自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀替代手工計(jì)數(shù)能顯著提高計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)的效率，但是在處理復(fù)雜樣本時(shí)總會(huì)遇到一些難題:
單視野取樣可能存在系統(tǒng)誤差
單視野是從局部視野獲取信息，如果樣本中存在分布不均勻的情況，單視野計(jì)數(shù)的結(jié)果可能會(huì)因取樣不均的不同而產(chǎn)生偏差，但可以通過充分混勻樣品和多次上樣計(jì)數(shù)取平均值減少系統(tǒng)誤差的影響。
自動(dòng)聚焦可能存在波動(dòng)
自動(dòng)對(duì)焦依賴算法和軟件控制，當(dāng)視野中的細(xì)胞較少或狀態(tài)較復(fù)雜時(shí)，自動(dòng)對(duì)焦的穩(wěn)定性可能會(huì)受到干擾；如果細(xì)胞樣本的濃度適中且形態(tài)均一性較好，那么自動(dòng)聚焦的計(jì)數(shù)儀也能出色完成計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)。
單熒光激發(fā)光源應(yīng)用局限性
市面上部分熒光計(jì)數(shù)儀采用單熒光激發(fā)光源設(shè)計(jì)，一定程度降低了成本使價(jià)格更友好，但是在處理雙熒光信號(hào)或弱熒光信號(hào)時(shí)就會(huì)出現(xiàn)較大誤差。
對(duì)于實(shí)驗(yàn)人員而言，通常用以下三個(gè)指標(biāo)評(píng)價(jià)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的準(zhǔn)確性
1
對(duì)比細(xì)胞原圖與機(jī)器識(shí)別后的圈選圖，檢查細(xì)胞識(shí)別的精準(zhǔn)度；
2
開展多次重復(fù)計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)，檢查組間CV值（變異系數(shù)）；
3
將計(jì)數(shù)儀與流式儀或人工計(jì)數(shù)結(jié)果對(duì)比；
為了提高細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性，在瑞沃德C200FL智能熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的設(shè)計(jì)過程中，我們聚焦于成像穩(wěn)定性、成像清晰度、算法解析能力這三大關(guān)鍵產(chǎn)品性能，進(jìn)行了深度開發(fā)與升級(jí)。想知道這背后究竟蘊(yùn)含著哪些突破性的核心技術(shù)嗎？答案就在下文，精彩不容錯(cuò)過！
多視野成像減少誤差
為了減少單視野成像造成的系統(tǒng)誤差，C200FL型計(jì)數(shù)儀選擇三視野計(jì)數(shù)，有更大的計(jì)數(shù)面積，總計(jì)數(shù)面積達(dá)到7mm2；三視野分散計(jì)數(shù)減少單點(diǎn)采樣誤差，也能更好地掌握細(xì)胞分布規(guī)律。
CHO細(xì)胞計(jì)數(shù)線性度（R2＞0.999）
293細(xì)胞多次計(jì)數(shù)重復(fù)性（CV＜5%）
固定焦距設(shè)計(jì)提升成像和計(jì)數(shù)穩(wěn)定性
C200FL型計(jì)數(shù)儀采用固定焦距采集圖片，有效減少系統(tǒng)自動(dòng)聚焦波動(dòng)的同時(shí)還能大幅度縮短計(jì)數(shù)時(shí)間，保證多次成像的穩(wěn)定性，進(jìn)一步縮小CV變異系數(shù)。清晰且穩(wěn)定的成像是算法精準(zhǔn)識(shí)別細(xì)胞的良好基礎(chǔ)。
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智能邊緣分辨算法提升細(xì)胞識(shí)別精準(zhǔn)度
除了常規(guī)的直徑、圓度、熒光閾值等參數(shù)外，我們還設(shè)立了細(xì)胞邊界解讀參數(shù)，精準(zhǔn)識(shí)別細(xì)胞邊緣，使聚團(tuán)細(xì)胞識(shí)別更精準(zhǔn)！
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注:黃色圈表示聚團(tuán)
超靈敏熒光檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)用場(chǎng)景更廣泛
瑞沃德計(jì)數(shù)儀系列皆采用獨(dú)立雙熒光通道光路設(shè)計(jì)，C200FL型計(jì)數(shù)儀更是配置了高性能光學(xué)元器件以及背景純化算法，能出色地捕捉微弱熒光信號(hào)并有效排除背景噪聲干擾，得到背景純凈的熒光畫面。我們與流式細(xì)胞儀進(jìn)行了對(duì)比測(cè)試，二者轉(zhuǎn)染率檢測(cè)結(jié)果相差不超過10%。
外周血PBMC細(xì)胞AOPI熒光計(jì)數(shù)
（綠色為AO熒光染色的活細(xì)胞，紅色為PI熒光染色的死細(xì)胞）
實(shí)驗(yàn)名稱 | 孔位序列 | C200FL轉(zhuǎn)染率結(jié)果（%） | 流式儀檢測(cè)結(jié)果（%） |
293-GFP | 1 | 88.86 | 91.29 |
2 | 90.54 | ||
3 | 91.64 | ||
4 | 90.22 | ||
5 | 91.18 | ||
6 | 88.29 | ||
平均值 | 90.12 | ||
與流式偏差結(jié)果 | -1.28% |
實(shí)驗(yàn)名稱 | 孔位序列 | C200FL轉(zhuǎn)染率結(jié)果（%） | 流式儀檢測(cè)結(jié)果（%） |
293-RFP | 1 | 89.52 | 93.99 |
2 | 92.24 | ||
3 | 89.50 | ||
4 | 91.78 | ||
5 | 91.74 | ||
6 | 87.76 | ||
平均值 | 90.42 | ||
與流式偏差結(jié)果 | -3.79% |
瑞沃德C200FL智能熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
憑借多視野成像、高性能的光學(xué)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)和精準(zhǔn)細(xì)胞識(shí)別算法等核心技術(shù)，突破傳統(tǒng)計(jì)數(shù)儀的局限，為實(shí)驗(yàn)人員提供高效、精準(zhǔn)的細(xì)胞計(jì)數(shù)解決方案，滿足行業(yè)對(duì)高精度數(shù)據(jù)的需求。
且其軟件設(shè)計(jì)符合FDA 21CFR PART11要求，滿足企業(yè)用戶對(duì)電子記錄和權(quán)限管理的需求。
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