MTT比色法細(xì)胞活力檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中有哪些注意事項(xiàng)？
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MTT比色法細(xì)胞活力檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中有哪些注意事項(xiàng)？
全部評(píng)論(1條)
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- a91549865 2011-04-01 00:00:00
- 博凌科為解答：（1）選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞接種濃度。一般情況下，96孔培養(yǎng)板的內(nèi)貼壁細(xì)胞長(zhǎng)滿時(shí)約有l(wèi)o6個(gè)細(xì)胞。但由于不同細(xì)胞貼壁后面積差異很大，因此，在進(jìn)行MTT比色法細(xì)胞活力檢測(cè)實(shí)驗(yàn)前，掌握每一種細(xì)胞的貼壁率、倍增時(shí)間以及不同接種細(xì)胞數(shù)條件下的生長(zhǎng)曲線，確定實(shí)驗(yàn)中每孔的接種細(xì)胞數(shù)和培養(yǎng)時(shí)間，以保證培養(yǎng)終止致細(xì)胞過滿。這樣，才能保證形成酌量的MTT結(jié)晶，與細(xì)胞數(shù)量呈線性關(guān)系。 （2）避免血清干擾。用含15%胎牛血清培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，高濃度的血清物質(zhì)會(huì)影響實(shí)驗(yàn)孔的光吸收值。由于實(shí)驗(yàn)本底增加，會(huì)使實(shí)驗(yàn)敏感。因此，一般選擇濃度小于10%胎牛血清的培養(yǎng)液進(jìn)行。在呈色后，盡量吸凈培養(yǎng)孔內(nèi)殘余培養(yǎng)液。3）設(shè)空白對(duì)照。與實(shí)驗(yàn)孔平行設(shè)不加細(xì)胞只加培養(yǎng)液的空白孔。其它實(shí)驗(yàn)步驟保持一致。Z后比色時(shí)，以空白孔調(diào)零。
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