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The continuous phase is composed of fluorinated oil (Novec-7500, 3M) containing 1% or 4% (w/w) fluorosurfactant (Fluosurf, Emulseo, France) for isothermal amplification and PCR amplification, respectively.
連續(xù)相由含1%或4% (w/w)氟表面活性劑(Fluosurf, Emulseo, France)的氟化油(Novec-7500, 3M)組成,分別用于等溫?cái)U(kuò)增和PCR擴(kuò)增。
Roberta Menezes; Adèle Dramé-Maigné; Valérie Taly; Yannick Rondelez; Guillaume Gines, Streamlined digital bioassays with a 3D printed sample changer, Royal Society of Chemistry (RSC), Analyst, 2020,145, 572-581. DOI: 10.1039/C9AN01744E .
3D打印的樣品轉(zhuǎn)換器進(jìn)行的流線型數(shù)字生物實(shí)驗(yàn)
基于微滴的微流體已經(jīng)滲透到生命科學(xué)的許多領(lǐng)域,包括生物化學(xué)、生物學(xué)和醫(yī)學(xué)。油包水液滴作為獨(dú)立的飛升到納升的儲(chǔ)層,以最小的樣品輸入實(shí)現(xiàn)(生物)化學(xué)反應(yīng)的并行化。在液滴微流控的應(yīng)用范圍中,利用泊松分離隔間中的單分子進(jìn)行生物分子的數(shù)字檢測(cè),由于這些方法的高精度、靈敏度和魯棒性而受到了相當(dāng)大的關(guān)注。然而,雖然液滴通量可以非常高,但與基于孔板的分析相比,這些方法的樣品通量較差。這種限制來自于必須將每個(gè)樣品獨(dú)立地轉(zhuǎn)化為單分散乳液。本文報(bào)告了一種通用裝置,該裝置使用單個(gè)微流控芯片對(duì)多達(dá)15個(gè)樣品進(jìn)行快速順序劃分。3D打印的樣品轉(zhuǎn)子裝載了所有樣品并連接到壓力源。然后使用簡(jiǎn)單的磁驅(qū)動(dòng)將樣品注入微流控芯片中,而不會(huì)造成壓力中斷。這個(gè)過程產(chǎn)生單分散液滴具有高樣品到樣品的一致性。我們還描述了一種熒光條形碼策略,允許所有樣品同時(shí)收集,孵育,成像和分析,從而顯著減少化驗(yàn)的時(shí)間。作為一個(gè)應(yīng)用實(shí)例,我們?cè)诓坏?小時(shí)的時(shí)間內(nèi)對(duì)8個(gè)樣本的DNA擴(kuò)增子進(jìn)行了液滴數(shù)字PCR定量分析。我們進(jìn)一步驗(yàn)證了我們的方法,證明了使用等溫核酸擴(kuò)增化學(xué)方法對(duì)來自人類樣本的11個(gè)microRNA進(jìn)行平行定量。作為一個(gè)片外裝置,樣品轉(zhuǎn)換器可以連接到各種微流體幾何形狀,因此,用途廣泛。
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