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問(wèn)答社區(qū)

細(xì)胞轉(zhuǎn)染后帶cy3紅色熒光,可否用Annexin V 和 PI進(jìn)行流式檢測(cè)

you0mc0imq 2017-03-30 09:27:42 374  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 遙望之后的觸摸 2017-03-31 00:00:00
    可以啊,這個(gè)就是一個(gè)三色流式實(shí)驗(yàn)。你除了實(shí)驗(yàn)樣本以外,另外需要準(zhǔn)備無(wú)任何染色的細(xì)胞,和Cy3, PI加上Annxin V (避免選用和Cy3和PI相近顏色)單染陽(yáng)性的細(xì)胞。才能做流式分析

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我想用流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞的效率,轉(zhuǎn)染細(xì)胞會(huì)發(fā)綠色熒光, 問(wèn)題一、 步驟是不是這樣的: 1.收集細(xì)胞:用胰酶(0.25%)消化轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,加PBS,將細(xì)胞吹打形成單個(gè)細(xì)胞,離心800r,5分鐘 .棄上清。再用PBS重新清洗1次。 2.調(diào)整細(xì)胞密度為1X10*6/ml,上機(jī)檢測(cè)。... 我想用流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞的效率,轉(zhuǎn)染細(xì)胞會(huì)發(fā)綠色熒光, 問(wèn)題一、 步驟是不是這樣的: 1.收集細(xì)胞:用胰酶(0.25%)消化轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,加PBS,將細(xì)胞吹打形成單個(gè)細(xì)胞,離心800r,5分鐘 .棄上清。再用PBS重新清洗1次。 2.調(diào)整細(xì)胞密度為1X10*6/ml,上機(jī)檢測(cè)。以未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞作為陰性對(duì)照。 問(wèn)題二、 是否需要用預(yù)冷的1%多聚甲醛固定? 展開(kāi)
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如題,細(xì)胞轉(zhuǎn)染質(zhì)粒24小時(shí)后能做免疫熒光實(shí)驗(yàn)嗎?我們實(shí)驗(yàn)室一直是48小時(shí)候做,但是由于時(shí)間又沖突,我想提前做了,想問(wèn)下轉(zhuǎn)染24小時(shí)候能不能做,效果會(huì)有影響嗎?謝謝啊
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