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  zpzp78 2009-07-24 00:00:00

  其實都可以，只不過直接擴增僅僅是目的基因，擴增后還是要連接到載體上，我認為連接到載體上后再擴增，只是為了方便吧.

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  jiaxiaoxia1986 2009-07-24 00:00:00

  不連接到載體上你怎么擴增，養(yǎng)分呢

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  原駝sparrowa 2009-07-24 00:00:00

  PCR擴增的是重組基因 如果不將目的基因載入直接擴增 那不只是單純的復制原來的基因了么 引物就是key 只有有了這個才能將目的基因載入為什么會想到是水呢

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  好好先生Tel 2009-07-24 00:00:00

  你的問題有點難以理解。 PCR怎么做要看你的目的啊，如果從基因組中擴基因，連個鳥載體，當然是直接擴增。如果你要獲得全長序列，當然要載體，否則首尾的序列不可知。 至于“不加載體可以不加引物”就不知道你在說什么了。

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  a340244226 2009-07-24 00:00:00

  連到載體后擴增有好處：載體相對于基因組或cDNA復雜度降低，擴增出的片段純度比較高，而且循環(huán)數可以很低，如20-25循環(huán) 切忌用載體擴增時用高循環(huán)，否則會有大量smear 引物肯定需要加的！mg2+倒可以不加——我試過！ 如果沒有后續(xù)實驗不建議連上載體，因為太費時費事 有問題再聯(lián)系即可。

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