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  wyh415237 2017-12-16 00:00:00

  微生物菌落的觀察 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛢?nèi)容 目的：識(shí)別細(xì)菌、酵母菌、放線菌和霉菌四大類微生物的菌落特征。 內(nèi)容： 1．觀察已知菌的菌落的形態(tài)、大小、色澤、透明度、致密度和邊緣等特征。 2．根據(jù)菌落的形態(tài)特征判斷未知菌的類別。 二、實(shí)驗(yàn)材料和用具 大腸桿菌(E.coli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粘紅酵母(Rhodotorula gracitis)、熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)、細(xì)黃鏈霉菌(Streptomyces microflavus，又稱“5406”抗生菌)、灰色鏈霉菌(Streptomyces griseus )、黑曲霉(Aspergillus niger )、產(chǎn)黃青霉(Penicillium chrysogenum)、球孢白伍菌(Beauveria bassiana)等細(xì)菌的斜面菌種。 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基、高氏1號(hào)培養(yǎng)基、無(wú)菌水。 接種環(huán)、接種針、酒精燈、無(wú)菌培養(yǎng)皿多套、電熱恒溫箱。 三、操作步驟 (一)制備已知菌的單菌落 1．制備平板 將已融化的無(wú)菌培養(yǎng)基待冷卻至50℃左右，分別制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板、馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基平板和高氏1號(hào)培養(yǎng)基平板各一皿。 2．制備菌懸液或孢子懸液 在培養(yǎng)好的斜面菌種管內(nèi)加入5mL無(wú)菌水，制成菌懸液后備用。 3．制備單菌落 通過(guò)平板劃線法獲得細(xì)菌、酵母菌和放線菌的單菌落。用三點(diǎn)接種法獲得霉菌的單菌落。細(xì)菌于37℃恒溫培養(yǎng)24～48h，酵母菌于28℃培養(yǎng)2～3d，霉菌和放線菌置28℃培養(yǎng)5～7d，待長(zhǎng)成菌落后，仔細(xì)觀察四大類微生物菌落的形態(tài)特征，并將觀察結(jié)果記錄于表4-1中。 (二)制備未知菌落 l．倒平板 2．接種 可用彈土法接種，其要點(diǎn)為：采集校園土壤，待風(fēng)干磨碎后，可將細(xì)土撒在無(wú)菌的硬板紙表面，先彈去紙面浮土，然后打開(kāi)皿蓋，便含土的紙面對(duì)著平板培養(yǎng)基的表面，用手指在硬板紙背面輕輕一彈即可接種上各種微生物。 3．培養(yǎng) 將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板倒置于37℃培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)2～3d，將馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基倒置于28℃培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)3～5d，即可獲得未知菌的單菌落。 4．編號(hào) 從培養(yǎng)好的未知平板中，挑選8個(gè)不同的單菌落，逐個(gè)編號(hào)，根據(jù)菌落識(shí)別要點(diǎn)區(qū)分未知菌落類群，并將判斷結(jié)果填入表4～2中。 (三)直接觀察菌落 直接用實(shí)驗(yàn)3中的“土壤稀釋分離”獲得的單菌落進(jìn)行觀察識(shí)別，并將結(jié)果填入表4-2中。 四、注意事項(xiàng) 觀察菌落特點(diǎn)時(shí)，要選擇分離得很開(kāi)的單個(gè)較大菌落；已知菌落和未知菌落要編好號(hào)，請(qǐng)勿隨意移動(dòng)開(kāi)蓋，以免搞混菌號(hào)。 五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告 1．已知菌落的形態(tài)特征記錄于表4～1中。 2．將未知菌落的辨別結(jié)果記錄于表4～2中。 七、問(wèn)題和思考 1．試比較細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌菌落形態(tài)的差異? 2．設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室空氣環(huán)境中的微生物類別?

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