胎牛血清是許多做細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)的科研機(jī)構(gòu)與院校必不可缺的一項(xiàng)試劑。作為天然來(lái)源的血液制品，其成分是復(fù)雜的，質(zhì)量是可變的。

       所以，胎牛血清在生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行嚴(yán)格的檢測(cè)并出具檢測(cè)報(bào)告書以確保驗(yàn)證其質(zhì)量的相對(duì)穩(wěn)定性。

       作為使用者，你真的讀懂胎牛血清的檢測(cè)報(bào)告了嗎？

外觀觀測(cè)

       采血過(guò)程中的粗暴操作往往會(huì)導(dǎo)致血清中的血紅蛋白含量過(guò)高，產(chǎn)生溶血現(xiàn)象，血清的顏色便會(huì)偏棕紅。

       因此，人眼目測(cè)品質(zhì)優(yōu)良的血清通常會(huì)偏棕黃色或是琥珀黃，澄清透明，輕搖無(wú)沉淀（沉淀通常是污染或者是血清中的變性蛋白）。

微生物檢測(cè)

       細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，對(duì)環(huán)境的要求十分嚴(yán)格。對(duì)于培養(yǎng)所使用的試劑的要求也很高。一般要求無(wú)細(xì)菌、病毒、支原體等微生物的污染。因?yàn)槲⑸锊粌H會(huì)消耗細(xì)胞培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)成分，大量繁殖時(shí)其代謝產(chǎn)物也會(huì)改變細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的酸堿度、成分和滲透壓等，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)鸺?xì)胞染色體畸變，改變細(xì)胞形態(tài)等。

       血清在生產(chǎn)的過(guò)程中會(huì)要求多次精過(guò)濾以除去其中可能存在的微生物污染，也需進(jìn)行嚴(yán)格的檢測(cè)以確認(rèn)血清成品中無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體、病毒等的污染。

       據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，細(xì)菌和真菌采用的是薄膜過(guò)濾法進(jìn)行驗(yàn)證其存在與否。支原體可用PCR法或是培養(yǎng)法進(jìn)行檢測(cè)。依據(jù)9CFR的通則要求，病毒檢測(cè)（牛病毒性腹瀉病毒、牛腺病毒、牛細(xì)小病毒等）采用的是熒光抗體法進(jìn)行檢測(cè)。 

物種鑒定測(cè)試（蛋白電泳測(cè)試）

       為了確保血清中沒(méi)有非牛物質(zhì)的存在，保證產(chǎn)品的完整性，應(yīng)對(duì)牛血清進(jìn)行種間和種內(nèi)鑒定實(shí)驗(yàn)。

       通常情況下，可使用蛋白凝膠電泳來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證。通過(guò)電泳，血清蛋白通常分成多達(dá)六個(gè)部分，即白蛋白、α1、α2、β1、β2 和γ 球蛋白，每一種都有特定的電泳圖譜可以進(jìn)行對(duì)照比對(duì)。

       其它方法包括輻射狀免疫擴(kuò)散法（Radial Immunodiffusion, RID）與歐氏（Ouchterlony）雙擴(kuò)散法等，可以定性或者定量檢測(cè)血清中免疫球蛋白G的含量。

血紅蛋白（Hemoglobin）含量測(cè)試

       血紅蛋白是紅細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸氧的特殊蛋白質(zhì)，是使血液呈紅色的蛋白，由珠蛋白和血紅素組成，其珠蛋白部分是由兩對(duì)不同的珠蛋白鏈（α鏈和β鏈）組成的四聚體。

       紅血球脆弱并容易破裂，會(huì)將血紅蛋白釋放到血清中。粗暴處理所獲得的血液，不良的溫度控制或延遲處理將提高血清中的血紅蛋白含量?？焖?、小心處理得到的血液，通常血紅蛋白的含量較低，其產(chǎn)出的血清品質(zhì)也更佳。

       一般情況下，先進(jìn)的心臟穿刺取血技術(shù)可降低破碎紅細(xì)胞的風(fēng)險(xiǎn)，降低血清中血紅蛋白的含量。通常，血紅蛋白含量使用分光光度法進(jìn)行測(cè)量。

免疫球蛋白檢測(cè)

       對(duì)于胎牛血清而言，由于采血時(shí)牛尚未接觸外界，其血液中通常不含IgM，IgG的含量也較低。對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的干擾和損害小。

       免疫球蛋白通常采用單向免疫擴(kuò)散（Single Radial Immunodiffusion, SRID）法進(jìn)行檢測(cè)。

內(nèi)毒素含量檢測(cè)

       血清中的內(nèi)毒素會(huì)影響超過(guò)三十種以上之生物活性，如：巨噬細(xì)胞的活化、促進(jìn)有絲分裂、誘導(dǎo)干擾素和群落刺激因子等。同時(shí)，內(nèi)毒素也可能會(huì)因?yàn)閱?dòng)補(bǔ)體活性而產(chǎn)生細(xì)胞毒性。

       因而，內(nèi)毒素的含量較低的血清通常品質(zhì)更佳。

       檢測(cè)內(nèi)毒素Z常使用的方法為鱟的變形血球萃取物凝集的半定量凝膠法和定量動(dòng)力顯色法。

滲透壓檢測(cè)

       滲透壓測(cè)試是用來(lái)評(píng)估血清中所含電解質(zhì)的濃度。一些化學(xué)物質(zhì)如鈉、氯、碳酸氫根、鉀、蛋白質(zhì)和葡萄糖等均會(huì)影響血清滲透壓。

       血清的滲透壓一般使用冰點(diǎn)法測(cè)試，每個(gè)樣品的滲透壓以血清中水含量為基準(zhǔn)計(jì)算，單位以mOsmol/kg水表示。

蛋白質(zhì)總含量檢測(cè)

       測(cè)量血清中蛋白質(zhì)總含量可確認(rèn)動(dòng)物的年齡及符合產(chǎn)品的規(guī)格。不同的細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)蛋白質(zhì)含量的要求也不同，可接受的含量應(yīng)該根據(jù)Z終使用者的用途來(lái)評(píng)估。

       一般使用雙縮脲法（Biuret）及考馬氏亮藍(lán)法（Bradford）對(duì)蛋白質(zhì)的含量進(jìn)行測(cè)定。

細(xì)胞生長(zhǎng)測(cè)試

       血液的成分含量復(fù)雜，不同批次之間的差異性也很大，為了檢測(cè)不同批次血清對(duì)特定體外細(xì)胞株生長(zhǎng)的效力，所以要對(duì)每一批次的血清進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試。

       進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試可通過(guò)數(shù)次的傳代培養(yǎng)去監(jiān)測(cè)血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的促進(jìn)作用，同時(shí)也可監(jiān)測(cè)血清對(duì)細(xì)胞的毒性作用或是對(duì)細(xì)胞的形態(tài)影響。