此次實驗主要是為膝關節(jié)滑液組織制備單細胞，讓我們一起來看看凈信單細胞制備儀是如何制備膝關節(jié)滑液組織單細胞懸液，對其樣品前處理效果和懸液效果如何？

　　實驗地點：上海**大學醫(yī)學院東區(qū)單細胞中心

　　實驗儀器：單細胞懸液制備儀（溫控型）JX-CKSM-6WK

　　樣品前處理制備實驗步驟：

　　1、打開儀器電源開關，將儀器界面中的加熱點開預熱一段時間持恒溫。

　　2、將組織稍微剪切成小塊，放入凈信2ml研磨管中。

　　3、加入凈信消化酶旋上蓋子，上下微微晃動將其組織和消化酶均勻混合。

　　4、將混合好的研磨管放入加熱模塊中，再將研磨管放入熱板中，蓋上蓋子。

　　5、啟動設備，待設備停止運行后打開儀器蓋子，取出樣品管

　　6、將樣品管中的液體和剩下的組織一起倒入過濾管中，再加入終止液后得到渾濁的液體，即單細胞懸液。

　　樣品處理前后效果圖：

　　顯微鏡下的細胞呈現：

　　實驗樣品組織制備注意事項：

　　1、消化酶和終止液均需要在冷凍環(huán)境下保存

　　2、消化酶解凍時需在常溫條件下解凍，不可以放入水浴或者其他加熱儀器中解凍，溫度升高對酶的活性會有很大的影響。

實驗目的：制備小鼠大腦的單細胞懸液

實驗儀器：單細胞懸液制備儀，研磨套裝管，濾管，移液槍，培養(yǎng)皿，鑷子，手術刀

實驗試劑：PBS液，凈信消化酶，終止液

操作步驟：

1、開機預熱，打開加熱模塊1，加熱模塊2

2、取活體組織后，放入PBS液中去紅，然后取20-50mg（約小米粒大?。?，再分成若干等分

3、把消化酶用移液器加入研磨套裝管中，將加滿消化酶的離心管放入預熱模塊中預熱幾分鐘

4、將處理好的組織用鑷子轉移到加滿消化酶的離心管中

5、將裝滿消化酶和組織的離心管放置到加熱板中，選擇25分鐘程序，開始運行

6、程序結束取出離心管，將消化好的組織液轉移到過濾管中，即得到一管單細胞懸液

儀器介紹：

上海凈信單細胞制備儀JX-CKSM-6WK（6通道加熱型）是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代細胞懸液制備設備，應用于流式細胞術/單細胞測序/原代細胞培養(yǎng)等實驗，具有起始組織量小，時間短，細胞得率高，細胞活性高的特點。采用國際DIN方法設計，低噪音，使用方便，性能穩(wěn)定。

應用領域：腫瘤研究 心血管研究 干細胞研究 免疫研究 神經科學研究

產品應用：

單細胞測序（Single-Cell RNASeq)

多色流式分析（Multicolor Flow Cytometry)

質譜流式細胞計數（Mass Cytometry)

原代細胞分離培養(yǎng)（Primary Cell Isolation And Culture)

細胞ZLCAR-T

       在幾乎所有的表面/界面張力測量方法中，懸滴法是最適合用于測量動態(tài)表面/界面張力的方法之一，也是能夠測量的時間范圍最廣的方法。其支持的最短表面/界面壽命約從0.03-0.1s開始，最長時間則不受限制。

       在所有的已商業(yè)化方法中，目前只有ZD氣泡壓力法可以測量表面/界面形成時間點更早的值，約從0.01s開始，但其能夠測量的最長時間只有100s左右。而且測量一條表面張力-時間曲線所需要的時間比懸滴法長的多，在測量精度上也比不上懸滴法。另外這一方法也不適合用于動態(tài)界面張力的測量。

實驗目的：制備小鼠肝、腎、脾的單細胞懸液

實驗儀器：單細胞懸液制備儀，研磨套裝管，濾管，移液槍，培養(yǎng)皿，鑷子，手術刀

實驗試劑：PBS液，凈信消化酶，終止液

操作步驟：

1、開機預熱，打開加熱模塊1，加熱模塊2

2、取活體組織后，放入PBS液中去紅，然后取樣品

3、把消化酶用移液器加入研磨套裝管中，將加滿消化酶的離心管放入預熱模塊中預熱若干分鐘

4、將處理好的組織用鑷子轉移到加滿消化酶的離心管中

5、將裝滿消化酶和組織的離心管放置到加熱板中，選擇25分鐘程序，開始運行

6、程序結束取出離心管，將消化好的組織液轉移到過濾管中，即得到一管單細胞懸液

肝臟組織

脾組織

腎臟組織

儀器介紹：單細胞制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代細胞懸液制備設備，應用于流式細胞術/單細胞測序/原代細胞培養(yǎng)等實驗，具有起始組織量小，時間短，細胞得率高，細胞活性高的特點。采用國際DIN方法設計，低噪音，使用方便，性能穩(wěn)定，帶加熱功能，對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)。

優(yōu)勢：

1、組織高利用率、單細胞化過程高效、單細胞高產出

2、針對臨床穿刺樣本，使組織的利用率達到100%，細胞產量可達10萬個以上v

3、針對原細胞培養(yǎng)樣本，在15min內完成組織到單細胞過程，降低細胞逆境時間，提高細胞存活率

4、針對組織單細胞測序，快速完成單細胞化處理，獲得高產且活率在85%以上的單細胞，以小鼠組織為例：

5、針對不同的樣本選擇不同的程序（6組預設程序），處理樣品量4*2ml/6*2ml/8*2ml