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問(wèn)答社區(qū)

DNA合成阻斷法誘導(dǎo)細(xì)胞同步化為什么要阻斷兩次

xuanjiu890227 2017-02-23 21:03:14 1259  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 厄爾多思2 2017-02-24 00:00:00
    DNA合成陰斷法:選用DNA合成的YZ劑,可逆地YZDNA合成,而不影響其他時(shí)期細(xì)胞的運(yùn)轉(zhuǎn),Z終可將細(xì)胞群阻斷在S期或G/S交界處.5-氟脫氧尿嘧啶、羥基脲、阿糖胞苷、氨甲蝶呤、高濃度ADR、GDR和TDR,均可YZDNA合成使細(xì)胞同步化.其中高濃度TDR對(duì)S期細(xì)胞的毒性較小,因此常用TDR雙阻斷法誘導(dǎo)細(xì)胞同步化: 在細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的培養(yǎng)基中加入過(guò)量TDR,(Hela,2mol/L;CHO,7.5mol/L).S期細(xì)胞被YZ,其它細(xì)胞繼續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn),Z后停在G1/S交界處. 移去TDR.洗滌細(xì)胞并加入新鮮培養(yǎng)液、細(xì)胞又開(kāi)始分裂.當(dāng)釋放時(shí)間大于TS時(shí),所有細(xì)胞均脫離S期,再次加入過(guò)量TDR,細(xì)胞繼續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)至G1/S交界處,被過(guò)量TDRYZ而停止."

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已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑,但一般不分裂增殖。鼠瘤細(xì)胞中盡管沒(méi)有S途徑,但能不斷分裂增殖,將這兩種細(xì)胞在試管中混合,加聚乙二醇促融,獲得雜種細(xì)胞。請(qǐng)回答: (1)試管中除融... 已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑,但一般不分裂增殖。鼠瘤細(xì)胞中盡管沒(méi)有S途徑,但能不斷分裂增殖,將這兩種細(xì)胞在試管中混合,加聚乙二醇促融,獲得雜種細(xì)胞。請(qǐng)回答: (1)試管中除融合的雜種細(xì)胞外,還有_________種融合細(xì)胞。 (2)設(shè)計(jì)一方法(不考慮機(jī)械方法),從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞,并說(shuō)原理。 方法:____________________________________。 原理:____________________________________。 (3)將分離出的雜種細(xì)胞在不同條件下繼續(xù)培養(yǎng),獲得A、B、C三細(xì)胞株。各細(xì)胞株內(nèi)含有的人染色體如有表(“+”有,“—”無(wú))測(cè)定各細(xì)胞株中人體所具有的五種酶的活性。 結(jié)果是:①B株有a酶活性;②A(yíng)、B、C株均有b酶活性:③A、B株有c酶活性;④C株有d酶活性;⑤A、B、C株均無(wú)e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因影響,則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的_________、_________、__________、_________和__________號(hào)染色體上。 展開(kāi)
2018-11-16 23:37:51 365 0

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