背景介紹

微囊藻毒素（microcystins，MCs）是水華爆發(fā)時微囊藻屬、魚腥藻屬等藍(lán)藻產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，是淡水中分布最GUANG泛的藍(lán)藻毒素之一，具有毒性強(qiáng)、對人體各器官損害大等特點。近年來，由于工業(yè)及生活污水的排放，導(dǎo)致我國多處湖泊及河流水體富營養(yǎng)化，水華爆發(fā)頻繁，水體環(huán)境均受到不同程度的MCs污染。目前各國已有飲水中的藻毒素含量標(biāo)準(zhǔn)一般都為微囊藻毒素-LR的含量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的飲水中的藻毒素標(biāo)準(zhǔn)為1.0μg/Ｌ，加拿大健康組織規(guī)定飲水中可接受的藻毒素標(biāo)準(zhǔn)為0.5μg/Ｌ（Guidelines for Canadian Drinking Water Quality, 1993），澳大利亞學(xué)者建議1μｇ/Ｌ的含量為安全飲用水的上限。2023年4月1日正式實施的《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB5749-2022）中新增了微囊藻毒素-LR的限值標(biāo)準(zhǔn)，在藻類暴發(fā)情況發(fā)生時，不得超過0.001mg/L。所以，有關(guān)微囊藻毒素的檢測逐漸被人們的重視。我國沿海地區(qū)的海關(guān)單位、海洋研究機(jī)構(gòu)、第三方檢測機(jī)構(gòu)以及水務(wù)公司等都在進(jìn)行微囊藻毒素項目的檢測。

參考標(biāo)準(zhǔn)

飲用水中的微囊藻毒素主要分為免疫學(xué)法與色譜學(xué)法，免疫法主要是快檢試紙條與試劑盒方法，色譜法主要是指LC及LC-MS法，具體可參考國標(biāo)的GB 5009.273-2016、GB5749-2022、GB/T 20466-2006以及海關(guān)的SN/T 4319-2015等標(biāo)準(zhǔn)。

中檢維康推薦檢測方案

中檢維康自主研發(fā)的微囊藻毒素ELISA試劑盒（貨號：CE2148）, 可定量檢測水樣品（飲用水、地表水）以及海水樣品中微囊藻毒素的含量。

檢測原理：本試劑盒采用間接競爭法。酶標(biāo)板微孔中預(yù)包被微囊藻毒素抗原，樣品中殘留的微囊藻毒素與微孔板上的抗原競爭微囊藻毒素抗體，加入酶標(biāo)二抗后，用TMB顯色，吸光值與樣品中微囊藻毒素含量成負(fù)相關(guān)。

試劑盒組成

1)       包被有抗原的96微孔板：1塊（96 孔，12 條×8 孔）

2)       高濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ng/mL：     1 瓶× 1mL     

3)       標(biāo)準(zhǔn)品工作液：0、0.075、 0.225、 0.675、 2.0ng/mL                1 瓶× 1mL

4)       微囊藻毒素抗體：            1 瓶 × 8mL

5)       酶標(biāo)二抗          1 瓶 × 15mL

6)       10× 濃縮洗滌液：          1 瓶 × 50mL

7)       樣本稀釋液：          1 瓶 × 50mL

8)       顯色底物液（TMB）：           1 瓶 ×17mL

9)       終止液：                  1 瓶 × 7mL

10)    試劑盒說明書

11)    質(zhì)檢報告                                  

檢測需要的儀器、試劑    

1 酶標(biāo)儀450nm（iELisa全自動酶標(biāo)儀或相當(dāng)者）

2 離心機(jī)

3 微量移液器20μL～200μL，100μL～1000μL

4 50mL離心管

5 8道微量移液器

6  酶標(biāo)板振蕩器

7  天平：感量0.01g

注意事項

1）  室溫低于20℃或試劑及標(biāo)本未回到室溫（20- 25℃）會導(dǎo)致數(shù)值偏低。

2)       在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥過久的情況，則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3)       標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對光敏感，避免直接暴露在光線下。

4)       混合要均勻，洗板要CHE 底（包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時候都必需充分混合均勻）。

5)       反應(yīng)停止液為強(qiáng)酸性物質(zhì)，避免接觸皮膚。

6)       不要使用過了有效期的試劑盒，也不要稀釋或攙雜使用不同生產(chǎn)廠家的試劑盒這樣會引起靈敏度降低。

 7) 試劑盒的儲存條件是2-8℃，切勿冷凍。
產(chǎn)品特點：
1、樣品無需處理，可直接測定
2、反應(yīng)速度快，樣品處理量大
3、操作簡單、結(jié)果準(zhǔn)確、可靠
4、靈敏度高，準(zhǔn)確度大