關(guān)鍵詞：血清 胎牛血清 牛血清 本生生物

　　1. 保存血清的方法?

　　建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

　　2. 如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

　　建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

　　3. 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?

　　血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙枞倪^濾膜。

　　4. 為什么要熱滅活血清?

　　加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞，昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時，推薦使用熱滅活血清。

　　5. 有必要做熱滅活嗎?

　　實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或完全沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。

　　6. 為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)沉淀?

　　胎牛血清沒有預(yù)老化，儲存在2–8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在–20℃儲存胎牛血清，避免反復(fù)凍融。

　　7. 如何避免沉淀物的產(chǎn)生?

　　解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。

　　注：僅供參考，轉(zhuǎn)載請注明!

　　牛血清實(shí)驗(yàn)中常見的問題解析!

　　胎牛血清通常在細(xì)胞培養(yǎng)中作為基礎(chǔ)生長培養(yǎng)基的添加劑，在細(xì)胞培養(yǎng)中，血清供應(yīng)了豐富的高分子蛋白，低分子量營養(yǎng)物，疏水載體蛋白和其他體外細(xì)胞生長必要的成分如激素和粘附因子。同時，胎牛血清可以增加培養(yǎng)基的緩沖能力或中和有毒成分，起到保護(hù)細(xì)胞的作用。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中是否選擇添加血清，主要根據(jù)基礎(chǔ)培養(yǎng)基化學(xué)成分，培養(yǎng)細(xì)胞的類型和培養(yǎng)體系而定。今天天津本生小編給大家分享的是牛血清實(shí)驗(yàn)中常見的問題解析!搬起小板凳快來圍觀吧!

　　血清實(shí)驗(yàn)中常見的問題解析：

　　一、 如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

　　將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

　　長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復(fù)凍融。

　　建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

　　二、血清中包含絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理?

　　沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃氯麨V膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以，使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失。

　　三、 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎?

　　一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。

　　四、 為什么要熱滅活血清?

　　加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué) 研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞時，推薦使用熱滅活血清。

　　五、 有必要做熱滅活嗎?

　　實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或完全沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。

　　而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)"，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物 的分裂擴(kuò)增。

　　非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間，更確保血清的質(zhì)量!

　　六、細(xì)胞培養(yǎng) 中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?

　　一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動。如果細(xì)胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。

　　七、小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?

　　來源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。

　　組份與比例不同：兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同，用途與用法不同：某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長，而有些細(xì)胞只需小牛血清即可，使用濃度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的濃度在20%。

　　血清保存和使用須注意：血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超過一個月。

　　解凍血清時 ，應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱，并經(jīng)常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫，絕對不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中，如放在37℃解凍，顏色加深，粘稠度也會增加，血清在解凍和熱滅活后，應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存，避免反復(fù)凍融。

　　牛血清實(shí)驗(yàn)中常見的問題解析!我司由具有行業(yè)背景和豐富市場經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成，于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品，為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿足研發(fā)類客戶對產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?；a(chǎn)各個階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。

在生命科學(xué)領(lǐng)域中，包涵體復(fù)體的研究占據(jù)了重要的地位。但隨著研究的深入，一些問題逐漸浮現(xiàn)。本文將對包涵體復(fù)體研究中常見的挑戰(zhàn)進(jìn)行解析，以及為研究者提供一些解決思路。

①包涵體復(fù)性原則：

低濃度，平緩梯度，低溫。

②怎樣洗滌包涵體？

通常的洗滌方法一般是洗不干凈的，可以先把包涵體用6M鹽酸胍溶解充分，過濾除去未溶解的物質(zhì)，注意留樣跑電泳，然后用水稀釋到4M,離心把沉淀和上清分別跑電泳，如此類推可以一直稀釋到合適的濃度，可以找到一個合適去除雜質(zhì)的辦法，其實(shí)這就是梯度沉淀的方法，比通常的直接洗脫效果好。

③對于尿素和鹽酸胍該怎么選擇

尿素和鹽酸胍屬中強(qiáng)度變性劑，易經(jīng)透析和超濾除去。它們對包涵體氫鍵有較強(qiáng)的可逆性變性作用，所需濃度尿素8-10M，鹽酸胍6-8M。尿素溶解包涵體較鹽酸胍慢而弱，溶解度為70-90%，尿素在作用時間較長或溫度較高時會裂解形成氰酸鹽，對重組蛋白質(zhì)的氨基進(jìn)行共價修飾，但用尿素溶解具有不電離，呈中性，成本低，蛋白質(zhì)復(fù)性后除去不會造成大量蛋白質(zhì)沉淀以及溶解的包涵體可選用多種色譜法純化等優(yōu)點(diǎn)，故目前已被廣泛采用。

鹽酸胍溶解能力達(dá)95%以上，且溶解作用快而不造成重組蛋白質(zhì)的共價修飾。但它也有成本高、在酸性條件下易產(chǎn)生沉淀、復(fù)性后除去可能造成大量蛋白質(zhì)沉淀和對蛋白質(zhì)離子交換色譜有干擾等缺點(diǎn)。

④8M尿素溶解的包涵體溶液應(yīng)如何保存?

在4度放置半個月，都沒什么問題 。在室溫放置超過48小時，可能會對目的蛋白有影響，因?yàn)槟蛩卦趬A性條件下可使一些氨基酸?；栽缧┨幚鞡I溶液比較好。

⑤復(fù)性時的蛋白濃度

一般使用濃度為0.1-1.0mg/ml，太高的濃度容易形成聚體沉淀，太低的濃度不經(jīng)濟(jì)，而且很多蛋白在低濃度時不穩(wěn)定，很容易變性。

⑥蛋白復(fù)性后濃度低

蛋白可能是在復(fù)性的過程中發(fā)生降解了。

可以將復(fù)性好的蛋白濃縮一下泡膠看看。復(fù)性過程一般都是低濃度蛋白，需要保證分子間有足夠的折疊空間。一些未正確折疊的蛋白就存在于沉淀中，可能沉淀看不出來，復(fù)性后的蛋白高速離心看看。

⑦復(fù)性中蛋白析出是怎么回事？該怎么處理？

出現(xiàn)蛋白析出，肯定是條件變化太劇烈了。

復(fù)性應(yīng)該采取復(fù)性液濃度和PH值逐漸變化的方法，例如根據(jù)包涵體的溶液成分，每隔1個PH或濃度值配置一種溶液，逐步透析到正常。此外透析時必須濃度極低，條件溫和，使蛋白質(zhì)能夠正確折疊。但是復(fù)性的比率應(yīng)該很低。

若加變性劑尿素可加到2M，鹽酸胍可加到1-1.5M；

另外可將甘油濃度增加，范圍可在≤30%，且在復(fù)性樣品中也可加適量甘油。

⑧復(fù)性效果的檢測

根據(jù)具體的蛋白性質(zhì)和需要，可以從生化、免疫、物理性質(zhì)等方面對蛋白質(zhì)的復(fù)性效率進(jìn)行檢測。

凝膠電泳：一般可以用非變性的聚丙烯酰胺凝膠電泳可以檢測變性和天然狀態(tài)的蛋白質(zhì)，或用非還原的聚丙烯酰胺電泳檢測有二硫鍵的蛋白復(fù)性后二硫鍵的配對情況。

光譜學(xué)方法：可以用紫外差光譜、熒光光譜、圓二色性光譜（CD）等，利用兩種狀態(tài)下的光譜學(xué)特征進(jìn)行復(fù)性情況的檢測，但一般只用于復(fù)性研究中的過程檢測。

色譜方法：如IEX、RP-HPLC、CE等，由于兩種狀態(tài)的蛋白色譜行為不同。

生物學(xué)活性及比活測定：一般用細(xì)胞方法或生化方法進(jìn)行測定，較好的反映了復(fù)性蛋白的活性，值得注意的是，不同的測活方法測得的結(jié)果不同，而且常常不能完全反映體內(nèi)活性。

黏度和濁度測定：復(fù)性后的蛋白溶解度增加，變性狀態(tài)時由于疏水殘基暴露，一般水溶性很差，大多形成可見的沉淀析出。

免疫學(xué)方法：如ELISA、WESTERN等，特別是對結(jié)構(gòu)決定簇的抗體檢驗(yàn)，比較真實(shí)的反映了蛋白質(zhì)的折疊狀態(tài)。

⑨變性的融合蛋白可以制備多抗或者單抗嗎？

變性蛋白只是天然蛋白伸直的產(chǎn)物，用來免疫動物具有更強(qiáng)的抗原性。只是天然蛋白中被包在內(nèi)部的抗原決定簇也會暴露出來，如果用該變性抗原制備的抗體來檢測變性抗原是可以的，如果用來檢測天然蛋白，可能會有假陽性。做單抗也可以，同樣道理，篩選出的單抗可能對抗的抗原決定簇處于天然抗原的內(nèi)部，是否能用還要看將來該單抗用來干什么。

⑩純化后的可溶性融合蛋白可以直接用于制備多抗嗎？

免疫動物要求抗原體種盡量小。在這種小體積的情況下，緩沖液里的小分子成分只要沒毒影響就不大，可以不用考慮。

更多蛋白復(fù)體詳情可以上義翹神州網(wǎng)咨詢！

我們很高興回答您有關(guān)太赫茲線柵偏振片功能和使用的任何問題。首先我們在下面列出客戶可能遇到的一些典型問題：

1.      太赫茲線柵偏振片的主要用途是什么？

       獨(dú)立式（Free-standing）太赫茲線柵偏振片用作毫米和亞毫米波長輻射（例如在遠(yuǎn)紅外波長或太赫茲頻率范圍內(nèi)）的低損耗偏振元件。典型的應(yīng)用包括用作中紅外至毫米波長太赫茲輻射的線性偏振片，偏振干涉儀中的分束器或分光器，長波長輻射的耦合器以及可變衰減器或可變反射器。請注意，由于它們屬于偏振元件，因此用作衰減器，反射器或耦合器時會在系統(tǒng)中優(yōu)先引入偏振。

2.      什么是獨(dú)立式（free-standing）太赫茲線柵偏振片？

        獨(dú)立式（free-standing）線柵太赫茲偏振片由一排平行的細(xì)導(dǎo)線（直徑通常為5-50微米）組成，并由框架圍繞圓周固定支撐。此類線柵陣列將反射電場偏振平行于導(dǎo)線的入輻射，并透射電場偏振垂直于導(dǎo)線

的輻射。以此方式，線柵在透射和反射中均作為偏振元件。

3.       獨(dú)立式（free-standing）太赫茲偏振片工作原理是什么？

      該問題已在文獻(xiàn)中得到了徹底解決，有關(guān)更詳細(xì)的答案，請參考Hecht（1987）。獨(dú)立式太赫茲線柵偏振片工作的基本原理是基于入射的電磁輻射如何與線柵相互作用，這取決于相對于柵取向的電場偏振平

面。對于電場偏振平行于線柵的導(dǎo)線元件的情況，入射輻射將導(dǎo)致導(dǎo)線中的自由電子沿其長度振蕩。這種相互作用導(dǎo)致通過焦耳熱的再輻射和能量的一些消散，正向的再輻射波抵消了透射波，反方向的再輻射

表現(xiàn)為反射輻射。以此方式，入射波的平行分量被從透射的輻射中剝離，并且表現(xiàn)為反射波。在導(dǎo)線直徑較小的情況下，鑒于無法使自由電子沿該方向流動，入射輻射的正交偏振分量不會以相同的方式與導(dǎo)線柵格相互作用。因此，在沒有任何反射的情況下，正交偏振分量被柵格完全透射。為了使該過程有效的工作，導(dǎo)線之間的空間必須小于輻射的波長。這樣，線距限制了太赫茲線柵偏振片的較低波長性能，并且太赫茲線柵偏振片的性能存在一定的波長依賴性。

4.       為何鎢絲用作太赫茲線柵偏振片？

在商業(yè)上可獲得的材料中，鎢絲被認(rèn)為可為太赫茲線柵偏振片提供有利的特點(diǎn)，它主要具有的是：

-高抗拉強(qiáng)度，可將導(dǎo)線牢固地固定在整個支撐框架上；

-良好的導(dǎo)電性，這是線柵偏振選擇性的必要先決條件；

-優(yōu)異的耐腐蝕性，可使偏振片在可接受的時間內(nèi)繼續(xù)工作。

工程師在使用測試儀器的時候首先應(yīng)該要了解測量儀器的基本原理才能正確的使用儀器，那么示波器的基本工作原理是什么呢？使用中需要注意的事項(xiàng)又有哪些呢？下面由安泰測試為大家介篩一些示波器的基本原理以及使用中的注意事項(xiàng)：

一、示波器--原理簡介

模擬示波器：在本質(zhì)上，模擬示波器工作方式是直接測量信號電壓，并通過從左到右穿過示波器屏幕的電子束在垂直方向描繪電壓。

二、示波器--原理簡介

與模擬示波器不同，數(shù)字示波器通過模數(shù)轉(zhuǎn)換器（ADC）把被測電壓轉(zhuǎn)換為數(shù)字信息。它捕獲的是波形的一系列樣值（采樣定理），并對樣值進(jìn)行存儲，處理。隨后，數(shù)字示波器在顯示屏上重構(gòu)波形。

三、示波器--原理簡介

數(shù)字存儲示波器（DSO)：組成DSO的一些子系統(tǒng)與模擬示波器的一些部分相似。但是，DSO包含更多的數(shù)據(jù)處理子系統(tǒng)，它能夠收集顯示整個波形的數(shù)據(jù)，并以數(shù)字形式表示波形信息。這樣，利用示波器本身或外部計(jì)算機(jī)，方便對信號進(jìn)行分析、存檔、打印和其他的處理。

從捕獲信號到在屏幕上顯示波形，DSO采用串行的處理體系結(jié)構(gòu)。

四、示波器--原理簡介

數(shù)字熒光示波器（DPO)：DPO的diyi階段（輸入）與模擬示波器相似，第二階段與DSO相似（ADC）。但是，在模數(shù)轉(zhuǎn)換后，DPO與原來的示波器相比就有顯著的不同之處。

DPO使用并行體系結(jié)構(gòu)來捕獲、顯示和分析信號。

五、示波器--特別注意：浮地測量

示波器的通道地、機(jī)殼都通過AC輸入地線與大地相連，在測量浮地目標(biāo)（如電源輸出端，相對大地電平不可預(yù)計(jì)）時，可能會形成回路燒毀探頭/示波器。

通過斷開與大地的連接（使用2芯電源線/隔離變壓器），將示波器“浮地”。這種做法不但會導(dǎo)致測量結(jié)果不準(zhǔn)確，會使示波器機(jī)殼帶電，容易造成人身安全問題。

六、示波器--浮地測量解決方法

使用差分探頭，可以通過大部分示波器進(jìn)行浮地測量。但差分 探頭仍有仍有一條電阻路徑接地，存在很小的泄露電流；

“A-B”測量（偽差分測量）：使用傳統(tǒng)示波器和兩個相同型號的無源電壓探頭分別測量兩個測試點(diǎn)，兩個探頭的地線接到大地。CH1-CH2即可得到被測兩點(diǎn)之間的電壓波形；

選用TPS2000B/THS3000系列隔離輸入示波器。提供真正的、完整的通道到通道和通道到電源線隔離能力。在使用隔離輸入示波器進(jìn)行浮地測量時，必須使用專門實(shí)際的無源探頭。

以上內(nèi)容轉(zhuǎn)載于安泰測試網(wǎng)，如果大家在使用示波器過程中有什么問題歡迎咨詢安泰測試。