β-內(nèi)酰胺類抗生素分子自身聚合而成的產(chǎn)物，也稱為高分子聚合物（簡(jiǎn)稱高聚物），其可在生產(chǎn)或儲(chǔ)存過(guò)程中產(chǎn)生，甚至也可在藥物的不當(dāng)使用過(guò)程中產(chǎn)生。隨著現(xiàn)代制藥工程在生產(chǎn)工藝方面的不斷改進(jìn)和提高，目前抗生素的產(chǎn)品中外源性雜質(zhì)日趨減少，對(duì)內(nèi)源性雜質(zhì)的控制成為當(dāng)前抗生素高分子雜質(zhì)質(zhì)量控制的ZD。 

本應(yīng)用參考國(guó)標(biāo)GB/T 38093-2019，采用凝膠色譜柱TSKgel G2000SWXL，對(duì)頭孢噻吩、頭孢曲松、頭孢呋辛、頭孢拉定、頭孢哌酮及頭孢唑林這6種β-內(nèi)酰胺類抗生素進(jìn)行分離，經(jīng)紫外檢測(cè)器在254 nm測(cè)定，以色譜峰保留時(shí)間定性，以峰面積進(jìn)行定量。

溶液的配制

① 流動(dòng)相配制：(5 mmol/L 磷酸緩沖鹽，pH=7.0) : ACN=9:1 (v:v)

② 對(duì)照品溶液配制：取頭孢曲松、頭孢噻吩、頭孢拉定、頭孢呋辛少量用 (5 mmol/L 磷酸緩沖鹽pH=7.0) 溶解并稀釋至1 mg/mL，取頭孢哌酮、頭孢唑啉少量用 (5 mmol/L 磷酸緩沖鹽，pH=7.0) : ACN=1:1 (v:v) 溶解并稀釋至1 mg/mL

分析條件

儀器：Thermo Ultimate 3000  

色譜柱：TSKgel G2000SWXL（7.8 mmI.D.×30 cm, 5 μm）

流速：0.8 mL/min

柱溫：25 ℃

樣品盤溫度：10 ℃

進(jìn)樣量：10 μL

檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器@254nm

分析結(jié)果

圖1. 頭孢噻吩分離色譜圖

圖2. 頭孢曲松分離色譜圖

圖3. 頭孢呋辛分離色譜圖

圖4. 頭孢拉定分離色譜圖

圖5. 頭孢哌酮分離色譜圖

圖6. 頭孢唑啉分離色譜圖

標(biāo)準(zhǔn)曲線建立（以頭孢噻吩為例）

結(jié)果與討論:

采用TSKgel G2000SWXL色譜柱參考GB/T 38093-2019，對(duì)頭孢噻吩、頭孢曲松、頭孢呋辛、頭孢拉定、頭孢哌酮及頭孢唑林6種β-內(nèi)酰胺類抗生素進(jìn)行了分離測(cè)試。

結(jié)果表明：6種β-內(nèi)酰胺類抗生素主峰與相關(guān)物質(zhì)峰的分離良好，主峰柱效均大于10000，以頭孢噻吩為例做標(biāo)準(zhǔn)曲線，濃度范圍為0.009~5.14 mg/mL，其線性R2=0.9977 (高于標(biāo)準(zhǔn)中的要求R2＞0.95) , 滿足國(guó)標(biāo)要求。