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微生物分離方法

jijijijiji311 2008-09-25 03:11:16 748  瀏覽
  • 做實驗時經(jīng)常用到分離方法,比如土壤稀釋分離法,請朋友們給我介紹一下幾種分離方法,謝謝!... 做實驗時經(jīng)常用到分離方法,比如土壤稀釋分離法,請朋友們給我介紹一下幾種分離方法,謝謝! 展開

參與評論

全部評論(4條)

  • 962947919 2008-09-26 00:00:00
    高濃度食鹽:可以分離金黃色葡萄球菌 青霉素:殺死細菌,分離出真菌 無氮培養(yǎng)基:分離出圓褐固氮菌

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  • 融雪白梅 2008-09-26 00:00:00
    乳糖是還原性糖嗎 還原性糖種類:還原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等。 非還原性糖有蔗糖、淀粉、纖維素等,但它們都可以通過水解生成相應的還原性單糖。 還原性糖概念:還原糖是指具有還原性的糖類。在糖類中,分子中含有游離醛基或酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都具有還原性。 葡萄糖分子中含有游離醛基,果糖分子中含有游離酮基,乳糖和麥芽糖分子中含有游離的醛基,故它們都是還原糖。 還原性糖鑒定: 鑒定原理:生物組織中普遍存在的還原糖種類較多,常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基)。用斐林試劑、班氏試劑、銀氨溶液等可以檢驗生物組織中還原糖存在與否。 (1)利用斐林試劑:斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下: CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O 用斐林試劑鑒定還原糖時,溶液的顏色變化過程為:淺藍色→→棕色→磚紅色(沉淀)。 (2)利用班氏試劑:班氏試劑由A液(硫酸銅溶液),B液(檸檬酸鈉和碳酸溶液)配制而成。將A溶液傾注人B液中,邊加邊攪,如有沉淀可過濾。實驗原理與斐林試劑相似,所不同的是班氏試劑可長期使用。班氏試劑A液中的硫酸銅溶液與B液中的無水硫酸鈉和檸檬酸鈉相遇,能產(chǎn)生可溶性的又略能離解出cu2+的檸檬酸銅。 (3)利用銀氨溶液:銀氨溶液是在2%的AgNO3溶液中逐滴滴人2%的稀氨水,至Z初產(chǎn)生的沉淀恰好溶解為止,這時得到的溶液就是銀氨溶液。銀氨溶液中含有Ag(NH3) 20H(氫氧化二氨合銀),這是一種弱氧化劑,能把醛基氧化成羧基,同時Ag+被還原成金屬銀。還原生成的銀附著在試管壁上,形成銀鏡??梢?,銀鏡反應也可用于鑒定可溶性還原糖。鑒定的結(jié)果是出現(xiàn)銀鏡。 用班氏試劑鑒定可溶性還原糖,比用斐林試劑更簡便 斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則實驗難以得到滿意結(jié)果,因為此反應利用的是斐林試劑中的Cu(OH) 2產(chǎn)物作為弱氧化劑參與與還原糖的反應,而我們知道,Cu(OH) 2是一種沉淀物質(zhì),放置過久沉淀過多則不利于反應,而班氏試劑是斐林試劑的改良,它利用檸檬酸作為Cu2+的絡(luò)合劑,使溶液穩(wěn)定、靈敏度高且可以長期使用,故更簡便。 班氏試劑與斐林試劑比較 首先,兩者的配方不一樣。斐林試劑主要由質(zhì)量濃度為0.1g•mL-1的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.05g•mL-1的CuSO2溶液配制而成。其中0.1gmL-1的NaOH溶液稱為斐林試劑甲,0.05g•mL-1的CuSO4溶液稱為斐林試劑乙。而班氏試劑的配方為:①400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水碳酸鈉;②50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅,制成CuSO4溶液;③把CuSO2溶液倒入檸檬酸鈉?Na2CO3溶液中,邊加邊攪,如產(chǎn)生沉淀可濾去。 ??其次,兩者在反應原理上略有差別。利用斐林試劑鑒定時,斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應產(chǎn)生Cu(OH)2,Cu(OH)2和可溶性還原糖反應產(chǎn)生磚紅色沉淀。而班氏試劑中Cu(OH)2的產(chǎn)生卻是這樣的:檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強堿弱酸鹽,在水中它們均可水解產(chǎn)生OH-,與檸檬酸鈉?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合時,Cu2+和OH-結(jié)合,生成Cu(OH)2,Cu(OH)2與葡萄糖中的醛基反應產(chǎn)生磚紅色沉淀。

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  • 18701914206he 2017-09-25 00:00:00
    自己去找 乳糖是還原性糖嗎 還原性糖種類:還原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等。 非還原性糖有蔗糖、淀粉、纖維素等,但它們都可以通過水解生成相應的還原性單糖。 還原性糖概念:還原糖是指具有還原性的糖類。在糖類中,分子中含有游離醛基或酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都具有還原性。 葡萄糖分子中含有游離醛基,果糖分子中含有游離酮基,乳糖和麥芽糖分子中含有游離的醛基,故它們都是還原糖。 還原性糖鑒定: 鑒定原理:生物組織中普遍存在的還原糖種類較多,常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基)。用斐林試劑、班氏試劑、銀氨溶液等可以檢驗生物組織中還原糖存在與否。 (1)利用斐林試劑:斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下: CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O 用斐林試劑鑒定還原糖時,溶液的顏色變化過程為:淺藍色→→棕色→磚紅色(沉淀)。 (2)利用班氏試劑:班氏試劑由A液(硫酸銅溶液),B液(檸檬酸鈉和碳酸溶液)配制而成。將A溶液傾注人B液中,邊加邊攪,如有沉淀可過濾。實驗原理與斐林試劑相似,所不同的是班氏試劑可長期使用。班氏試劑A液中的硫酸銅溶液與B液中的無水硫酸鈉和檸檬酸鈉相遇,能產(chǎn)生可溶性的又略能離解出cu2+的檸檬酸銅。 (3)利用銀氨溶液:銀氨溶液是在2%的AgNO3溶液中逐滴滴人2%的稀氨水,至Z初產(chǎn)生的沉淀恰好溶解為止,這時得到的溶液就是銀氨溶液。銀氨溶液中含有Ag(NH3) 20H(氫氧化二氨合銀),這是一種弱氧化劑,能把醛基氧化成羧基,同時Ag+被還原成金屬銀。還原生成的銀附著在試管壁上,形成銀鏡??梢?,銀鏡反應也可用于鑒定可溶性還原糖。鑒定的結(jié)果是出現(xiàn)銀鏡。 用班氏試劑鑒定可溶性還原糖,比用斐林試劑更簡便 斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則實驗難以得到滿意結(jié)果,因為此反應利用的是斐林試劑中的Cu(OH) 2產(chǎn)物作為弱氧化劑參與與還原糖的反應,而我們知道,Cu(OH) 2是一種沉淀物質(zhì),放置過久沉淀過多則不利于反應,而班氏試劑是斐林試劑的改良,它利用檸檬酸作為Cu2+的絡(luò)合劑,使溶液穩(wěn)定、靈敏度高且可以長期使用,故更簡便。 班氏試劑與斐林試劑比較 首先,兩者的配方不一樣。斐林試劑主要由質(zhì)量濃度為0.1g•mL-1的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.05g•mL-1的CuSO2溶液配制而成。其中0.1gmL-1的NaOH溶液稱為斐林試劑甲,0.05g•mL-1的CuSO4溶液稱為斐林試劑乙。而班氏試劑的配方為:①400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水碳酸鈉;②50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅,制成CuSO4溶液;③把CuSO2溶液倒入檸檬酸鈉?Na2CO3溶液中,邊加邊攪,如產(chǎn)生沉淀可濾去。 ??其次,兩者在反應原理上略有差別。利用斐林試劑鑒定時,斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應產(chǎn)生Cu(OH)2,Cu(OH)2和可溶性還原糖反應產(chǎn)生磚紅色沉淀。而班氏試劑中Cu(OH)2的產(chǎn)生卻是這樣的:檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強堿弱酸鹽,在水中它們均可水解產(chǎn)生OH-,與檸檬酸鈉?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合時,Cu2+和OH-結(jié)合,生成Cu(OH)2,Cu(OH)2與葡萄糖中的醛基反應產(chǎn)生磚紅色沉淀。 高濃度食鹽:可以分離金黃色葡萄球菌 青霉素:殺死細菌,分離出真菌 無氮培養(yǎng)基:分離出圓褐固氮菌

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  • 去聽白*晚風 2017-09-03 00:00:00
    一般有以下五種方法: 1、傾注平板法 首先把微生物懸液通過一系列稀釋,取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40~50°左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合,然后把這混合液傾注到無菌的培養(yǎng)皿中,待凝固之后,把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。單一細胞經(jīng)過多次增殖后形成一個菌落,取單個菌落制成懸液,重復上述步驟數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)物。 2、涂布平板法 首先把微生物懸液通過適當?shù)南♂專∫欢康南♂屢悍旁跓o菌的已經(jīng)凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上,然后用無菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上,經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個菌落。 3、平板劃線法 Z簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無菌的接種環(huán)取培養(yǎng)物少許在平板上進行劃線。劃線的方法很多,常見的比較容易出現(xiàn)單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、放射法、四格法等。當接種環(huán)在培養(yǎng)基表面上往后移動時,接種環(huán)上的菌液逐漸稀釋,Z后在所劃的線上分散著單個細胞,經(jīng)培養(yǎng),每一個細胞長成一個菌落。 4、富集培養(yǎng)法 富集培養(yǎng)法的方法和原理非常簡單。我們可以創(chuàng)造一些條件只讓所需的微生物生長,在這些條件下,所需要的微生物能有效地與其他微生物進行競爭,在生長能力方面遠遠超過其他微生物。所創(chuàng)造的條件包括選擇Z適的碳源、能源、溫度、光、pH、滲透壓和氫受體等。在相同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下,經(jīng)過多次重復移種,Z后富集的菌株很容易在固體培養(yǎng)基上長出單菌落。如果要分離一些專性寄生菌,就必須把樣品接種到相應敏感宿主細胞群體中,使其大量生長。通過多次重復移種便可以得到純的寄生菌。 5、厭氧法 在實驗室中,為了分離某些厭氧菌,可以利用裝有原培養(yǎng)基的試管作為培養(yǎng)容器,把這支試管放在沸水0浴中加熱數(shù)分鐘,以便逐出培養(yǎng)基中的溶解氧。然后快速冷卻,并進行接種。接種后,加入無菌的石蠟于培養(yǎng)基表面,使培養(yǎng)基與空氣隔絕。另一種方法是,在接種后,利用N2或CO2取代培養(yǎng)基中的氣體,然后在火焰上把試管口密封。有時為了更有效地分離某些厭氧菌,可以把所分離的樣品接種于培養(yǎng)基上,然后再把培養(yǎng)皿放在完全密封的厭氧培養(yǎng)裝置中。

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