞膜動(dòng)力學(xué)和結(jié)構(gòu)的映射
核心方法:
◆ 熒光壽命成像 (FLIM)
◆FLIM-FRET – 基于壽命的F?rster共振能量轉(zhuǎn)移
◆smFRET – 單分子F?rster共振能量轉(zhuǎn)移
◆熒光相關(guān)光譜(FCS)
◆熒光壽命相關(guān)光譜(FLCS)
◆熒光互相關(guān)光譜(FCCS)◆各向異性成像
為此,德國(guó)PicoQuant公司特邀產(chǎn)品經(jīng)理Evangelos Sisamakis博士在2022年10月6日-10月7日進(jìn)行2場(chǎng)線上新品演示推廣研討會(huì),重點(diǎn)介紹Luminosa是如何讓每個(gè)分子生物物理學(xué)或結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究人員輕松地將單分子和時(shí)間分辨熒光顯微鏡的方法添加到他們的“工具箱”中,成為開始探索使用時(shí)間分辨熒光方法的科學(xué)家以及想要突破極限專家的省時(shí)、可靠的“伙伴”。歡迎各位有興趣的研究人員報(bào)名注冊(cè)https://www.picoquant.com/events/workshops-and-courses/category/webinar#luminosa 。
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