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  真真切切ii 2017-03-09 00:00:00

  分離蛋白質(zhì)混合物的各種方法主要是根據(jù)蛋白質(zhì)在溶液中的以下性質(zhì)：1）分子大?。?）溶解度；3）電荷；4）吸附性質(zhì)；5）對其它分子的生物學(xué)親和力等進(jìn)行分離.常見的分離提純蛋白質(zhì)的方法有：1、鹽析與有機(jī)溶劑沉淀：在蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽，以破壞蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)，使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀析出，稱為鹽析.常用的中性鹽有：硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等.鹽析時，溶液的pH在蛋白質(zhì)的等電點處效果Z好.凡能與水以任意比例混合的有機(jī)溶劑，如乙醇、甲醇、丙酮等，均可引起蛋白質(zhì)沉淀.2、電泳法：蛋白質(zhì)分子在高于或低于其pI的溶液中帶凈的負(fù)或正電荷，因此在電場中可以移動.電泳遷移率的大小主要取決于蛋白質(zhì)分子所帶電荷量以及分子大小.3、透析法：利用透析袋膜的超濾性質(zhì)，可將大分子物質(zhì)與小分子物質(zhì)分離開.4、層析法：利用混合物中各組分理化性質(zhì)的差異，在相互接觸的兩相（固定相與流動相）之間的分布不同而進(jìn)行分離.主要有離子交換層析，凝膠層析，吸附層析及親和層析等，其中凝膠層析可用于測定蛋白質(zhì)的分子量.5、分子篩：又稱凝膠過濾法，蛋白質(zhì)溶液加于柱之頂部，任其往下滲漏，小分子蛋白質(zhì)進(jìn)入孔內(nèi)，因而在柱中滯留時間較長，大分子蛋白質(zhì)不能進(jìn)入孔內(nèi)而徑直流出，因此不同大小的蛋白質(zhì)得以分離.6、超速離心：利用物質(zhì)密度的不同，經(jīng)超速離心后，分布于不同的液層而分離.超速離心也可用來測定蛋白質(zhì)的分子量，蛋白質(zhì)的分子量與其沉降系數(shù)S成正比.

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