下村修(Osamu Shimomura)是一位日本海洋生物學(xué)家,大家比較熟悉的應(yīng)該是他與馬丁·查爾菲(Martin Chalfie)和錢永?。≧oger Tsien)因發(fā)現(xiàn)綠色熒光蛋白(Green Fluorescent Protein, GFP)共同獲得了2008年度的諾貝爾化學(xué)獎。
諾貝爾獎獲獎化學(xué)家兼海洋生物學(xué)家下村修協(xié)助揭示了維多利亞多管發(fā)光水母(Aequorea victoria)體內(nèi)生物發(fā)光現(xiàn)象的本質(zhì)。
下村修
1928年出生于日本京都
在成長過程中,下村修曾在日本的多個地區(qū)以及中國東北居住。1945年,當時16歲的下村修在長崎經(jīng)歷了原子彈爆炸,這次事件對他的人生造成了深遠的影響。
1951年,下村修從長崎醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)專業(yè)畢業(yè),并在名古屋大學(xué)繼續(xù)深造,最終在那里獲得了博士學(xué)位。隨后,他在1960年前往美國,開始在伍茲霍爾海洋生物學(xué)實驗室工作,這是他科學(xué)生涯中的一個重要轉(zhuǎn)折點。正是在這里,他在1962年首次從維多利亞多管發(fā)光水母(Aequorea victoria)中分離出了綠色熒光蛋白。
今天的主角就是
綠色熒光蛋白
(不是)
是下村修另一重要發(fā)現(xiàn)
腔腸素(coelenterazine)
在20世紀70年代中期,有兩支研究團隊獨立地發(fā)現(xiàn)了腔腸素:一支是由喬治亞大學(xué)(位于雅典)的米爾頓·J·寇米耶(Milton J. Cormier)等人領(lǐng)導(dǎo)的團隊,另一支則是由普林斯頓大學(xué)(位于新澤西州)的下村修和弗蘭克·約翰遜(Frank Johnson)組成的團隊。這兩個團隊研究的物種都屬于刺胞動物門(Cnidaria):分別是海腎(Renilla reniformis)和維多利亞多管發(fā)光水母(Aequorea victoria)。
海腎,腎如其名,長得有點像腰子。
海腎熒光素酶(Renilla reniformis)源自海腎,是一種分子量約為36kD的蛋白,在氧氣存在的條件下,可以催化腔腸素(Coelenterazine)氧化成Coelenteramide,反應(yīng)過程無需ATP和鎂離子參與。在Coelenterazine氧化的過程中,會發(fā)出波長為480nm左右的生物螢光(bioluminescence)。
博鷺騰新品腔腸素h是天然腔腸素的去羥基衍生物,是海腎熒光素酶(Rluc)的作用底物,也是水母發(fā)光蛋白的輔因子,其發(fā)光強度比天然腔腸素高10倍以上,適用于報告基因分析。
腔腸素h對 Ca2+ 比它的天然復(fù)合物更敏感,可用于檢測活細胞中鈣離子濃度,基因報告分析,BRET(生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移)研究,ELISA,HTS,以及組織或細胞中ROS水平的化學(xué)發(fā)光檢測。
案例分享
博鷺騰腔腸素h與Y品牌在Rluc純酶條件下的發(fā)光測試比較,在相同Rluc純酶濃度及相同的底物濃度的反應(yīng)體系中, 博鷺騰腔腸素h 的信號總值要比Y品牌的高。
博鷺騰腔腸素h與Y品牌在Gluc酶條件下的發(fā)光測試比較,在相同B16F10-Gluc細胞數(shù)量及相同的底物濃度的反應(yīng)體系中, 博鷺騰腔腸素h 的信號總值要比Y品牌的高。
文
末
彩
蛋
活動一
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