ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說(shuō)明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。

　　一、標(biāo)本的采取和保存

　　可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液)，有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。

　　血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過一周測(cè)定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。

　　二、試劑的準(zhǔn)備

　　按試劑盒說(shuō)明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。

　　三、加樣

　　在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。

　　四、保溫

　　在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當(dāng)。

　　ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。

　　溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí)，產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反應(yīng)4℃更為徹底，在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜，以形成最多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng)，在ELISA中一般不予采用。

　　保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。無(wú)論是水浴還是濕盒溫育，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng)，操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書的要求控制溫育。室溫溫育時(shí)，ELISA板只要平置于操作臺(tái)上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn)，一個(gè)人操作時(shí)，一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。

　　注意操作大鼠Elisa試劑盒事項(xiàng)與步驟

　　大鼠Elisa試劑盒注意事項(xiàng):

　　1. 大鼠Elisa試劑盒凍結(jié)與寄存：-20℃取出后主張放入2～8℃冰箱中凍結(jié)約，每隔一段時(shí)間悄悄搖晃均勻，不可直接放入溫度較高處凍結(jié)，防止因溫度改變太大，形成蛋白質(zhì)凝聚而出現(xiàn)沉積，血清的質(zhì)量下降。若短期無(wú)法用完一瓶，主張無(wú)菌分裝,再放回冷凍，防止反復(fù)凍融。4℃長(zhǎng)時(shí)間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白，形成絮狀物質(zhì)變差。

　　2. 大鼠Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅HX清中補(bǔ)體系統(tǒng)，在極少數(shù)情況下(培育ES細(xì)胞，滑潤(rùn)肌細(xì)胞時(shí))主張滅活，在培育其余細(xì)胞時(shí)不主張滅HX清。血清滅活十分簡(jiǎn)單產(chǎn)生沉積，如必須滅活請(qǐng)按56℃，30 min，輕微搖晃準(zhǔn)則操作，滅活溫度高、時(shí)間長(zhǎng)、搖晃不均都簡(jiǎn)單產(chǎn)生沉積。

　　3. 大鼠Elisa試劑盒培育基：無(wú)血清培育基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì)，可是，血清仍然是培育液中最根本的添加物，尤其是在原代培育或細(xì)胞成長(zhǎng)狀況不良時(shí)，常常會(huì)先使用有血清的培育液進(jìn)行培育，待細(xì)胞成長(zhǎng)旺盛后再換成無(wú)血清培育液。

　　大鼠Elisa試劑盒操作過程 ：

　　1.用蓋片鑷人Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭潔凈，不要用紗布;

　　2.將蓋玻片悄悄放入6孔培育板(每孔一片)或培育皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

　　3.在間隔紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

　　4.將通過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培育板中，使蓋玻片徹底浸在培育液中;

　　5.將人Elisa試劑盒培育板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞成長(zhǎng)至覆蓋培育板底部2/3面積時(shí)，將培育板取出，用蓋片鑷悄悄取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

　　注意操作大鼠Elisa試劑盒事項(xiàng)與步驟，先和大家介紹到這，如果想要了解更多Elisa試劑盒的信息，可以關(guān)注天津本生，本生生物給醫(yī)藥客戶提供生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)試劑及耗材，歡迎廣大客戶來(lái)詢。

自動(dòng)開口閃點(diǎn)測(cè)定儀適用標(biāo)準(zhǔn)： GB/T267-88 、ASTM D92、GB/T3536-2008，采用觸摸屏代替鍵盤操作，液晶大屏幕LCD全中文顯示人機(jī)對(duì)話界面，全屏觸摸按鍵提示輸入，方便快捷，開放式、模糊控制集成軟件，模塊化結(jié)構(gòu)，符合國(guó)標(biāo)、美國(guó)、歐盟等標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)用于鐵路，航空，電力，石油行業(yè)及科研部門等。

開口閃點(diǎn)測(cè)定儀操作時(shí)，需要注意的幾點(diǎn)事項(xiàng)，下面我們給您介紹一下：

  1、務(wù)必使用帶可靠接地的電源插座為儀器供電，測(cè)試過程中油杯及其附近有高熱，禁止觸碰！

  2、測(cè)試過程中必須有人值守，測(cè)試完畢如有樣品燃燒及時(shí)用油杯蓋蓋住油杯，油杯蓋有高熱，禁止觸碰！

  3、禁止用手扳動(dòng)點(diǎn)火劃掃桿，否則將造成儀器徹底損壞。

  4、儀器有點(diǎn)火裝置，在通風(fēng)廚內(nèi)操作（不要開風(fēng)機(jī)），防止外部氣流造成測(cè)試誤差。

  5、溫度傳感器由玻璃制成，使用時(shí)不要與其它物品相碰。

  6、每次換樣品，都應(yīng)將開口杯清洗干凈，開口杯與加熱器之間不應(yīng)有其它物品間隔，以便保持良好的導(dǎo)熱。

  7、測(cè)試頭切勿用手或其它物品去壓、抬，點(diǎn)火桿不要用手去推拉，以免造成機(jī)械損傷。

　　ELISA實(shí)驗(yàn)原理：ELISA的原理、類型及操作步驟

　　ELISA的原理

　　ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。

　　ELISA方法類型和操作步驟

　　elisa可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體，②酶標(biāo)記的抗原或抗體，③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。

　　(一)雙抗體夾心法

　　雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原最常用的方法，操作步驟如下：

　　(1)將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。

　　(2)加受檢標(biāo)本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間，讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合，形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。

　　(3)加酶標(biāo)抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。

　　(4)加底物：夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。

　　根據(jù)同樣原理，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物，即可用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中的抗體。

　　(二)雙位點(diǎn)一步法

　　在雙抗體夾心法測(cè)定抗原時(shí)，如應(yīng)用針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體，則在測(cè)定時(shí)可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步。這種雙位點(diǎn)一步不但簡(jiǎn)化了操作，縮短了反應(yīng)時(shí)間，如應(yīng)用高親和力的單克隆抗體，測(cè)定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應(yīng)用使測(cè)定抗原的ELISA提高到新水平。

　　在一步法測(cè)定中，應(yīng)注意鉤狀效應(yīng)(hookeffect)，類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象。當(dāng)標(biāo)本中待測(cè)抗原濃度相當(dāng)高時(shí)，過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成夾心復(fù)合物，所得結(jié)果將低于實(shí)際含量。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)甚至可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

　　(三)間接法測(cè)抗體

　　間接法是檢測(cè)抗體最常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：

　　(1)將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。

　　(2)加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合，在洗滌過程中被洗去。

　　(3)加酶標(biāo)抗抗體：與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合，從而使該抗體間接dibiao記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測(cè)人對(duì)某種疾病的抗體，可用酶標(biāo)羊抗人IgG抗體。

　　(4)加底物顯色：顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量。

　　本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標(biāo)抗抗體檢測(cè)各種與抗原相應(yīng)的抗體。

　　(四)競(jìng)爭(zhēng)法

　　競(jìng)爭(zhēng)法可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。以測(cè)定抗原為例，受檢抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合，因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量呈反比。操作步驟如下：

　　(1)將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體。洗滌。

　　(2)待測(cè)管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無(wú)抗原，則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標(biāo)本中含有抗原，則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合，競(jìng)爭(zhēng)性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會(huì)，使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原，保溫后，酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)最充分的量。洗滌。

　　(3)加底物顯色：參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原最多，故顏色最深。參考管顏色深度與待測(cè)管顏色深度之差，代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測(cè)管顏色越淡，表示標(biāo)本中抗原含量越多。

　　(五)捕獲法測(cè)IgM抗體

　　血清中針對(duì)某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時(shí)存在，后者會(huì)干擾IgM抗體的測(cè)定。因此測(cè)定IgM抗本多用捕獲法，先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上，在去除IgG后再測(cè)定特異性IgM。操作步驟如下：

　　(1)將抗人IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗人IgM。洗滌。

　　(2)加入稀釋的血清標(biāo)本：保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。

　　(3)加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。

　　(4)加入針對(duì)特異性的酶標(biāo)抗體：使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合。洗滌。

　　(5)加底物顯色：如有顏色顯示，則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在，是為陽(yáng)性反應(yīng)。

　　(六)應(yīng)用親和素和生物素的ELISA

　　ELISA實(shí)驗(yàn)原理：ELISA的原理、類型及操作步驟!本生(天津)健康科技有限公司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)人士組成，于為生命科學(xué)研究領(lǐng)域提供產(chǎn)品，為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?；a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。

　　大鼠Elisa試劑盒操作注意事項(xiàng)與步驟

　　大鼠Elisa試劑盒注意事項(xiàng):

　　1. 大鼠Elisa試劑盒凍結(jié)與寄存：-20℃取出后主張放入2～8℃冰箱中凍結(jié)約，每隔一段時(shí)間悄悄搖晃均勻，不可直接放入溫度較高處凍結(jié)，防止因溫度改變太大，形成蛋白質(zhì)凝聚而出現(xiàn)沉積，血清的質(zhì)量下降。若短期無(wú)法用完一瓶，主張無(wú)菌分裝,再放回冷凍，防止反復(fù)凍融。4℃長(zhǎng)時(shí)間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白，形成絮狀物質(zhì)變差。

　　2. 大鼠Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅huoxue清中補(bǔ)體系統(tǒng)，在極少數(shù)情況下(培育ES細(xì)胞，滑潤(rùn)肌細(xì)胞時(shí))主張滅活，在培育其余細(xì)胞時(shí)不主張滅huoxue清。血清滅活十分簡(jiǎn)單產(chǎn)生沉積，如必須滅活請(qǐng)按56℃，30 min，輕微搖晃準(zhǔn)則操作，滅活溫度高、時(shí)間長(zhǎng)、搖晃不均都簡(jiǎn)單產(chǎn)生沉積。

　　3. 大鼠Elisa試劑盒培育基：無(wú)血清培育基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì)，可是，血清仍然是培育液中最根本的添加物，尤其是在原代培育或細(xì)胞成長(zhǎng)狀況不良時(shí)，常常會(huì)先使用有血清的培育液進(jìn)行培育，待細(xì)胞成長(zhǎng)旺盛后再換成無(wú)血清培育液。

　　大鼠Elisa試劑盒操作過程 ：

　　1.用蓋片鑷人Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭潔凈，不要用紗布;

　　2.將蓋玻片悄悄放入6孔培育板(每孔一片)或培育皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

　　3.在間隔紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

　　4.將通過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培育板中，使蓋玻片徹底浸在培育液中;

　　5.將人Elisa試劑盒培育板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞成長(zhǎng)至覆蓋培育板底部2/3面積時(shí)，將培育板取出，用蓋片鑷悄悄取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

　　大鼠Elisa試劑盒操作注意事項(xiàng)與步驟先和大家介紹到這，如果想要了解更多Elisa試劑盒的信息，可以關(guān)注天津本生，本生給生物醫(yī)藥客戶提供生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)試劑及耗材，歡迎廣大客戶來(lái)詢。

       隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，冷凍干燥技術(shù)越來(lái)越好，冷凍干燥機(jī)的發(fā)展也越來(lái)越快速，其應(yīng)用范圍也越來(lái)越廣泛，然而為了能讓冷凍干燥機(jī)更好地運(yùn)行，有很多需要注意的要點(diǎn)，不僅僅在使用期間，在其開機(jī)關(guān)機(jī)的時(shí)候也有很多需要注意的細(xì)節(jié)，下面我們就來(lái)仔細(xì)說(shuō)說(shuō)。

　　一、冷凍干燥機(jī)的開機(jī)

　　1打開冷凍干燥機(jī)機(jī)箱左側(cè)的總電源開關(guān)，氣壓數(shù)顯為大氣壓110pk；

　　2按住冷凍干燥機(jī)控制面板上的總開關(guān)鍵三秒鐘以上，溫度數(shù)顯為冷阱的實(shí)際溫度；

　　3啟動(dòng)制冷機(jī)，預(yù)冷30分鐘以上；

　　4將樣品放入樣品架，蓋上有機(jī)玻璃罩，并啟動(dòng)真空泵；

　　5待氣壓數(shù)顯穩(wěn)定后，記錄溫度和氣壓數(shù)值。

　　二、冷凍干燥機(jī)的停機(jī)

　　1紀(jì)錄停機(jī)前的溫度和氣壓數(shù)值；

　　2按住冷凍干燥機(jī)控制面板的充氣閥，并立即關(guān)閉真空泵；

　　3氣壓數(shù)顯為大氣壓時(shí)，打開有機(jī)玻璃罩，取出樣品；

　　4關(guān)閉制冷機(jī)，按住總開關(guān)鍵三秒以上，*后關(guān)閉總電源開關(guān)；

　　5等冷阱中的冰完全化成水后，打開機(jī)箱左側(cè)的出水閥放水，并用干布清潔冷阱內(nèi)壁，蓋上大張濾紙防塵。

　　三、冷凍干燥機(jī)的注意事項(xiàng)

　　1制備樣品應(yīng)盡可能擴(kuò)大其表面積，其中不得含有酸堿物質(zhì)和揮發(fā)性有機(jī)溶劑；

　　2樣品必須完全凍結(jié)成冰，如有殘留液體會(huì)造成氣化噴射；

　　3注意冷阱約為零下65度，可以做低溫冰箱使用，但必須戴保溫手套操作防止凍傷；

　　4啟動(dòng)真空泵以前，檢查出水閥是否擰緊，充氣閥是否關(guān)閉，有機(jī)玻璃罩與橡膠圈的接觸面是否清潔無(wú)污物，良好密封；

　　5一般情況下，該機(jī)不得連續(xù)使用超過48小時(shí)；

　　6冷凍干燥機(jī)樣品在冷凍過程中，溫度逐漸降低，可以將樣品取出回暖一段時(shí)間后(仍處于冰凍狀態(tài))，繼續(xù)干燥，以縮短干燥時(shí)間。

　　以上就是冷凍干燥機(jī)開關(guān)機(jī)及使用時(shí)需要注意的要點(diǎn)，在使用冷凍干燥機(jī)前需要對(duì)其有一定的了解，有利于提高我們自身的工作能力和后期操作水平，也能保證冷凍干燥機(jī)更好地運(yùn)行。

（來(lái)源：青島永合創(chuàng)信電子科技有限公司）

　　熔融指數(shù)分析儀用于測(cè)定各種塑膠、樹脂在粘流狀態(tài)時(shí)熔體流動(dòng)速率MFR值，它既適用于熔融溫度較高的聚碳酸酯、聚芳砜、尼龍等工程塑料，也適用于聚乙烯(PE)、聚苯乙烯（PS）、聚丙烯(PP)、ABS樹脂、聚甲醛（POM）、聚碳酸酯(PC)樹脂等熔融溫度較低的塑料測(cè)試，廣泛地應(yīng)用于塑料生產(chǎn)，塑料制品、石油化工等行業(yè)以及相關(guān)院校、科研單位和商檢部門。

　　熔融指數(shù)分析儀適用于《Designation: D 1238-04 Standard Test Method for Melt Flow Rates of Thermoplastics by Extrusion Plastometer1》標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)規(guī)定的熱塑性塑料熔體質(zhì)量流動(dòng)速率的測(cè)定，本標(biāo)準(zhǔn)等同采用了的規(guī)定，同時(shí)可滿足ISO 1133：1997GB T3682-2000 熱塑性塑料熔體質(zhì)量流動(dòng)速度的測(cè)定測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)。

　　本儀器為臺(tái)式結(jié)構(gòu)、設(shè)計(jì)合理性能穩(wěn)定可靠、外形美觀、操作方便。

　　技術(shù)參數(shù)：

　　1.擠壓出料部分

　　料筒口直徑：9.5504± 0.0076毫米， 符合ASTM D 1238-04 5.2

　　料筒長(zhǎng)度 ：162毫米 符合ASTM D 1238-04 5.2

　　料筒外徑，傳感器開孔，光潔度，硬度 符合ASTM D 1238

　　口?？谥睆剑?.0955 ±0.0051毫米 符合ASTM D 1238-04 5.3

　　口?？陂L(zhǎng)度：8.000 ±0.025毫米 符合ASTM D 1238-04 5.3

　　活塞頭直徑：9.4742±0.0076毫米 符合ASTM D 1238-04 5.4.1

　　活塞頭長(zhǎng)度：6.35± 0.13毫米 符合ASTM D 1238-04 5.4.1

　　2.標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)負(fù)荷（共8級(jí)）

　　3.溫度范圍：室溫-450℃（鑄銅發(fā)熱圈）

　　4.恒溫精度：±0.5℃，

　　5.顯示分辨率：0.1℃

　　6.切料方式：可選手動(dòng)或自動(dòng)切料

　　7.恒溫時(shí)間：可連續(xù)工作

　　8.微型打印機(jī)自動(dòng)打印輸出

　　9.電源電壓：AC220V±10% 50HZ

　　操作步驟：

　　1. 接通電源，開啟電源開關(guān)，綠色電源指示燈亮，設(shè)置測(cè)試溫度，加熱時(shí)紅色指示燈亮。

　　2. 待機(jī)20分鐘，即預(yù)設(shè)溫度穩(wěn)定后方可開始工作。

　　3. 試樣準(zhǔn)備，在天平上稱取4--5g ，試樣以備測(cè)試。

　　4. 加料，當(dāng)溫度穩(wěn)定后即可加料。取出料桿，輕放于耐高溫的物體上，把漏斗插入料筒內(nèi)，邊加料邊振動(dòng)漏斗，使料快速漏下。加料完畢，用壓料桿將料壓實(shí)，以減少氣泡，再插入料桿，放好定位套，套上砝碼托盤（加料操作必須在一分鐘內(nèi)完成）。

　　5. 加料完畢后，預(yù)熱4-6分鐘，加上所需砝碼，準(zhǔn)備切割取樣。

　　6. 當(dāng)料桿下降到下標(biāo)記線時(shí)，開始計(jì)時(shí)切割。下降到上標(biāo)記線時(shí)試驗(yàn)停止。切割取樣應(yīng)在料桿的上下標(biāo)記線之間。

　　7. 每個(gè)樣條切割間隔時(shí)間根據(jù)所測(cè)物體決定，一般每間隔60s或30s切割一次，每個(gè)樣條長(zhǎng)度一般在20mm---50mm左右。

　　8. 樣條取舍稱重、將肉眼可見氣泡的樣條丟棄，將保留的樣條（至少三個(gè)）逐個(gè)稱重，準(zhǔn)確到0.0001g ，求出平均重量。

　　9. 計(jì)算結(jié)果，求出熔融指數(shù)。

　　10. 測(cè)試完畢，用干凈紗布將料桿、料筒、口模趁熱清洗干凈，以備下次測(cè)試。

試驗(yàn)前操作步驟說(shuō)明

3-1  接氣：

   將準(zhǔn)備好的氣源插入鹽霧機(jī)背部調(diào)壓閥，并將壓力調(diào)整至2kg/cm2。詳見2-2氣源準(zhǔn)備。

3-2  加水：

a) 試驗(yàn)室加水：打開電源，注意觀察試驗(yàn)室低水位指示燈（面板上靠左邊的低水位燈），如果指示燈亮起，那么說(shuō)明試驗(yàn)室缺水。

將試驗(yàn)室上蓋打開，直接將準(zhǔn)備好的純凈水倒入箱內(nèi)，直至試驗(yàn)室低水位指示燈熄滅（說(shuō)明試驗(yàn)室水位已加滿），注意加水過程中不要將水灑進(jìn)鹽水預(yù)熱槽（位于噴霧塔下方）。

b) 壓力桶加水：注意觀察壓力桶低水位指示燈（面板上靠右邊

的低水位燈），如果指示燈亮起，那么說(shuō)明試驗(yàn)室缺水。

在鹽霧機(jī)背部有一個(gè)灰色的漏斗狀注水口，如圖所示：

將注水口紅色閥門打開（請(qǐng)注意旋轉(zhuǎn)方向，否則會(huì)被擰斷），

將準(zhǔn)備好的純凈水緩緩加入漏斗里，由于口徑不大，水下流

速度較慢，請(qǐng)緩慢耐心加入。直至壓力桶低水位指示燈熄滅，         

說(shuō)明壓力桶水位已加好。

c) 密封水槽加水：在鹽霧機(jī)箱蓋四周水槽內(nèi)需加適量純凈水，以避免儀器工作時(shí)鹽霧從四周溢漏出來(lái)，

3-3  鹽水調(diào)配及注入：

中性鹽霧試驗(yàn)（CNS）：

a) 建議準(zhǔn)備每瓶500g裝的分析純氯化鈉用于試驗(yàn)溶液的調(diào)配。

b) 用我們贈(zèng)送的5000ML防銹塑料桶量取9500ML純凈水，倒入一個(gè)更大的干凈塑料桶內(nèi)，加入準(zhǔn)備好的500g分析純氯化鈉，攪拌至完全融化，此時(shí)鹽水濃度比為5%。

c) 緩慢倒入“試藥入口”處，如圖所示：

此時(shí)鹽水將逐步流入試驗(yàn)室內(nèi)的鹽水預(yù)熱槽。

d) 其他質(zhì)量的分析純氯化鈉請(qǐng)自行按照5%的濃度比進(jìn)行配置 

3-4  備注

儀器在運(yùn)行過程中，可能會(huì)出現(xiàn)試驗(yàn)室、

壓力桶缺水報(bào)警，提示我們需要及時(shí)的給儀器

進(jìn)行相對(duì)應(yīng)部位的補(bǔ)水工作，在儀器缺水狀態(tài)

下，會(huì)自動(dòng)停止工作，以保護(hù)儀器本身不會(huì)干

燒，正常工作狀態(tài)如右圖所示：

 加水過程中請(qǐng)關(guān)閉“操作”按鈕，加水方法和     

上述完全一致，待各水位完全加好（所有低水位指示

燈熄滅）之后，再打開“操作”按鈕，重新進(jìn)行工作，

由于我們時(shí)間繼電器具有自動(dòng)停電記憶功能，請(qǐng)勿擔(dān)

心前面所做試驗(yàn)時(shí)間被清零。

當(dāng)鹽水缺少時(shí)，我們要打開“試藥入口”的小蓋子進(jìn)

行觀察，如果鹽水缺少，請(qǐng)重新調(diào)配鹽水，并保證工作時(shí)

始終有鹽水保持。

　　本生闡述：elisa操作步驟說(shuō)明及注意事項(xiàng)

　　酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定enzyme linked immunosorbent assay(簡(jiǎn)寫ELISA)，指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。要知道elisa操作步驟首先我們先了解一下elisa的原理是什么。

　　elisa的原理：

　?、偈箍乖蚩贵w結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。

　　②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性， 又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體 上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物， 產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)焰色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測(cè)定方法達(dá)到 很高的敏感度。

　　elisa操作步驟：

　　方法一　用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:

　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌，下同)。

　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

　　3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

　　4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

　　5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越 強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則 410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

　　方法二　用于檢測(cè)未知抗體的間接法：

　　用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日 洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔 中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體

　　以上是elisa操作步驟，那么在elisa操作步驟的操作步驟中需要注意什么呢?下面是elisa實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)：

　　1.正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

　　2.在elisa操作步驟中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括：固相載體的選擇、包被抗體(或抗原)的選擇、酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇、酶的底物及供氫體的選擇

　　elisa試劑盒 本生(天津)健康科技有限公司是一家從事健康科技技術(shù)開發(fā)銷售的公司，本生生物公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)。本生(天津)健康科技有限公司由具有行業(yè)背景和豐富市場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)的業(yè)人士組成，于為生命科學(xué)研究域提供產(chǎn)品，為廣大科研工作者提供服務(wù)。 既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?；a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。