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- 仴愮愰亾彷徨 2017-02-09 00:00:00
- 可以,而且實際上也是這么干的。 不過用紫外分光光度法來分析有兩種,一種是直接把蛋白質(zhì)或氨基酸溶液在OD280下看峰,高級一點的如nanodrop這種機器就可以直接給出蛋白濃度,但這種方法極易受到抽提蛋白時去污劑的影響而出現(xiàn)嚴(yán)重偏差,所以如果是在緩沖液中的純蛋白是可以這么檢測定量的,比如買來的抗體就會提供OD280的數(shù)值來計算濃度。 實際中常用的幾種蛋白定量是將蛋白或氨基酸的溶液與某些化學(xué)物質(zhì)反應(yīng)(如bca法、Broadford法等)后在上紫外分光光度計測量OD值,用標(biāo)準(zhǔn)蛋白如BSA做一個標(biāo)準(zhǔn)曲線,再將未知蛋白測得的OD與標(biāo)曲進行比較測得準(zhǔn)確的濃度,在一定的濃度范圍內(nèi),這些方法的準(zhǔn)確性很高。
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