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請教流式檢測細胞熒光標記前的處理

噬血霜龍 2017-01-16 09:15:43 509  瀏覽
  •  

參與評論

全部評論(1條)

  • °牽掛 2017-01-17 00:00:00
    首先,你要準備的是單細胞懸液。來源于體液的樣本,比如血液,腦脊液等等,這個好辦。去除紅細胞后就可以直接染色了。 而貼壁培養(yǎng),或者來源于器官(比如,淋巴結(jié)),或者組織(比如腫瘤)的細胞,需要通過機械加上酶消化等方法來分離細胞。所采用的方法要根據(jù)不同樣本各自優(yōu)化。目的就是盡可能產(chǎn)生多的活細胞,同時不破壞細胞表面的蛋白,以免影響抗體的識別。 得到的細胞懸液需要過濾,一般使用40-70微米孔徑的濾網(wǎng),以除去團塊和雜物。染色前再根據(jù)實驗要求進行封閉。所使用的抗體濃度需要經(jīng)過系列稀釋,計算染色指數(shù)(stain index)而得到Z佳工作濃度

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