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- 一龍?zhí)?/a> 2017-10-31 00:00:00
- 關于建設PCR實驗室基本設備與要求 摘要:規(guī)范臨床基擴增檢驗實驗室管理保證臨床基擴增檢驗質量使臨床診斷ZL更科、合理特制定本辦 關鍵詞:PCR 實驗室 臨床基擴增檢驗實驗室管理暫行辦 第章 總 則 第條 規(guī)范臨床基擴增檢驗實驗室管理保證臨床基擴增檢驗質量使臨床診斷ZL更科、合理特制定本辦 第二條 臨床基擴增檢驗技術指臨床診斷ZL目擴增檢測DNA或RNA檢測技術聚合酶鏈反應(PCR)、連接酶鏈反應(LCR)、轉錄依賴放系統(tǒng)(TAS)自主序列復制系統(tǒng)(3SR)鏈替代擴增(SDA)等 第三條 本辦適用于展臨床基擴增檢驗實驗室臨床基擴增檢驗實驗室設立二級醫(yī)院 第四條 臨床基擴增檢驗實驗室必須使用經家藥品監(jiān)督管理局批準臨床檢驗試劑展臨床基擴增檢驗項目 第五條 衛(wèi)部臨床檢驗(簡稱衛(wèi)部臨檢)省、自治區(qū)、直轄市臨床檢驗(簡稱省臨檢)負責所轄行政區(qū)域內臨床基擴增檢驗實驗室質量監(jiān)督管理工作 第二章 實驗室設置驗收 第六條 擬設置臨床基擴增檢驗實驗室YL機構按照《臨床基擴增檢驗實驗室基本設置標準》(見附件)籌建實驗室;籌建完由定代表向衛(wèi)部臨檢提技術驗收申請申請需提交材料: ()《YL機構執(zhí)業(yè)許證》復印件; (二)行性研究報告; 1、 擬設臨床基擴增檢驗實驗室機構所YL衛(wèi)資源狀況、本機構基本情況、臨床基擴增檢驗需求及臨床基擴增實驗室運行預測析; 2、 擬設臨床基擴增檢驗實驗室設置平面圖; 3、 擬設臨床基擴增檢驗實驗室展檢驗項目、實驗設備條件關技術員資料 第七條 衛(wèi)部臨檢省臨檢共同組織相關專業(yè)專家組(簡稱專家組)按照《臨床基擴增檢驗實驗室基本設置標準》提申請臨床基擴增檢驗實驗室進行技術驗收驗收完20內驗收報告寄送至申請機構 第八條 經專家組技術驗收合格YL機構本辦第六條規(guī)定材料及專家組驗收報告送至省級行政部備案符合規(guī)定全部材料送達省級衛(wèi)行政部門15內未收省級衛(wèi)行政部門同意意見展專家組技術驗收合格臨床基擴增檢驗項目 第九條 未經專家組驗收合格并報省級衛(wèi)行政部門備案YL機構擅自展臨床基擴增檢驗項目 第三章 實驗室監(jiān)督管理 第十條 臨床基檢驗實驗室必須按照《臨床基擴增檢驗實驗室工作規(guī)范》(另發(fā))展臨床基擴增檢驗工作 第十條 臨床基擴增檢驗實驗室技術員必須進行崗培訓經培訓合格者由培訓單位發(fā)給合格證書并培訓合格員名單報衛(wèi)部臨檢備案獲培訓合格證書者事臨床基擴增檢驗工作 培訓單位衛(wèi)部臨檢或由省級衛(wèi)行政部門指定并經衛(wèi)部臨檢認定機構培訓使用規(guī)定統(tǒng)教材 第十二條 科研目基擴增檢驗項目向臨床具檢驗報告向病收取任何費用 第十三條 臨床基擴增檢驗實驗室必須按照《臨床基擴增實驗室工作規(guī)范》展室內質量控制并參加衛(wèi)部臨檢組織室內質量評價 第十四條 衛(wèi)部臨檢按照本《臨床基擴增實驗室工作規(guī)范》協(xié)調、組織省臨檢臨床基擴增檢驗實驗室檢驗質量進行監(jiān)測監(jiān)測結報省級衛(wèi)行政部門同抄送監(jiān)測臨床基擴增檢驗實驗室所YL機構 第十五條 衛(wèi)部臨檢或省級臨檢受省級衛(wèi)行政部門委托臨床基擴增檢驗實驗室進行現(xiàn)場檢查現(xiàn)場檢查工作員履行職責應示證件進行現(xiàn)場檢查檢查員權調閱關資料檢查機構拒絕或隱瞞 第十六條 衛(wèi)部臨檢室間質量評價合格臨床基擴增檢驗實驗室提警告連續(xù)二或三二發(fā)現(xiàn)臨床基擴增檢驗結合格臨床基擴增檢驗實驗室衛(wèi)部臨檢報省級衛(wèi)行政部門由省級衛(wèi)行政部門責令其暫停關臨床基擴增檢驗項目限期整改經專家組進行再技術驗收并合格并報省級衛(wèi)行政部門核準重新展臨床基擴增檢驗項目 第十七條 于未經衛(wèi)部臨檢組織專家組技術驗收合格并報省級衛(wèi)部門備案擅自展臨床基檢驗項目YL機構由省級衛(wèi)行政部門依據(jù)《YL機構管理條例》第四十七條《YL機構管理條例實施細則》第八十條予處罰并予公告公告所需費用由公告機構支付 第十八條 現(xiàn)列情況臨床基擴增檢驗實驗室由省級衛(wèi)行政部門責令其停止展臨床基擴增檢驗并其所YL機構予公告公告所需費用由公告機構支付: () 展超衛(wèi)部臨檢組織技術驗收合格并報省級衛(wèi)行政部門備案 臨床基擴增檢驗項目; (二) 使用未經家藥品監(jiān)督管理局批準試劑展臨床基擴增檢驗; (三) 臨床基擴增檢驗未展室內質量控制; (四) 臨床基擴增檢驗未參加室間質量評價; (五) 臨床基擴增檢驗弄虛作假; (六) 科研目基擴增檢驗項目向病收取費用; (七) 使用未經培訓合格專業(yè)技術員事臨床基擴增檢驗; 第四章 附 則 第十九條 采供血機構基擴增檢驗實驗室展基擴增檢驗項目管理參照本辦執(zhí)行 第二十條 衛(wèi)部臨檢組織專家組申請展臨床基擴增檢驗實驗室進行技術驗收所需費用按家關規(guī)定執(zhí)行 第二十條 本辦由衛(wèi)部負責解釋 第二十二條 本辦自發(fā)布起施行 附:臨床基擴增檢驗實驗室基本設置標準 根據(jù)《臨床檢驗擴增檢驗實驗室管理暫行辦》制定本標準 、 臨床基擴增檢驗實驗室區(qū)域設置原則 () 臨床基擴增檢驗實驗室區(qū)域設置原則 1、 試劑儲存準備區(qū) 2、 標本制備區(qū) 3、 擴增反應混合物配制擴增區(qū) 4、 擴增產物析區(qū) 使用全自析儀區(qū)域適合并 (二) 各工作區(qū)域必須明確標記避免同工作區(qū)域內設備、物品混用 (三) 進入各工作區(qū)域必須嚴格按照單向進行即試劑儲存準備區(qū) —>標本制備區(qū)—>擴增反應混合物配制擴增區(qū)—>擴增產物析區(qū) (四) 同工作區(qū)域使用同工作服(例同顏色)工作員離各工作區(qū)域工作服帶 二、 工作區(qū)域儀器設備配置標準 () 試劑儲存準備區(qū) 1、2-8C-15C冰箱 2、混勻器 3、微量加器(覆蓋1-1000ul) 4、移紫外燈(近工作臺面) 5、消耗品:性手套、性吸水紙、耐高壓處理離管加器吸(帶濾) 6、專用工作服工作鞋 7、專用辦公用品 (二) 標本制備區(qū) 1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱 2、高速臺式冷凍離機 3、混允器 4、水浴箱或加熱模塊 5、微量加器(覆蓋1-1000ul) 6、移紫外燈(近工作臺面) 7、超凈工作臺 8、消耗品:性手套、性吸水紙、耐高壓處理離管加器吸(帶濾) 9、專用工作服工作鞋 10、專用辦公用品 需處理DNA應具超聲波水浴儀 (三) 擴增反應混合物配制擴增區(qū) 1、 核酸擴增儀 2、 微量加器(覆蓋1-1000ul) 3、 移紫外燈(近工作臺面) 4、 消耗品:性手套、性吸水紙、耐高壓處理離管加器吸(帶濾) 5、 專用工作服工作鞋 6、 專用辦公用品 (四)擴增產物析區(qū) 視檢驗同定基本儀器設備: 1、 微量加器(覆蓋1-1000ul) 2、 移紫外燈(近工作臺面) 3、 消耗品:性手套、性吸水紙、加器吸(帶濾) 4、 專用工作服工作鞋 5、 專用辦公用品 特定序列進行PCR做重復檢測,需要三同區(qū)域,每區(qū)域具體技術操作試劑面詳細列. 1、品準備區(qū) 區(qū)域專門用作品準備制備操作用于核酸提取試劑應該采 取預防措施: 1)PCR產物帶要擴增序列DNA克隆能房間操作 2)組織培養(yǎng)物、組織標本血清品都帶進品準備間處理根據(jù)應用需要提取DNA或RNA 3)用于品處理工具能用作普通克隆工具能用作操作靶序列 4)DNA品應該用專門防護或壓塞式移液管操作防止吸取品氣溶膠遺留 5)體積品應該用單獨包裝菌性移液管吸取 6)管打前都要簡短離減少氣溶膠產且管能用力崩產氣溶膠 7)任何候都應該穿實驗服帶手套手套要經更換尤其抽提程每步間都要更換實驗服要專門用于品準備間經清洗 2、品準備RNA-PCR RNA-PCR額外步驟需要額外品操作增加品間污染機避免問題反轉錄步品準備區(qū)進行RNA-PCR應用UNG防止污染報道 3、前PCR區(qū) 必須專門用于準備各種反應區(qū)域區(qū)域必須保持干凈且沒自克隆品準備污染前PCR區(qū)必須要試劑準備特別專門用于前PCR區(qū)壓塞式移液管 4、PCR實驗室試劑操作 1)所用所溶液都應該沒核酸(或)核酸酶(DNaseRNase)污染 2)所PCR試劑使用水都應該高質量-新鮮蒸餾離水用0.22μm濾并且高壓滅菌 3)20℃25℃貯存試劑建議加點像疊氮鈉類抗微物劑擴增試劑或品制備試劑加入0.025%疊氮鈉YZ擴增反應 4)所用試劑都應該體積配制實驗看試劑否滿意裝僅夠使用量進行貯存 5)所試劑品準備程都要使用性滅菌瓶管 6)新配制試劑用于準備新標本前應該加檢驗 7)品準備前PCR區(qū)所使用移液管使用都應該保存 5、前PCR區(qū)建立PCR混合物 1)即刻用主混合物溶液配、裝并保存-20℃或4℃實驗室涉及擴增種或少數(shù)幾種特異序列做用 2)實驗室使用套引物致于配制包括所試劑單反應混合物夠經濟考慮裝保存夠PCR 3)作規(guī)則應該保存套陰性、弱陽性強陽性照品析品配制PCR前程效率潔凈程度且希望通使用已知弱陽性品驗證品緩沖液證明面含擴增YZ物 4)陰性品要與每組品同做析否存品與品間污染及否存PCR產物污染陰性照應該包括核酸外所試劑 5)做陽性照兩理由決定應該使用少數(shù)量核酸 6)由于必須照反應照模板特點應該予考慮 6、控制污染 已設計力酶用消除種形式污染—使用UNG技術能效消除由PCR產物引起污染另種控制污染使用紫外線種能完全消除污染問題污染降低幾數(shù)量級 7、PCR儀位置 8、PCR區(qū) PCR完需要析品并解釋數(shù)據(jù)應該留專門用于反應處理品PCR使用所用試劑、性耗材儀器都必須專門用于目決能實驗室區(qū)域試劑或儀器用于任何前PCR更問題請咨詢廣州雅瑪實驗室
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實驗室管理系統(tǒng)LIMS以實驗樣品為主體驅動、以檢測過程管理為中 心環(huán)節(jié)、以認證認可規(guī)范為質量保證,以檢測報告為核心。以實現(xiàn)實驗室的高 效和科學管理為目標,King'sLIMS系統(tǒng)為檢測行業(yè)實現(xiàn)數(shù)字化轉型賦能,將實驗室中不易管理的人、機、料、法、環(huán)等因素有效的進行了流程化控制,其核心功能就是檢驗流程控制、質量控制、數(shù)據(jù)跟蹤溯源。
主要分為三個模塊:流程管理、質量管理和輔助管理。
流程管理主要是樣品檢測到出報告的管理。
質量管理主要是17025標準規(guī)定的人、機、料、法、環(huán)的全面質量管理。
輔助管理就是其他的辦公管理。
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