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離子色譜儀的操作流程及注意事項

青島盛瀚色譜技術(shù)有限公司 2020-09-03 11:35:52 1470  瀏覽
  • 離子色譜 (Ion Chromatography)是GX液相色譜(HPLC)的一種,是分析陰離子和陽離子的一種液相色譜方法。具有選擇性好、靈敏、快速、簡便等優(yōu)點,并且可以同時測定多種組分。現(xiàn)在范圍更寬了,有機陽離子,有機陰離子,生物胺這些都可以用離子色譜來檢測了,靈敏度高,既可以定性又可以定量。

    離子色譜儀操作流程:

    1、先檢查淋洗液系統(tǒng),打開氬氣氣瓶開關(guān),調(diào)節(jié)減壓閥指示為0.2-0.3Mpa;打開淋洗液系統(tǒng)氣源裝置,調(diào)節(jié)減壓閥,使指示表顯示為3-6PSi。

    2、分別按順序打開主機 -電腦-打印機等設(shè)備電源開關(guān),對設(shè)備進行上電操作。

    3、系統(tǒng)處理及控制系統(tǒng)上電接通后,進入操作界面,并進入系統(tǒng)操作面板,準備操作前的準備及管理工作。

    4、打開泵。如色譜分析儀長時間不使用或更換淋洗液后,要先打開平衡泵頭上的PRIME閥排氣后再開泵,待泵壓力穩(wěn)定后再打開YZ器電源。

    5、在進入色譜柱之前通過進樣器將樣品導入, 流動相將樣品帶入色譜柱, 在色譜柱中各組分被分離, 并依次隨流動相流至檢測器。

    6、檢測器檢測到的信號送至數(shù)據(jù)系統(tǒng),利用操作界面做完樣后,選擇檢測標準進入數(shù)據(jù)處理,對采集數(shù)據(jù)進行記錄、處理、打印或者保存等操作。

    7、關(guān)機,系統(tǒng)關(guān)機需要根據(jù)檢測樣品不同選擇不同關(guān)機步驟。對于陰陽離子,需要先將YZ器電流關(guān)掉,然后再關(guān)泵,ZH關(guān)主機。

    使用儀器時應(yīng)注意以下事項:

    1、 流動相瓶中濾頭要注意始終處于液面以下,防止將溶液吸干。

    2、 啟動泵前觀察從流動相瓶到泵之間的管路中是否有氣泡,如果有則應(yīng)將其排除。

    排除方法如下:先將與泵相連的塑料流路接頭擰下來,用洗耳球吸滿去離子水,從與泵段相連的流路管中注入,將流路管中的氣泡排除干凈。然后再將流動相瓶(一般為去離子水瓶)抬高,再將流路接頭與泵連接好。啟動泵,打開泵內(nèi)排氣閥選鈕,將泵內(nèi)氣泡排除干凈,一般觀察為流出液比較均勻,再將泵排氣閥擰緊。(注意:此項操作時,整個流路是與色譜柱斷開的)

    3、 用去離子水或流動相清洗整個流路時,可以采用大流量清洗(一般可將流量設(shè)置為2.0ml/min,但不能再太大)以縮短清洗時間,但在通流動相接色譜柱時需要將流量調(diào)整為色譜柱使用流量條件。

    操作如下:先將泵停止,再按動正號或負號,將光標調(diào)整至流量位置,按下確認鍵,再通過調(diào)節(jié)正負號將流量調(diào)節(jié)至色譜柱使用條件后,再按確認鍵。此時需要等待5s后再啟動泵開關(guān)。

    接色譜柱時注意先將接頭在色譜柱前端抵上2-5s,將色譜柱前端氣泡排除后再將接頭擰緊。待色譜柱下端流出溶液后,在將色譜柱下端接頭擰上。(注意:接頭不能擰的太緊,防止將管路卡的太緊而造成系統(tǒng)壓力增大,擰的程度以不漏液為宜)

    4、 使用陰離子色譜柱檢測,通流動相時注意將電流旋鈕打開,調(diào)節(jié)至70±5mA,實驗完畢,在關(guān)閉高壓泵以前將電流關(guān)閉。

    5、 進樣時閥的扳動要注意,不能太快,以免損傷閥體; 也不能太慢,以免造成樣品流失。在進樣過程中,要嚴格按清洗程序操作,以減小前次樣品殘留對本次檢測的影響。


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離子色譜儀的操作流程及注意事項

離子色譜 (Ion Chromatography)是GX液相色譜(HPLC)的一種,是分析陰離子和陽離子的一種液相色譜方法。具有選擇性好、靈敏、快速、簡便等優(yōu)點,并且可以同時測定多種組分?,F(xiàn)在范圍更寬了,有機陽離子,有機陰離子,生物胺這些都可以用離子色譜來檢測了,靈敏度高,既可以定性又可以定量。

離子色譜儀操作流程:

1、先檢查淋洗液系統(tǒng),打開氬氣氣瓶開關(guān),調(diào)節(jié)減壓閥指示為0.2-0.3Mpa;打開淋洗液系統(tǒng)氣源裝置,調(diào)節(jié)減壓閥,使指示表顯示為3-6PSi。

2、分別按順序打開主機 -電腦-打印機等設(shè)備電源開關(guān),對設(shè)備進行上電操作。

3、系統(tǒng)處理及控制系統(tǒng)上電接通后,進入操作界面,并進入系統(tǒng)操作面板,準備操作前的準備及管理工作。

4、打開泵。如色譜分析儀長時間不使用或更換淋洗液后,要先打開平衡泵頭上的PRIME閥排氣后再開泵,待泵壓力穩(wěn)定后再打開YZ器電源。

5、在進入色譜柱之前通過進樣器將樣品導入, 流動相將樣品帶入色譜柱, 在色譜柱中各組分被分離, 并依次隨流動相流至檢測器。

6、檢測器檢測到的信號送至數(shù)據(jù)系統(tǒng),利用操作界面做完樣后,選擇檢測標準進入數(shù)據(jù)處理,對采集數(shù)據(jù)進行記錄、處理、打印或者保存等操作。

7、關(guān)機,系統(tǒng)關(guān)機需要根據(jù)檢測樣品不同選擇不同關(guān)機步驟。對于陰陽離子,需要先將YZ器電流關(guān)掉,然后再關(guān)泵,ZH關(guān)主機。

使用儀器時應(yīng)注意以下事項:

1、 流動相瓶中濾頭要注意始終處于液面以下,防止將溶液吸干。

2、 啟動泵前觀察從流動相瓶到泵之間的管路中是否有氣泡,如果有則應(yīng)將其排除。

排除方法如下:先將與泵相連的塑料流路接頭擰下來,用洗耳球吸滿去離子水,從與泵段相連的流路管中注入,將流路管中的氣泡排除干凈。然后再將流動相瓶(一般為去離子水瓶)抬高,再將流路接頭與泵連接好。啟動泵,打開泵內(nèi)排氣閥選鈕,將泵內(nèi)氣泡排除干凈,一般觀察為流出液比較均勻,再將泵排氣閥擰緊。(注意:此項操作時,整個流路是與色譜柱斷開的)

3、 用去離子水或流動相清洗整個流路時,可以采用大流量清洗(一般可將流量設(shè)置為2.0ml/min,但不能再太大)以縮短清洗時間,但在通流動相接色譜柱時需要將流量調(diào)整為色譜柱使用流量條件。

操作如下:先將泵停止,再按動正號或負號,將光標調(diào)整至流量位置,按下確認鍵,再通過調(diào)節(jié)正負號將流量調(diào)節(jié)至色譜柱使用條件后,再按確認鍵。此時需要等待5s后再啟動泵開關(guān)。

接色譜柱時注意先將接頭在色譜柱前端抵上2-5s,將色譜柱前端氣泡排除后再將接頭擰緊。待色譜柱下端流出溶液后,在將色譜柱下端接頭擰上。(注意:接頭不能擰的太緊,防止將管路卡的太緊而造成系統(tǒng)壓力增大,擰的程度以不漏液為宜)

4、 使用陰離子色譜柱檢測,通流動相時注意將電流旋鈕打開,調(diào)節(jié)至70±5mA,實驗完畢,在關(guān)閉高壓泵以前將電流關(guān)閉。

5、 進樣時閥的扳動要注意,不能太快,以免損傷閥體; 也不能太慢,以免造成樣品流失。在進樣過程中,要嚴格按清洗程序操作,以減小前次樣品殘留對本次檢測的影響。


2020-09-03 11:35:52 1470 0
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線材纏繞試驗機的操作流程及注意事項

線材纏繞試驗機主要用于檢查直徑等于或小于6mm的有鍍層和無鍍層的金屬線材承受纏繞變形后顯示表面缺陷及表面鍍層的結(jié)合牢固性。主要用于工廠、企業(yè)、科研部門、實驗室、車間、電纜等行業(yè),為生產(chǎn)和科研提供檢測手段,那么他又那些操作流程及注意事項呢,下面請聽小編來講解:

4.1根據(jù)試驗所用線材的檢測標準,選擇相應(yīng)的芯棒裝到夾頭上。(小于Φ20的芯棒,因頭部的方為10×10所以還要裝上卡塊)并用夾頭上的兩個螺釘壓緊。


    若做小直徑線材的自身纏繞,可使用平鉗口將鉗口上的刻線對中后壓緊鉗口夾住試材,注意對中。

4.2當需要在試樣末端加掛重碼時,可將線材一端插入夾頭或鉗口上的相應(yīng)孔內(nèi),另一端通過隨動支架垂下,并在末端彎一環(huán),將該機的掛鉤托盤掛上,并加上不大于該線材公稱拉斷力2~5%的相應(yīng)重量。本機掛鉤托盤約重2N,并備有約重2N重塊3件、1N重塊2件,0.5N重塊1件。

    對于強度高、直徑大的線材,有時加掛重碼受到試驗機的空間限制,可用平口鉗,適當夾緊進行纏繞。

4.3確定芯棒旋轉(zhuǎn)方向,合上離合器,踏下腳踏開關(guān)的踏板,此時電機啟動,由于轉(zhuǎn)速很低,可由操作者來數(shù)圈數(shù),當圈數(shù)達到要求時抬起踏板,電機停止。注意此時一定要打開離合器,芯棒會自動反轉(zhuǎn),待芯棒上纏繞時的扭力消失會自動停止。這時才能取下試樣。大直徑試樣纏繞后由于扭矩大,離合器有時打不開,此時可用開關(guān)點動一下。


2019-07-05 09:31:40 413 0
自行皮下注射流程及注意事項
如題 求解 謝謝
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離子色譜儀使用注意事項

       離子色譜法是七十年代后期發(fā)展起來的一種快速有效的微量離子分析技術(shù),在分析測定陰、陽離子或離子型化合物方面,以其快速、靈敏、選擇性好的特點,倍受分析工作者青睞,是環(huán)境監(jiān)測、石油化工等行業(yè)作為水質(zhì)分析的標準儀器。

       離子色譜是GX液相色譜的一種,故又稱GX離子色譜(HPIC)或現(xiàn)代離子色譜,其有別于傳統(tǒng)離子交換色譜柱色譜的主要是樹脂具有很高的交聯(lián)度和較低的交換容量,進樣體積很小,用柱塞泵輸送淋洗液通常對淋出液進行在線自動連續(xù)電導檢測。

離子色譜儀在使用的時候有哪些需要注意的地方呢?

1.離子色譜儀每星期至少開機?1~2?次,開泵運行0.5h,防止流路堵塞。管路和電導池用超純水沖洗30?min,防止鹽結(jié)晶。

2.YZ器一段時間不用(一周以上)需卸下,應(yīng)用注射器分別從淋洗液出口和再生液入口注入5?ml以上的去離子水,并用堵頭堵上密封保存。再次使用時也用此法活化。?

3.每周更換兩次泵里的泵頭密封清洗液(100%水),高度在MIN?和MAX之間。

4.流動相瓶中濾頭要注意始終處于液面以下,防止將溶液吸干。

5.淋洗液應(yīng)過濾,脫氣,對被分析的樣品頁必須過濾,做相應(yīng)的預(yù)處理,各種儲備液應(yīng)放于冰箱中低溫保存。

6.淋洗液不可第二天使用,以免滋生細菌,影響色譜柱的使用壽命。

7.儀器至少每隔3天通一次去離子水,隔七天通一次淋洗液,離子色譜柱沒使用兩個月,需0.2mol/L碳酸鈉溶液和1%的酒石酸溶液洗滌。

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旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器的操作流程及日常維護


一、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器操作流程

1、接通電源,五芯插頭插入主機后箱五芯座上面,三芯加熱插頭插入主機后三芯座上面。

2、調(diào)整主機的高度,根據(jù)各種型號進行調(diào)整(52A型手動升降需先松開控制箱背后的T型螺絲釘),左手托住機頭,右手轉(zhuǎn)動升降手輪,達到自己需要的高度,停止轉(zhuǎn)動,并將T型螺絲刀旋緊。帶自動升降的只需按升降開關(guān)上升下降就好。

2、調(diào)整主機機頭的傾斜度,先松開左側(cè)機頭鎖緊,左手托住機頭,達到需要的角度后,鎖緊機頭鎖緊即可。

3、打開電源開關(guān),綠燈亮主機開始旋轉(zhuǎn),轉(zhuǎn)動調(diào)速旋鈕,主機0-150轉(zhuǎn)/分范圍內(nèi)調(diào)速。

4、水浴鍋里面水加入適當?shù)奈恢?,按電熱開關(guān)水浴鍋自動加熱,恒溫控制,不允許干燒。

5、工作結(jié)束,關(guān)閉電源及加熱開關(guān),拔掉電源線。

二、旋蒸蒸發(fā)器的常維護:

1、儀器的重要部件及零部件的拆裝工作,應(yīng)由儀器專管人員執(zhí)行;

2、玻璃件有嚴重污垢時,可用稀鹽酸清洗;

3、密封四氟接口,一般情況不用拆洗,如有嚴重污垢后可拆洗,水浴鍋內(nèi)清水應(yīng)經(jīng)常調(diào)換,清洗;

4、密封圈:經(jīng)常檢查密封圈的磨損(腐蝕)程度,及時更換磨損的密封圈,以確保儀器的真空度。


2020-04-22 17:21:32 509 0
真空干燥箱操作方法及操作注意事項

真空干燥箱操作方法: 

(1)需干燥處理的物品放入寶元通真空干燥箱內(nèi),將箱門關(guān)上,并關(guān)閉放氣閥,開啟真空閥,接通真空泵電源開始抽氣,使箱內(nèi)真空度達到-0.1M Pa時,關(guān)閉真空閥,再關(guān)閉真空泵電源。 

(2)把真空干燥箱電源開關(guān)撥至“開”處,選擇所需的設(shè)定溫度,箱內(nèi)溫度開始上升,當箱內(nèi)溫度接近設(shè)定溫度時,加熱指示燈忽亮忽熄,反復多次,一般120min以內(nèi)可進入恒溫狀態(tài)。 

(3)所需工作溫度較低時,可采用二次設(shè)定方法,如所需溫度60℃,初次可設(shè)定50℃,等溫度過沖開始回落后,再***次設(shè)定60℃。

(4)根據(jù)不同物品潮濕程度,選擇不同的干燥時間,如干燥時間較長,真空度下降,需再次抽氣恢復真空度,應(yīng)先開真空泵電源,再開啟真空閥。

(5)干燥結(jié)束后應(yīng)先關(guān)閉干燥箱電源,開啟放氣閥,解除箱內(nèi)真空狀態(tài),再打開箱門取出物品。(解除真空后,如密封圈與玻璃門吸緊變形不易立即打開箱門,經(jīng)過一段時間后,等密封圈恢復原形后,才能方便開啟箱門。)

真空干燥箱操作注意事項:
(1)不可在干燥箱加熱狀態(tài)下放置樣品,需在確保加熱關(guān)閉狀態(tài)下放置樣品,放置樣品時,上下四周應(yīng)留存空間,保持箱內(nèi)氣流暢通。

(2)箱內(nèi)底部加熱絲上置有散熱板,不可將樣品放置其上,以免影響熱量上流導致熱量積累,若樣品在高溫狀態(tài)下會產(chǎn)生相態(tài)變化,裝在托盤中,避免污染其他樣品。

(3)含易燃易爆等有機揮發(fā)性溶劑或助劑禁止放入箱內(nèi)。   

2022-01-07 14:38:19 859 0
sp-2100氣象色譜儀的操作流程和注意事項是什么?。?
 
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手術(shù)顯微鏡的操作流程
 
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液相色譜儀的操作流程

隨著現(xiàn)在科技和產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,以色譜儀為代表的個中復雜的儀器,也開始在儀器界迅速的發(fā)展著,那么今天我們所說的就是液相色譜儀,液相色譜儀也是人們在生活中會經(jīng)常用到的,我們趕緊來看看液相色譜儀的操作流程吧!
在操作的時候我們首先要對流動相進行過濾,然后我們根據(jù)不同的需要來進行濾膜的選擇,一般為有機系和水系,通常我們用的孔徑是0.20um和0.45um;然后我們要對抽濾后的流動相進行超聲脫氣,時間大概控制在10-20分鐘為比較合適的;在正常的情況下我們會的液相色譜儀首先要用甲醇來進行清潔,大概在10-20分鐘,然后再進入測試,要是流動相為緩沖試劑,那么我們需要進行第二次蒸水清洗10-20分鐘,直到色譜柱中的有機相沖鋒為止;流動相在沖洗20-30分鐘之后,儀器就可以穩(wěn)定,最重要的就是儀器基線走后,就可以進行測試了;同樣的兩針指標,把他們的結(jié)果相比較,比值在0.98-1.02之間以后,我們就可以正式進行樣品的測試了;在樣品測試結(jié)束之后,就要進行色譜儀以及色譜柱的清洗和維護,要是流動相為緩沖試劑的話,那么一樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘,然后才可以進行有機相的保護,不然的話會損傷色譜柱;在關(guān)機的時候,應(yīng)該先關(guān)閉計算機,在關(guān)閉液相色譜儀;ZH我們需要填寫登記本,然后由負責人進行簽字。

2020-10-22 15:34:57 746 0
如何操作數(shù)顯卡尺及使用時注意事項
 
2017-02-13 12:42:10 561 1
顆粒測定儀如何操作及使用注意事項

     顆粒測定儀是采用傳感測量技術(shù),實現(xiàn)數(shù)字顯示的新型儀器,適于圓球狀或圓柱狀的顆粒料抗壓碎強度測定。有體積小、測量值直讀、精度高、使用方便等優(yōu)點,可以進行化肥、藥品、催化劑、顆粒等樣品強度測定。

  顆粒測定儀采用高精度壓力傳感器,LED 數(shù)字顯示,讀數(shù)直觀準確,可連續(xù)測量谷物,飼料 等 硬度值。 自動顯示,自動鎖存。自動復位,自動循環(huán)測試,自動診斷,自動 報警。

  顆粒測定儀使用注意事項

  1、未通電時,不得隨便順時針旋轉(zhuǎn)手輪,使加力桿與樣品盤接觸受力,以免因過載而損壞傳感器。

  2、測定樣品強度前, 應(yīng)先將樣品盤清理干凈, 放好樣品盤和盤ZX的QL柱, 再按清零鍵, 內(nèi)部數(shù)據(jù)自動恢復, 直到數(shù)字顯示為 00.0。

  3、當受力大于500N,應(yīng)及時逆時針旋轉(zhuǎn)手輪,使加力桿與樣品分離,結(jié)束本次試驗。

  4、試驗過程中,在順時針旋轉(zhuǎn)手輪時,不得突然逆時針旋轉(zhuǎn)手輪減力(超量程報警時除外),否則儀器會誤判為樣品已破碎而鎖定無效數(shù)值。

  5、顆粒測定儀試驗過程中,當顆粒已受力,應(yīng)盡量緩慢旋轉(zhuǎn)手輪,使力上升的速率盡可能低,這樣可保證測量精度,比如某一樣品的顆粒實際強度為50N,而力的上升速率較高,假設(shè)為10N/秒,由于本儀器A/D采樣頻率約為5次/秒,則儀器有可能測量為48N左右,如降為1N/秒,則測定值相應(yīng)在49.8N左右。

  6、試驗結(jié)束時,也應(yīng)注意加力桿遠離樣品盤,確認其處于非受力狀態(tài),方可關(guān)閉電源。

  顆粒測定儀的正常測試:

  1. 做好測試前準備工作,打開電源開關(guān),儀器進入測試狀態(tài),顯示0.0。

  2. 將樣品放入測試臺面正中間,按啟動鍵,電機工作運轉(zhuǎn),壓桿向下運動,電源燈閃爍,儀器顯示當前測試序號,壓柱慢慢向下壓直至被測樣品破碎。瞬間電機反向運動(向上),儀器顯示樣品破碎強度Z大值。測試結(jié)束,準備下次測試。

  3. 自動顆粒測定儀的清零鍵。按清零鍵,將當前測量值做零點,顯示0.0,同時清除內(nèi)存數(shù)據(jù),下次測量從序號1開始,并且推桿提升一段距離。如果一開始推桿太靠下,可不斷按清零鍵,直到推桿提升的位置合適。

  4. 顆粒測定儀自動顆粒測定儀的打印鍵。按打印鍵,將測試結(jié)果打印出來,有幾個測試結(jié)果打印幾個,同時顯示序號。未安微型打印機,不影響儀器顯示(選定)。




(來源:天津天河分析儀器有限公司)

2019-08-16 16:01:38 743 0
PT-PCR操作流程
求PT-PCR操作流程
2010-05-17 04:03:14 1038 1
熱刺激電流測試儀的操作步驟及注意事項

試驗操作步驟:

1、 把測試電流主機數(shù)據(jù)線和加熱裝置數(shù)據(jù)線,分別與電腦連接好

2、 把電極線與電流主機連接好,(紅色線-電壓,黑色線-接地,BNC接頭-電流) 

3、 把測試試樣平整放置在平板電極上,并把上電極居中放置好

4、 打開烘箱開關(guān),和測試電流主機電源開關(guān)(建議供電后預(yù)熱幾分鐘)

5、 打開試驗軟件,輸入試驗參數(shù)后,點開始試驗

6、 試驗結(jié)束后,會有提示,可以對數(shù)據(jù)進行保存和導出。

7、 連續(xù)做下次試驗時,只需要更換試樣即可。

設(shè)備組成:

1、高電阻微電流測量儀

2、電熱恒溫加熱試驗箱

3、測試電極

4、測試系統(tǒng)

注意事項

   1、開機順序:先開主機,再打開軟件

   2、試驗環(huán)境:好是通風環(huán)境

   3、加熱功率:大于1.5KW

   4、測試過程:測試過程中,不要觸摸數(shù)據(jù)線

   5、屏蔽干擾:遠離有磁場干擾的測試設(shè)備


2021-10-26 14:38:17 309 0
本生闡述:elisa操作步驟說明及注意事項

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  酶聯(lián)免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫ELISA),指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結(jié)合專一性進行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。要知道elisa操作步驟首先我們先了解一下elisa的原理是什么。

  elisa的原理:

 ?、偈箍乖蚩贵w結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。

  ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性, 又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體 上形成的抗原抗體復合物與其他物質(zhì)分開,結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物, 產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)焰色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達到 很高的敏感度。

  elisa操作步驟:

  方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。

  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

  3. 加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。

  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。

  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越 強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則 410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

  方法二 用于檢測未知抗體的間接法:

  用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日 洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔 中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體

  以上是elisa操作步驟,那么在elisa操作步驟的操作步驟中需要注意什么呢?下面是elisa實驗的注意事項:

  1.正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

  2.在elisa操作步驟中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:固相載體的選擇、包被抗體(或抗原)的選擇、酶標記抗體工作濃度的選擇、酶的底物及供氫體的選擇

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2023-06-05 11:14:21 320 0

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