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問答社區(qū)

液相色譜柱4.6x250mm的30個(gè)柱體積是多少

夢(mèng)幻丶紫蝶 2017-05-19 22:05:57 744  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 門中老衲C 2017-05-20 17:18:53
    計(jì)算一下,π(2.3)*2*250,大約是4.2ml左右,不過里面會(huì)有大約2.0ml左右的死體積。這個(gè)數(shù)值因?yàn)椴煌瑥S家的色譜柱而不同。如果計(jì)算可以按照4.2*30計(jì)算,大約126ml。 不過一般如果是沖柱子的話,沒必要這么久的時(shí)間。十倍柱體積已經(jīng)足夠了,1.0ml/min流速?zèng)_洗40min,沒問題。

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    評(píng)論

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柱體積為LC柱內(nèi)被洗脫劑占據(jù)的體積(即粒子之間的空間和粒子孔內(nèi)空間)。

柱體積可根據(jù)以下公式計(jì)算:

Vm=πr2

其中:

Vm = 柱體積(單位:mL)

 r = 柱半徑(單位:cm)
L = 柱長度(單位:cm)

ε = 床層空隙度值

床層空隙度值ε取決于粒子參數(shù)(如孔徑、表面積等)和供應(yīng)商。

對(duì)于ACE 100 ?多孔柱,ε值為~0.63;

對(duì)于ACE 300 ?多孔柱,ε值為~0.75;

而對(duì)于ACE 90 ?實(shí)芯柱,ε值為~0.55.
在討論柱平衡時(shí),更準(zhǔn)確的是引用達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)所需的柱體積,因?yàn)樗c流速和柱尺寸(規(guī)格)無關(guān)。

例如,表1a示出了一系列ACE 100 ?多孔柱的柱體積值的計(jì)算。  


柱長度 (mm)  

ID號(hào) (mm  

20               30               50               75             100             150             250  

1.0  

0.010          0.015          0.025          0.037          0.049          0.074          0.124  

2.1  

0.044          0.065          0.109          0.164          0.218          0.327          0.546  

3.0  

0.089          0.134          0.223          0.334          0.445          0.668          1.113  

4.6  

0.209          0.314          0.523          0.785          1.047          1.570          2.617
 

 

表 1a:ACE 100 ?多孔柱的體積計(jì)算值(單位:mL)


表2a顯示了各種流速條件下,4個(gè)不同尺寸的ACE 100 ?多孔柱達(dá)到20和60倍柱體積平衡所需的時(shí)間。


柱尺寸和粒徑  

柱體積  

mL  

流速  

mL/min  

20倍柱體積平衡時(shí)間  

(分鐘)  

新色譜柱60倍柱體積平衡時(shí)間(分鐘)  

50 x 2.1 mm, 1.7 μm  

0.109  

0.21  

10.4  

31.2  

50 x 2.1 mm, 1.7 μm  

0.109  

0.50  

4.4  

13.1  

100 x 3.0 mm, 3 μm  

0.445  

1.00  

8.9  

26.7  

150 x 4.6 mm, 5 μm  

1.570  

1.00  

31.4  

94.2  

150 x 4.6 mm, 5 μm  

1.570  

2.00  

15.7  

47.1  

250 x 4.6 mm, 5 μm  

2.617  

1.00  

52.3  

157.0  

250 x 4.6 mm, 5 μm  

2.617  

2.00  

26.2  

78.5  

表 2a:ACE 100 ?多孔柱平衡計(jì)算


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液相色譜柱的柱長及內(nèi)徑要怎么選擇?

        液相色譜柱是由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管的材質(zhì)有很多,比如聚合物、玻璃、不銹鋼等。但是建議柱管用不銹鋼材質(zhì),因?yàn)椴讳P鋼這種金屬耐高壓、耐腐蝕且硬度高,相比于玻璃等材質(zhì)不易摔壞。不過當(dāng)壓力不高于70Kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管。對(duì)于液相色譜柱柱管內(nèi)壁要求有很高的光潔度,不銹鋼柱內(nèi)壁會(huì)經(jīng)過多次拋光,這是為提高柱效,減小管壁效應(yīng)。恒譜生0.1μm高光潔度色譜柱柱管能夠快速分析的同時(shí)保持超高的柱效;使用壽命長,不僅能夠減少頻繁更換色譜柱帶來的重新進(jìn)行方法驗(yàn)證、條件摸索等工作,還大大的降低了使用成本;具備優(yōu)良的選擇性和分離能力。

 

        除了拋光,也有在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料來提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光是相同的。色譜柱兩端的柱頭內(nèi)裝有篩板,通常是不銹鋼和peek材質(zhì)制作的,根據(jù)需求選擇與色譜柱匹配的柱篩板,孔徑取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。

 

 

        柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為了避免管壁效應(yīng)。

  液相色譜柱的柱長及內(nèi)徑的選擇原則是什么?長度的選擇:柱越長,總柱效越高(n值越大),柱越長,分析時(shí)間也越長。250—300mm是普遍的柱長,實(shí)驗(yàn)室一半以上的工作都是采用此規(guī)格柱子,一般用來分離l0到50個(gè)組份的中等至復(fù)雜混合物;500—600mm,要求較高分辨率的應(yīng)用,—般用來分離大于50個(gè)組份或包含有難分離物質(zhì)的復(fù)雜樣品程序升溫分析。

  內(nèi)徑:柱效率與柱半徑平方成反比,內(nèi)徑越小柱效越高,但內(nèi)徑越大,柱容量也增加,允許進(jìn)樣量就越多。當(dāng)進(jìn)樣量超過柱容量時(shí),則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立真正的平衡,將會(huì)導(dǎo)致色譜峰畸變,柱分辨率降低,重現(xiàn)性不好。因此對(duì)于復(fù)雜樣品需要準(zhǔn)確分離,必須使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就必須使用內(nèi)徑大的柱子,目前實(shí)驗(yàn)室使用常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。

        分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱;對(duì)于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,以改善峰形,延長色譜柱使用壽命等。恒譜生液相色譜柱內(nèi)徑有2.1、3.0、4.6、10mm可供選擇,不銹鋼材質(zhì)不易因?yàn)榭呐鰮p壞柱管。

 

         以上就是一些關(guān)于液相色譜柱柱長及內(nèi)徑的選擇原則,供大家參考。 深圳市恒譜生科學(xué)儀器有限公司是致力于研發(fā)制造高質(zhì)量色譜耗材的高科技生產(chǎn)廠家,我們?cè)赨HPLC超高壓在線過濾器、色譜保護(hù)柱、液相色譜柱、色譜填料、鬼峰捕集柱、無氣泡高凈化能力的溶劑濾頭、0.1μ高光內(nèi)表粗糙度柱管等領(lǐng)域具有多年的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)和較強(qiáng)大的制造能力。

        恒譜生科學(xué)儀器的戰(zhàn)略合作伙伴客戶遍布化工、制藥、生物、YL、食品、材料、環(huán)保、農(nóng)業(yè)、檢驗(yàn)、科學(xué)研究等行業(yè)。我們的產(chǎn)品長期出口到歐洲、美國、日本、俄羅斯、加拿大、澳大利亞、東南亞等對(duì)本行業(yè)產(chǎn)品有著高質(zhì)量要求的制藥、化工科學(xué)發(fā)達(dá)經(jīng)濟(jì)體。我們期待與客戶們建立更加緊密的戰(zhàn)略合作關(guān)系,攜手共創(chuàng)美好未來!


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