參與評(píng)論

評(píng)論

登錄后參與評(píng)論

全部評(píng)論(3條)

• 

  楊玉瑩1990 2009-12-28 00:00:00

  我覺得不是純凈的

  贊(1)

  回復(fù)(0)

  評(píng)論

  評(píng)論

  登錄后參與評(píng)論

• 

  zg12345678930 2009-12-31 00:00:00

  分離方法有差速離心法和密度梯度離心法。密度梯度離心法的純凈與否與分辨率有很大關(guān)系吧，高分辨率分離出來的條帶還是比較一致的。想想當(dāng)年CsCl梯度都能把含有重金屬元素大分子和普同大分子分離，足夠高分辨率

  贊(5)

  回復(fù)(0)

  評(píng)論

  評(píng)論

  登錄后參與評(píng)論

• 

  wanghedong44 2016-12-02 03:47:45

  用鉆空子的思想來說的話，，， 肯定不純，，，細(xì)胞破碎時(shí)，，細(xì)胞中的某些組分很可能變成和葉綠體一樣的大小， 平衡密度梯度離心法。用超離心機(jī)對(duì)小分子物質(zhì)溶液，長(zhǎng)時(shí)間加一個(gè)離心力場(chǎng)達(dá)到沉降平衡，在沉降池內(nèi)從液面到底部出現(xiàn)一定的密度梯度。若在該溶液里加入少量大分子溶液，則溶液內(nèi)比溶劑密度大的部分就產(chǎn)生大分子沉降，比溶劑密度小的部分就會(huì)上浮，Z后在重力和浮力平衡的位置，集聚形成大分子帶狀物 原理嘛，通俗來就說就是按重量來分的. 正常人思維，以上因素是不考慮的，，，，因?yàn)?，?xì)胞中的某些組分很可能變成和葉綠體一樣的大小，的概率只有天才知道，，， 只要知道原理就好理解，， 再有就是吸取時(shí)，可能有誤差，， 過程如下 1、將收集的組織或臟器或其他，用玻璃勻漿器充分研磨后制成懸液，經(jīng)反復(fù)凍融3 次后，置- 20 ℃冰箱中，備用。 2、先以5000g離心15分鐘后，獲取上清夜，然后再20000g高速離心30分鐘后取上清夜。 3、接著10萬(wàn)g超速離心2h，將沉淀用少量STE溶解。 4、先在超速離心管中加入5-8mL的第3步所獲取的含病毒樣品的溶解液，然后在離心管中依次加入30 % ， 45 % ， 60 %的蔗糖，加的時(shí)候是用長(zhǎng)針頭從底部往上加的。11萬(wàn)g離心2.5h，發(fā)現(xiàn)在30 %與45 % 以及45 % 與60 %之間都有一條明亮的帶，用長(zhǎng)針頭將兩條不同部位的帶都吸取出來，分別收集到不同的瓶?jī)?nèi)。 5、去蔗糖；用STE緩沖液適量稀釋純化的病毒，然后11萬(wàn)g離心3h，用少量STE（根據(jù)沉淀的量決定加入多少）緩沖液把沉淀懸起，即Z后獲得了純化的病毒。-20度凍純備用，用時(shí)可用分光光度計(jì)測(cè)定其病毒含量。

  贊(20)

  回復(fù)(0)

  評(píng)論

  評(píng)論

  登錄后參與評(píng)論