液相柱后衍生系統(tǒng)在高效液相色譜（HPLC）分析中扮演著關(guān)鍵角色，通過在色譜分離之后進(jìn)行衍生反應(yīng)，顯著提高了目標(biāo)化合物的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性。以下是一些生產(chǎn)柱后衍生系統(tǒng)的公司：

通微公司：該公司提供PCD-3000柱后衍生系統(tǒng)，采用模塊化設(shè)計(jì)的衍生泵和反應(yīng)器，配置靈活，可提供一級(jí)柱后衍生系統(tǒng)和二級(jí)柱后衍生系統(tǒng)供您選擇，滿足不同柱后衍生實(shí)驗(yàn)操作的需求。

大連依利特分析儀器有限公司：該公司也提供多種柱后衍生系統(tǒng)，如P1200型柱后衍生儀等，適用于多種應(yīng)用領(lǐng)域。

Waters Corporation：作為領(lǐng)先的分析儀器制造商，Waters也提供了先進(jìn)的柱后衍生解決方案，以滿足不同領(lǐng)域用戶的需求。

Agilent Technologies：另一家知名的分析儀器制造商，同樣提供高質(zhì)量的柱后衍生系統(tǒng)，廣泛應(yīng)用于制藥、環(huán)保、食品等領(lǐng)域。

Thermo Fisher Scientific：該公司在分析儀器領(lǐng)域擁有深厚的技術(shù)積累，其柱后衍生系統(tǒng)以高性能、高穩(wěn)定性著稱，受到廣大用戶的青睞。

Shimadzu Corporation：日本島津公司也是一家知名的分析儀器制造商，其柱后衍生系統(tǒng)在技術(shù)上不斷創(chuàng)新，為科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)提供了有力支持。

柱后衍生化對(duì)色譜分離的影響

柱后衍生化對(duì)色譜分離本身沒有直接影響，但它可以間接改善色譜分離的效果。具體來說，柱后衍生化通過以下方式影響色譜分離：

提高檢測靈敏度：柱后衍生化可以將原本難以直接檢測的化合物轉(zhuǎn)化為易于檢測的物質(zhì)，從而提高檢測靈敏度。這有助于更準(zhǔn)確地識(shí)別和定量色譜峰，尤其是在復(fù)雜樣品基質(zhì)中。

減少干擾物質(zhì)的影響：通過柱后衍生化，可以選擇性地改變被測物的物理或化學(xué)性質(zhì)，使其與干擾物質(zhì)區(qū)分開來，從而減少干擾物質(zhì)對(duì)檢測結(jié)果的影響。

增強(qiáng)分離效果：在某些情況下，柱后衍生化可以使原本難以分離的化合物產(chǎn)生不同的衍生物，這些衍生物在色譜柱上的保留行為可能有所不同，從而實(shí)現(xiàn)更好的分離效果。但需要注意的是，這種分離效果的改善通常是針對(duì)特定化合物而言的，并非對(duì)所有化合物都適用。

在色譜分析檢測中（GC&HPLC），我們經(jīng)常要使用到衍生化技術(shù)手段來達(dá)到對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的定性定量分析，按照衍生化發(fā)生在色譜分析前后，分為柱前衍生和柱后衍生，今天我們就和小編一起學(xué)習(xí)衍生化目的、原理、分類和應(yīng)用等。

一、衍生化的目的

衍生化包括分析物與衍生化試劑之間發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)，其目的是改變該分析物的理化性質(zhì)，主要有以下幾個(gè)目的：

?提高檢測性能

?改變分析物的分子結(jié)構(gòu)或極性以獲得更出色的色譜分離

?增加揮發(fā)性

?改變基質(zhì)性質(zhì)以實(shí)現(xiàn)更好的分離

?穩(wěn)定分析物

二、常用的衍生化試劑

1.硅烷化試劑

?硅烷基指三甲基硅烷Si(CH₃)₃或稱TMS；

?硅烷化作用是指將硅烷基引入到分子中，一般是取代活性氫；

?活性氫被硅烷基取代后降低了化合物的極性，增強(qiáng)了揮發(fā)性和穩(wěn)定性；

?對(duì)于不揮發(fā)或者200-300℃的穩(wěn)定性，可以使用硅烷化試劑衍生；

?硅烷化試劑容易吸潮失效，因此在使用過程中需要對(duì)樣品和試劑脫水。

2.?；苌噭?/strong>

?酰基化能降低羥基、氨基、巰基的極性，減小色譜峰拖尾，增強(qiáng)揮發(fā)性；

?能增強(qiáng)某些容易氧化的化合物（如：兒茶酚胺）的穩(wěn)定性；

?引入含有鹵離子的?；梢蕴岣唠娮硬东@檢測器（ECD）的靈敏度。

3.紫外衍生試劑

紫外衍生化試劑主要是給一些沒有紫外吸收或者紫外吸收很弱的化合物分子引入強(qiáng)紫外吸收的基團(tuán)，使得目標(biāo)物能被紫外檢測器檢測。

4.熒光衍生化試劑

液相色譜檢測中熒光檢測器的靈敏度要比紫外檢測的靈敏度高出幾個(gè)數(shù)量級(jí)，但是大多數(shù)化合物沒有熒光，通過熒光衍生化試劑將目標(biāo)物上接上能發(fā)出熒光的生色基團(tuán)，以達(dá)到熒光檢測的目的，由于熒光衍生物的激發(fā)波長與發(fā)射波長與衍生化試劑不同，即使衍生化試劑過量或者有副反應(yīng)，也不干擾熒光衍生物的檢測。

5.電化學(xué)衍生化試劑

電化學(xué)檢測器（ECD）是根據(jù)電化學(xué)原理和物質(zhì)的電化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行檢測的，在液相色譜中常用來檢測無紫外和無熒光的，但是有電活性的化合物，其檢測靈敏度高，選擇性強(qiáng)，對(duì)于沒有電活性的化合物，與電化學(xué)衍生試劑反應(yīng)，生成具有電化學(xué)活性的衍生物就可以使用ECD檢測，由于硝基具有電化學(xué)活性，因此常用來作為電化學(xué)衍生試劑，常見電化學(xué)衍生試劑化如下：

三、衍生化在HPLC及GC中的應(yīng)用案例分享

HPLC中的應(yīng)用案例-氨基甲酸酯農(nóng)藥檢測（GB23200.112-2018）

甲奈威和克百威屬于氨基甲酸酯一類的廣譜殺蟲劑，常用于水稻和玉米作物，其本身無熒光，通過高溫堿性條件下，將其水解為甲基胺，再與鄰苯二甲醛(OPA) 和2-巰基乙醇(RSH) 反應(yīng)，生成具有強(qiáng)熒光性的異吲哚衍生物，可用于熒光檢測，檢測級(jí)別可到達(dá)ppt級(jí)別。

GB23200.112-2018中9種氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其代謝物的柱后衍生譜圖

GC中的應(yīng)用案例-氯丙醇及其脂肪酸脂的檢測（GB5009.191-2016）：

?；芙档土u基、氨基、巰基的極性，改善這些化合物的色譜性能（減少峰拖尾），并能提高這些化合物的揮發(fā)性，也能增強(qiáng)某些容易氧化的化合物的穩(wěn)定性，當(dāng)?；瘯r(shí)引入了含有鹵素離子的?；鶗r(shí)，還能提高使用ECD檢測的靈敏度。

GBGB5009.191-2016中，采用七氟丁酰咪唑作為衍生化試劑，在溫和的條件下將羥基鈍化反應(yīng)生成具較好穩(wěn)定性、良好揮發(fā)性和強(qiáng)電負(fù)性的衍生物，并使用GCMS檢測。