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問答社區(qū)

如何理解樣品制備過程中蛋白質(zhì)分離,提取和純化?

Fo81eg8 2009-12-03 03:58:36 433  瀏覽
  • 蛋白質(zhì)樣品的制備有哪些過程?各個(gè)過程的意義是什么?

參與評(píng)論

全部評(píng)論(2條)

  • 愛陷入你的溫柔 2009-12-04 00:00:00
    一種分子放置在電場(chǎng)中,他就會(huì)以一定的速度移向適當(dāng)?shù)碾姌O。所以呢,根據(jù)蛋白質(zhì)分子的大小、構(gòu)型、形狀、所帶凈電荷,就可以通過電泳將其混合物種不同組分給分離開來。PAGE中因濃度不同會(huì)形成大小不等的孔隙,可以讓不同的分子在電場(chǎng)作用下穿過其中。濃度不同,孔隙大小不同,能穿過的分子也不同,一定時(shí)間的電場(chǎng)作用下穿過的距離也不一樣。 SDS是十二烷基硫酸鈉,其是常用的蛋白質(zhì)的變性劑,可以中和電性,使蛋白質(zhì)的泳動(dòng)速率只取決于分子的大小~

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    評(píng)論

  • 灌水丶澆花 2009-12-04 00:00:00
    蛋白質(zhì)樣品的制備主要包括分離和純化兩大步驟。前者是從生物體中提取出蛋白質(zhì),后者是提純某一種目標(biāo)蛋白。 1 蛋白質(zhì)帶有電荷,是兩性分子,因此能夠在電場(chǎng)中運(yùn)動(dòng),因此能夠電泳。 2 雙向電泳中的diyi向(等電聚焦)利用了蛋白質(zhì)在不同pH值下帶有不同的電荷,從而可以在等電聚焦中停止在蛋白分子不帶電的pH值帶上。而第二項(xiàng)(SDS-PAGE)則是利用不同大小的蛋白質(zhì)在PAGE膠中泳動(dòng)速率不同,即通過蛋白質(zhì)分子量大小來區(qū)分。 3 聚丙烯凝膠電泳的基本原理是蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中,可因?yàn)樽陨泶笮【壒试谀z的孔洞中運(yùn)動(dòng),越大的蛋白受到的阻力越大,因此泳動(dòng)越慢,從而分離蛋白。SDS的作用是變性蛋白,并中和電性,使得蛋白質(zhì)的泳動(dòng)速率只決定于其分子量大小。

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    評(píng)論

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