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問答社區(qū)

如何從糞便當(dāng)中分離純化出大腸桿菌

vfrxwb888 2014-06-15 05:59:40 544  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(4條)

  • wojiushiyuli 2014-06-16 00:00:00
    拉屎出來后用手?jǐn)嚢杈鶆蛉錾鲜[花即可

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    評(píng)論

  • 玖玥0929 2014-06-16 00:00:00
    用乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基分離

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    評(píng)論

  • 85752838號(hào) 2014-06-17 00:00:00
    可以用稀釋涂平板法。因?yàn)榧S便中含量Z多的就是大腸桿菌。你只要稀釋的倍數(shù)合適,長(zhǎng)出的單菌落,可以說,都是大腸桿菌。培養(yǎng)溫度為37,培養(yǎng)基可以用LB培養(yǎng)基。

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    評(píng)論

  • asling1231211 2016-11-28 19:02:43
    操作步驟 1 檢樣稀釋 a. 以無菌操作將檢樣25mL(或g)放于有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶?jī)?nèi)(瓶?jī)?nèi)予置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi),經(jīng)充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣Z好用均質(zhì)器,以8 000-10 000 r/min的速度處理1min,做成1:10的均勻稀釋液。 b. 用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi),振搖試管混勻,做成1:100的稀釋液。 c. 另取1mL滅菌吸管,按上條操作依次做10倍遞增稀釋液,每遞增稀釋一次,換用1支1mL滅菌吸管。 d. 根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì),選擇三個(gè)稀釋度,每個(gè)稀釋度,接種3管。 2 乳糖發(fā)酵試驗(yàn) 將待檢樣品接種于乳糖 膽鹽發(fā)酵管內(nèi),接種量在1mL以上者,用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管,1mL及1mL以下者,用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。每一稀釋度接種3管,置36±1℃ 溫箱內(nèi),培養(yǎng)24±2h,如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣,則可報(bào)告為大腸菌群陰性,如有產(chǎn)氣者,則按下列程序進(jìn)行。 3 分離培養(yǎng) 將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上,置36±1℃ 溫箱內(nèi),培養(yǎng)18-24h,然后取出,觀察菌落形態(tài),并做革蘭氏染色和證實(shí)試驗(yàn)。 4 證實(shí)試驗(yàn) 在上述平板上,挑取可疑大腸菌群菌落1-2個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色,同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管,置 36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24±2h,觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌,即可報(bào)告為大腸菌群陽性。 5 報(bào)告 根據(jù)證實(shí)為大腸菌群陽性的管數(shù),查MPN檢索表,報(bào)告每100mL(g)大腸菌群的MPN值。

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