mRNA-LNP無疑是近兩年最火熱的研究熱點，隨著新冠疫情的不斷肆虐，幾款采用了mRNA-LNP的新冠疫苗陸續(xù)上市，使人們對這一具有廣泛應(yīng)用前景的技術(shù)愈發(fā)重視。那么對于一個制備良好的mRNA-LNP，其內(nèi)部分子組成結(jié)構(gòu)到底是怎樣的呢？今天小編就通過相關(guān)研究帶大家一起探索其組成結(jié)構(gòu)。  首先，目前普遍采用的mRNA-LNPCF多是通過由陽離子磷脂、DSPC（二硬脂酰磷脂酰膽堿）、膽固醇、DMPE-PEG2000（磷脂酰yi醇胺-聚yi 二醇2000）構(gòu)建的LNP來實現(xiàn)對mRNA分子的包載。幾種磷脂分子發(fā)揮各自的功效將mRNA分子包裹在內(nèi)部形成一個球形的脂質(zhì)納米粒，而且通過CF的調(diào)整，也可以實現(xiàn)粒徑大小不同的LNP制備，詳見圖1電鏡圖。 

圖1. LNP的冷凍透射電鏡圖，a、b、c分別為粒徑大小在48nm、64nm、100nm左右的LNP

隨后采用小角中子散射技術(shù)來進(jìn)一步研究LNP上的磷脂分子分布情況，利用氘化的DSPC和膽固醇進(jìn)行LNP的制備，并分別在不同比例下的D2O/H2O緩沖液中檢測其散射信號。結(jié)果如圖2A，散射信號只在緩沖液中D2O較低時檢測到，即在q ～ 1 nm?1處有一明顯的峰。而DSPC的散射長度密度（SLD）和其他磷脂材料有ZD的區(qū)別，這些散射曲線都與之前報道過的核-殼結(jié)構(gòu)體系的小角散射的結(jié)果相似，而且圖中的數(shù)據(jù)擬合與一核兩層殼的結(jié)構(gòu)最為吻合。圖2B中的散射長度密度數(shù)據(jù)則可代表LNP外殼到ZX的距離，圖2C則是根據(jù)散射結(jié)果分析后得到的LNP結(jié)構(gòu)的模型示意圖。在此模型中，我們認(rèn)為LNP的核由陽離子磷脂、膽固醇、mRNA和水組成，在此核的外部是一層2.4 nm厚的由DSPC，少部分的陽離子磷脂、膽固醇以及PEG磷脂中的DMPE端組成的單層殼。再向外則是一層約4 nm厚的PEG磷脂殼。

圖2. (A)不同D2O含量下的LNP小角中子散射結(jié)果，從上至下分別為18%、27%、50%、68%、100%的D2O。(B) SLD曲線作為LNPZX距離的函數(shù)，與A中數(shù)據(jù)的擬合相對應(yīng)。(C) 根據(jù)SLD數(shù)據(jù)描繪的LNP中脂質(zhì)分布示意圖

同時，根據(jù)LNP主要成分的SLD數(shù)據(jù)，詳見表1，可以詳細(xì)驗證LNP系統(tǒng)的組成。溶劑的SLD由H2O/D2O的比例給出，PEG層的SLD隨著它延伸到溶劑中而變化。在LNP中，內(nèi)核的SLD是恒定的，但隨著D2O含量的變化而變化。mRNA的SLD也隨著D2O體積分?jǐn)?shù)的增加而增加，因為它含有可以交換為氘的不穩(wěn)定氫。利用擬合的內(nèi)核SLD值作為D2O含量的函數(shù)，以及LNP組分已知的SLD值(表1)與建立的脂質(zhì):mRNA摩爾比，根據(jù)以下公式可以計算LNP中的水含量。其中V是各成分的體積分?jǐn)?shù)。 

VDLin-MC3-DMA · SLDDLin-MC3-DMA + VChol · SLDChol+ VH2O · SLDH2O +VRNA · SLDRNA =SLDcore

  脂質(zhì)單層的SLD不依賴于溶劑而保持恒定，這證實了如預(yù)期的那樣，該層中沒有溶劑存在。由陽離子磷脂（DLin-MC3-DMA）、DSPC、膽固醇、PEG磷脂中的DMPE段包裹在核心外。  目前這一mRNA-LNP的結(jié)構(gòu)也是目前比較公認(rèn)的一種結(jié)構(gòu)，但是通過相關(guān)研究可以進(jìn)一步為我們提供強有力的科研依據(jù)。幾種脂質(zhì)成分不是均勻的隨意分布在LNP上的，其結(jié)構(gòu)信息也會給研究者們提供更多的靈感，以幫助他們設(shè)計研發(fā)更加合理有效的mRNA-LNP出來。 

參考文獻(xiàn)：

1. Zackrisson M, et al. (2005) Small-angle neutron scattering on a core-shell colloidal system: A contrast-variation study. Langmuir 21:10835–10845

2. Belliveau NM, et al. (2012) Microfluidic synthesis of highly potent limit-size lipid nanoparticles for in vivo delivery of siRNA. Mol Ther Nucleic Acids 1:e37.

3. Marianna YA, et al.（2018）Successful reprogramming of cellular protein production through mRNA delivered by functionalized lipid nanoparticles. PNAS 115: E3351–E3360

（來源：寧夏綠水試驗儀器有限公司）

疲勞試驗機是一種廣泛應(yīng)用于材料、零件及結(jié)構(gòu)件的力學(xué)性能測試設(shè)備，主要用于測試材料或部件在反復(fù)應(yīng)力作用下的疲勞壽命。對于制造業(yè)、科研院所等領(lǐng)域，疲勞試驗機是一種關(guān)鍵的測試設(shè)備。疲勞試驗機的價格是多少呢？影響其價格的因素有哪些呢？本文將為您分析疲勞試驗機價格的構(gòu)成及相關(guān)影響因素，幫助您在選購時作出更明智的決策。

一、疲勞試驗機的價格范圍

疲勞試驗機的價格范圍非常廣泛，從幾萬到幾十萬元不等。這主要取決于其功能配置、測試要求、品牌以及技術(shù)參數(shù)等多方面的因素?；A(chǔ)型號的疲勞試驗機通常適用于普通材料的疲勞測試，而高端型號則能夠進(jìn)行更加復(fù)雜的實驗。

二、影響疲勞試驗機價格的主要因素

1. 試驗機的功能和類型

疲勞試驗機根據(jù)不同的應(yīng)用場景有不同的分類，比如高頻疲勞試驗機、低頻疲勞試驗機、彎曲疲勞試驗機等。每種類型的試驗機適用于不同的測試需求，功能越多、越復(fù)雜，價格自然越高。

2. 技術(shù)參數(shù)的要求

疲勞試驗機的技術(shù)參數(shù)是影響價格的重要因素之一。一般來說，試驗力越大、測試頻率越高、精度越高的設(shè)備價格也相對較貴。這些參數(shù)通常與企業(yè)的具體測試需求息息相關(guān)，因此在選購時應(yīng)根據(jù)自身需求合理選擇，不必要為了過高的參數(shù)而支付額外的費用。

3. 品牌與制造商

品牌和制造商也是決定疲勞試驗機價格的重要因素。一些知名品牌如MTS、Instron、Shimadzu等，因其技術(shù)積累和良好的售后服務(wù)體系，其設(shè)備價格相對較高。而一些國產(chǎn)品牌盡管價格較低，但在特定應(yīng)用領(lǐng)域的性能和可靠性并不遜色。

4. 售后服務(wù)與技術(shù)支持

疲勞試驗機作為一類專業(yè)性較強的設(shè)備，其售后服務(wù)和技術(shù)支持對于用戶的長期使用有著重要影響。高端品牌通常提供完善的售后服務(wù)體系，包括設(shè)備維護(hù)、軟件升級以及操作培訓(xùn)等，這些服務(wù)也會增加設(shè)備的整體成本。

三、如何選擇合適的疲勞試驗機

在了解了影響疲勞試驗機價格的因素之后，企業(yè)在選購時可以從以下幾點入手：

1. 明確測試需求：根據(jù)測試材料的類型、試驗力的大小、疲勞壽命的要求等因素，選擇符合實際需求的疲勞試驗機，避免因功能過剩而導(dǎo)致不必要的支出。
2. 對比多家供應(yīng)商：不同品牌和供應(yīng)商的報價可能存在差異，用戶可以通過對比不同產(chǎn)品的性能、服務(wù)等因素來選擇性價比較高的設(shè)備。
3. 考慮長期使用成本：除了設(shè)備的購置價格，用戶還應(yīng)考慮其后續(xù)使用中的維護(hù)成本、耗材費用等長期成本，選擇一個總擁有成本較低的產(chǎn)品。