單細(xì)胞分選器如何調(diào)試？當(dāng)單個(gè)懸浮顆粒通過噴嘴后在空氣中被激光束照射并對激光進(jìn)行散射，同時(shí)所帶的熒光化合物發(fā)被激發(fā)并發(fā)射出熒光，檢測器同時(shí)對散射光和熒光進(jìn)行分析并對包裹細(xì)胞的液流進(jìn)行充電，通過震蕩液流使目標(biāo)細(xì)胞包含在帶電的液滴中，在通過高壓靜電偏轉(zhuǎn)板時(shí)收集到指定容器中，實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞的分析和分選。 

       單細(xì)胞分選器如何調(diào)試： 

       1、激光

單細(xì)胞分選器采用了固態(tài)激光，激光開啟后應(yīng)預(yù)熱5分鐘使激光穩(wěn)定工作，當(dāng)使用355nm的高功率激光時(shí)，應(yīng)當(dāng)預(yù)熱30分鐘，否則可能因高功率的紫外激光對儀器光學(xué)部件造成損壞。 

2、液流調(diào)整 

打開液流系統(tǒng)，點(diǎn)擊觸屏面板上的“Debubble”進(jìn)行排氣泡，當(dāng)能觀察到穩(wěn)定的液流即可停止。調(diào)整噴嘴的上下、左右、前后千分尺和平衡臺上的2個(gè)旋鈕，使液流垂直對齊。 

3、光路校正

將單細(xì)胞分選器的質(zhì)控（QC）熒光微球用無菌的超純水按1：20進(jìn)行稀釋，上樣微球，調(diào)整樣品壓力差使EPS為100，打開QC面板，調(diào)整激光的上下、左右、前后的千分尺和電壓，使面板上各通道的信號形成Z亮、Z集中的一群，且CV值在2.5以下即可（如圖1）。

4、 液滴調(diào)整

打開液流震蕩開關(guān)，選擇噴嘴直徑，尋找激光位置，調(diào)整振蕩頻率（Frequency）、整幅（Amplitude）。選擇到分選調(diào)整面板，打開靜電偏轉(zhuǎn)板電源并加電壓到3000Volts，調(diào)整Charge Phase到分選液流偏轉(zhuǎn)Z差的角度，然后調(diào)整到以該數(shù)值加減180°的角度，得到穩(wěn)定的四路預(yù)分選液流。MoFlo XDP使用了IntellisortⅡ智能化分選模塊，使用70μm和100μm噴嘴時(shí)可通過計(jì)算機(jī)計(jì)算液滴延遲時(shí)間（Drop Delay）并自動微調(diào)振幅以維持液滴斷點(diǎn) 。

5、分選設(shè)置

上樣并通過在軟件Summit V5.4.0上對細(xì)胞散射和熒光進(jìn)行分析、設(shè)門，設(shè)定分選設(shè)置，選擇分選位置，可Z多同時(shí)對L1、L2、R1、R2四個(gè)位置分選四種特定的細(xì)胞，并適配0.5mL、1.5mL、2mL、5mL、15mL、50mL離心管及標(biāo)準(zhǔn)流式管作為上樣和分選容器。同時(shí)單細(xì)胞分選器還可通過“CyClone”分選設(shè)置，使用玻片和不同規(guī)格的孔板進(jìn)行單種細(xì)胞分選。

6、關(guān)機(jī)

分選完成后，調(diào)整壓力差至5.0PSI，分別先后上樣2mL5%次氯酸鈉、75%乙醇、無菌超純水進(jìn)行管路清洗，關(guān)閉系統(tǒng)和激光，排除鞘液桶氣壓。