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- 笑傲阿薩德 2016-12-01 00:00:00
- 生物膜 是由脂類(lèi)和蛋白組成的復(fù)雜結(jié)構(gòu) ,是細(xì)胞的天然屏障,許多細(xì)胞信號(hào)事件發(fā)生也發(fā)生于此.大多數(shù)膜 脂含有兩個(gè)非極性的尾(疏水的)連接到一個(gè)極性的頭(親水的),形成脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu),親水的頭部伸入水環(huán)境中,疏水的尾部在脂質(zhì)雙分子層中間. 分離高度純化的天然膜蛋白是研究膜蛋白的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)鍵.所有的膜相關(guān)蛋白中大約有三分之一是完整的膜 蛋白,但由于 大多數(shù)膜蛋白濃度都很低,溶解和純化難度較大.兩性分子的去污劑能夠溶解膜 蛋白,但許多膜蛋白在分離的過(guò)程中容易變性,從而影響膜蛋白的生物和功能活性. 去污劑是兩性分子的,一端是極性基團(tuán),另一端是長(zhǎng)的疏水性的碳鏈.極性基團(tuán)與水分子形成氫鍵,碳鏈則通過(guò)疏水作用聚合.去污劑通過(guò)仿脂質(zhì)雙分子層結(jié) 構(gòu),與蛋白相互作用,非共價(jià)結(jié)合,形成熱動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定的微團(tuán).正常況下位于膜脂質(zhì)雙分子層膜蛋白的疏水區(qū)域此時(shí)被一層去污劑分子包圍,去污劑將其親水部分暴露于水相中,從而使疏水蛋白溶解于溶液中. 去污劑分子在低濃度時(shí)以單體形式存在,當(dāng)濃度增加高于臨界濃度時(shí),去污劑分子彼此集合,形成微團(tuán).臨界微團(tuán)濃度(CMC)是選擇合適的去污劑的重要 依據(jù).去污劑的濃度達(dá)到CMC時(shí),在膜中便開(kāi)始聚集.生物系統(tǒng)的其他因素,如脂類(lèi)、蛋白、PH\離子強(qiáng)度以及介質(zhì)的溫度都可以影響有效的CMC.由于離子 強(qiáng)度可以降低帶電荷的頭部基團(tuán)的排斥,在離子型去污劑中加入鹽,則可以降低CMC,使去污劑低濃度就可以形成微團(tuán). 低濃度條件下,去污劑只能結(jié)合并插入脂質(zhì)雙分子層,當(dāng)濃度增加,去污劑則可以裂解脂質(zhì)分子層,產(chǎn)生脂類(lèi)-蛋白 -去污劑混合微團(tuán).進(jìn)一步增加去污劑的濃度,可以產(chǎn)生去污劑微團(tuán)、脂類(lèi)-去污劑微團(tuán)以及蛋白-去污劑微團(tuán),在蛋白去污劑微團(tuán)中,微團(tuán)的疏水鏈包圍膜 蛋白的疏水區(qū)域.
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