了解免疫細(xì)胞代謝在建立新一代細(xì)胞療法中的核心作用

成功開發(fā)基于細(xì)胞的免疫療法需要清楚地了解與抗腫瘤活性相關(guān)的細(xì)胞屬性。研究表明，代謝特征是 T 細(xì)胞持久性和適應(yīng)性的決定因素，這意味著代謝測(cè)量可以幫助您開發(fā)有效的 T 細(xì)胞療法。

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Agilent Seahorse XF T 細(xì)胞代謝分析試劑盒

探索免疫細(xì)胞代謝在構(gòu)建下一代細(xì)胞療法中的核心作用。開發(fā)成功的基于細(xì)胞的免疫療法需要清楚地了解與抗腫瘤活性相關(guān)的細(xì)胞屬性。研究表明，代謝特征是 T 細(xì)胞持久性和適應(yīng)性的決定因素，這意味著代謝測(cè)量可以幫助您開發(fā)有效的 T 細(xì)胞療法。

優(yōu)化免疫細(xì)胞療法產(chǎn)品

安捷倫 Seahorse XF Pro 與 XF T 細(xì)胞代謝分析試劑盒相結(jié)合，使您能夠獲得與 T 細(xì)胞持久性和代謝適應(yīng)性相關(guān)的可靠、準(zhǔn)確的生物能量代謝測(cè)量結(jié)果。

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構(gòu)建新一代細(xì)胞療法

安捷倫 Seahorse XF 技術(shù)使您能夠測(cè)量和調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的命運(yùn)、適應(yīng)性和功能，從而改善細(xì)胞性能。閱讀我們的全新電子書，深入了解該領(lǐng)域的領(lǐng)先研究人員如何在細(xì)胞療法生產(chǎn)過程中，使用安捷倫 Seahorse XF 技術(shù)應(yīng)對(duì)細(xì)胞工程的挑戰(zhàn)，測(cè)試細(xì)胞結(jié)構(gòu)以及監(jiān)測(cè)產(chǎn)品效價(jià)。

僅供科研使用，不用于臨床診斷用途。

生命科學(xué)研究離不開各式各樣的模式生物，模式生物由于其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、生活周期短、培養(yǎng)簡(jiǎn)單、基因組小等特點(diǎn)，在生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。模式生物作為材料不僅能回答生命科學(xué)研究中Z基本的生物學(xué)問題，對(duì)人類一些疾病的ZL也有借鑒意義。常見的模式生物有真菌中的酵母，低等無脊椎動(dòng)物中的線蟲，昆蟲綱的果蠅，魚綱的斑馬魚，哺乳綱的小鼠以及植物中的擬南芥。

高內(nèi)涵系統(tǒng)不僅僅適用于各種各樣的細(xì)胞模型，對(duì)各種小型的模式生物也非常友好，通過將這些模式生物做一些預(yù)處理，放在微孔板中，我們就可以用高內(nèi)涵系統(tǒng)來拍攝和分析它們。本期和下期，我們將隆重介紹高內(nèi)涵與這些模式生物的故事。

酵 母

常用于模式生物的酵母有兩個(gè)物種：出芽酵母和裂殖酵母，以出芽酵母為例，其細(xì)胞為球形或者卵形，直徑5–10μm。其繁殖的方法為出芽生殖。使用高內(nèi)涵系統(tǒng)，可以觀察和分析酵母的世代周期、蛋白定位等。

實(shí)驗(yàn)一

Hoechst 33342 染色酵母活細(xì)胞，通過63倍水浸式物鏡拍攝酵母細(xì)胞，高內(nèi)涵分析軟件Harmony自動(dòng)識(shí)別酵母細(xì)胞，PhenoLOGIC人工智能算法區(qū)分出芽細(xì)胞：

實(shí)驗(yàn)二

酵母細(xì)胞器相關(guān)蛋白的標(biāo)記，紅色標(biāo)記整個(gè)酵母細(xì)胞，綠色為不同細(xì)胞器，高內(nèi)涵分析軟件Harmony可識(shí)別不同的細(xì)胞器結(jié)構(gòu)，分析其熒光強(qiáng)度、形態(tài)學(xué)參數(shù)和紋理參數(shù)[1]。

下圖為突變體中蛋白定位發(fā)生變化[1]。

斑馬魚

斑馬魚也是成熟且常見的模式生物，常用于疾病研究中。斑馬魚成魚體長(zhǎng)5cm左右，幼魚0.5-2cm，全身透明。一般首先對(duì)斑馬魚進(jìn)行麻醉，再進(jìn)行高內(nèi)涵拍攝。

實(shí)驗(yàn)一

斑馬魚曲度的研究，毒性處理或一些基因突變會(huì)導(dǎo)致斑馬魚的曲度發(fā)生變化，高內(nèi)涵分析軟件Harmony可分析斑馬魚的軸向長(zhǎng)度、曲率、彎曲角度等參數(shù)：

實(shí)驗(yàn)二

斑馬魚血管研究，斑馬魚全身透明，一直以來都是非常好的心血管研究模式生物，通過20倍水浸式物鏡（NA1.0）對(duì)斑馬魚血管進(jìn)行成像，高內(nèi)涵分析軟件Harmony可通過一系列算法識(shí)別熒光標(biāo)記的斑馬魚血管結(jié)構(gòu)，也可對(duì)血管結(jié)構(gòu)做3D重構(gòu)，分析血管長(zhǎng)度、熒光強(qiáng)度等參數(shù)：

參考文獻(xiàn)

1.Yeast Proteome Dynamics from Single Cell Imaging and Automated Analysis. Cell. 2015 Jun 4;161(6):1413-24. doi: 10.1016/j.cell.2015.04.051.

關(guān)于珀金埃爾默：

珀金埃爾默致力于為創(chuàng)建更健康的世界而持續(xù)創(chuàng)新。我們?yōu)樵\斷、生命科學(xué)、食品及應(yīng)用市場(chǎng)推出獨(dú)特的解決方案，助力科學(xué)家、研究人員和臨床醫(yī)生解決Z棘手的科學(xué)和YL難題。憑借深厚的市場(chǎng)了解和技術(shù)專長(zhǎng)，我們助力客戶更早地獲得更準(zhǔn)確的洞見。在，我們擁有12500名專業(yè)技術(shù)人員，服務(wù)于150多個(gè)國(guó)家，時(shí)刻專注于幫助客戶打造更健康的家庭，改善人類生活質(zhì)量。2018年，珀金埃爾默年?duì)I收達(dá)到約28億美元，為標(biāo)準(zhǔn)普爾500指數(shù)中的一員，紐交所上市代號(hào)1-877-PKI-NYSE。了解更多有關(guān)珀金埃爾默的信息，請(qǐng)?jiān)L問www.perkinelmer.com.cn。

       高內(nèi)涵系統(tǒng)不僅僅適用于各種各樣的細(xì)胞模型，對(duì)各種小型的模式生物也非常友好，通過將這些模式生物放在微孔板中，我們就可以用高內(nèi)涵系統(tǒng)來拍攝和分析它們。本期，我們將繼續(xù)介紹高內(nèi)涵與這些模式生物的故事。

擬南芥

擬南芥為兩年生草本，一般可長(zhǎng)到7-40厘米，是植物學(xué)Z為常見的模式生物。其幼苗、根、莖、葉、原生質(zhì)體均可在高內(nèi)涵上進(jìn)行自動(dòng)成像和分析。

實(shí)驗(yàn)一

高內(nèi)涵用于研究活體擬南芥全葉組織中膜運(yùn)輸?shù)恼{(diào)節(jié)，40倍水浸式物鏡對(duì)擬南芥葉片進(jìn)行多層掃描，使用高內(nèi)涵分析軟件Harmony識(shí)別膜泡轉(zhuǎn)運(yùn)體，統(tǒng)計(jì)其數(shù)目、熒光強(qiáng)度、定位等參數(shù)[2]（如下圖）。

秀麗隱桿線蟲

秀麗隱桿線蟲在遺傳與發(fā)育生物學(xué)、行為與神經(jīng)生物學(xué)、衰老與壽命、人類遺傳性疾病都有非常重要的貢獻(xiàn)，成蟲體長(zhǎng)為1mm，通身透明。一般首先對(duì)秀麗線蟲進(jìn)行麻醉，再進(jìn)行高內(nèi)涵拍攝。

實(shí)驗(yàn)一

分析不同藥物處理后秀麗線蟲的數(shù)量和熒光強(qiáng)度，10倍物鏡拍攝多個(gè)視野，高內(nèi)涵分析軟件Harmony識(shí)別不同線蟲，計(jì)數(shù)并分析線蟲的熒光強(qiáng)度[3]（如下圖）。

小型藻類

藻類的生長(zhǎng)、繁殖與水體環(huán)境密切相關(guān)，常作為水體污染指示物，用于對(duì)水體的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)中。小型藻類可放置于微孔板中，通過離心使其貼底，從而進(jìn)行高內(nèi)涵的拍攝，根據(jù)研究?jī)?nèi)容不同，一般采用20倍-63倍水浸式物鏡進(jìn)行成像。很多研究中通過對(duì)葉綠體的成像來判斷藻類的狀態(tài)，成像過程需要設(shè)置針對(duì)葉綠素自發(fā)熒光特殊的檢測(cè)方法，即通過設(shè)定激發(fā)光和發(fā)射光，定義一個(gè)新的通道（excitation 460-490nm，emission 655-705nm）。

實(shí)驗(yàn)一

藻類用于檢測(cè)水質(zhì)污染，本研究中，模擬微塑料水質(zhì)污染，檢驗(yàn)裸藻的生長(zhǎng)狀態(tài)，采用20倍水浸式物鏡(NA 1.0) 進(jìn)行成像，綠色為微塑料，紅色為葉綠素。（如下圖）

生長(zhǎng)狀態(tài)不好的裸藻葉綠素?zé)晒鈴?qiáng)度減弱，形態(tài)發(fā)生變化。（如下圖）

左圖為Harmony軟件識(shí)別裸藻細(xì)胞，中間圖為通過形態(tài)區(qū)分形態(tài)正常的梭狀裸藻（紅色）和因毒性變圓的裸藻（綠色），右圖為通過熒光強(qiáng)度區(qū)分死亡裸藻（綠色）和存活裸藻（紅色）。

參考文獻(xiàn)

2.High-throughput confocal imaging of intact live tissue enables quantification of membrane trafficking in Arabidopsis. Plant Physiol. 2010 Nov;154(3):1096-104. doi: 10.1104/pp.110.160325. Epub 2010 Sep 14.

3.Expanding the Biological Application of Fluorescent Benzothiadiazole Derivatives: A Phenotypic Screening Strategy for Anthelmintic Drug Discovery Using Caenorhabditis elegans. SLAS Discov. 2019 Aug;24(7):755-765. doi: 10.1177/2472555219851130. Epub 2019 Jun 10.

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