2022 北京冬奧會

虎年大年初四 (2022 年 2 月 4 日)，在歡度新春佳節(jié)之際，我們也將迎來 2022 北京冬奧會。

本屆冬奧會有眾多精彩看點，身形矯健、奮勇拼搏的運動員，激動人心、動人心魄的雪上運動賽項，還有多項頂尖科技將集體亮相，創(chuàng)下歷屆冬奧會第一：第 1 個全 5G 覆蓋的國際重大體育賽事；媒體轉(zhuǎn)播全面上云；“冰絲帶” (國家速滑館) 是目前世界上Z大的采用二氧化碳跨臨界直冷制冰技術(shù)打造的多功能全冰面，碳排放趨近于零；DBS 正式成為冬奧會興奮劑檢測方法……

北京冬奧會興奮劑檢測新亮點：DBS

一直以來，為保證體育賽事的公平公正公開，興奮劑檢測已成為運動員們賽前必不可少的體檢項目。

興奮劑檢測可采用尿檢和血檢。尿檢的取樣需要由專人陪同，涉及 “隱私性”；血檢必須由具備醫(yī)學(xué)資質(zhì)的專業(yè)人士，嚴(yán)格使用取血器材來抽取血樣，且抽血程序需要得到運動員的認(rèn)可和簽字確認(rèn)，強調(diào)專業(yè)性和程序正確性。

自 2019 年某運動員在興奮劑檢測中砸碎血樣瓶引發(fā)國際體壇重大風(fēng)波后，WADA (世界反興奮劑組織) 就計劃引入一種新型的樣本采集方式，力求解決運動員興奮劑檢測的取樣問題，避免同類事件再次發(fā)生。同年 10 月，由 WADA 牽頭發(fā)起，包括中國反興奮劑中心在內(nèi)的世界 7 大國家反興奮劑中心和國際組織共同決定將大力推行 DBS 方法，目標(biāo)在 2022 年北京冬季奧運會和殘奧會上實現(xiàn)使用 DBS 作為常規(guī)方法進行興奮劑檢測。

DBS

DBS (Dried Blood Spot) 的中文是干血斑 / 干血點 (將指血滴在專用卡紙上，干燥后形成的斑點)，可用于微量血液樣本的儲存、運輸和分析檢測。

與傳統(tǒng)的血檢相比，DBS 具有以下獨特的優(yōu)勢：

•  采集方便，可由運動員自行獨立完成。

•  微量采樣，幾滴指血即可。

•  固態(tài)血液樣品安全、穩(wěn)定，運輸和儲存方便。

DBS 在運動員興奮劑檢測中的應(yīng)用，不僅適用于更大規(guī)模、更大覆蓋面的檢查，進而更有力地打擊使用興奮劑的違規(guī)者；還可以更好地保護運動員的隱私，提高運動員對于興奮劑檢測的依從性，尤其是在新冠病毒大流行的背景下，DBS 可以通過更少的人際接觸展開興奮劑的檢查工作。

解決 DBS 分析 “痛點”，CAMAG 領(lǐng)跑反興奮劑檢測

隨著 DBS 方法在興奮劑檢測中的大力推廣應(yīng)用，興奮劑檢測的頻率和覆蓋面將大幅增加。然而，在海量的樣品面前，傳統(tǒng)的 DBS 樣品前處理方法已經(jīng)不再適用，打孔-洗脫-超聲-離心等多步驟，不僅費時耗力，而且難以質(zhì)控，也成為 DBS 分析的重要瓶頸。

鑒于此，瑞士 CAMAG 公司依靠多年來在 DBS 樣品處理領(lǐng)域積累的豐富經(jīng)驗和技術(shù)，推出新一代全自動干血斑樣品處理系統(tǒng)：DBS-MS 500 HCT，可直接萃取 DBS 樣品，無縫偶聯(lián)液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜 LC-MS/MS，實現(xiàn)樣品全自動分析。

DBS-MS 500 HCT

DBS-MS 500 HCT 特性:

• One-Click 全自動樣品制備

• 2 分鐘制備 1 個樣品

• 可連續(xù)制備 2,000 個樣品

• 適用于萃取痕量的內(nèi)源性和外源性物質(zhì)

• 與主流的 LC-MS 和樣品收集器無縫串聯(lián)

目前 DBS-MS 500 HCT 已成功應(yīng)用于自行車運動員的興奮劑檢測。

一直以來，DBS 分析過程中斑點面積還原成全血體積的準(zhǔn)確性是一個 “痛點” 問題。由于每個人的 HCT (血細(xì)胞比容) 不一樣，轉(zhuǎn)換因子會受到 HCT 的影響，因此，測量 HCT 就成為了一個突破口。

由于運動員在運動前后會有大量體液的流失，這會造成 HCT 發(fā)生劇烈的變化，從而降低其 DBS興奮劑檢測的準(zhǔn)確性。新一代全自動干血斑樣品處理系統(tǒng) DBS-MS 500 HCT 裝有 HCT 分析模塊，通過分析每個 DBS 樣品的 HCT 值，可以消除 HCT 對全血體積定量不準(zhǔn)確性的影響，從而大幅提高分析的準(zhǔn)確度，進而大幅提高運動員在 DBS 興奮劑檢測的準(zhǔn)確性。

檢測案例

Tramadol 是一種主要用作鎮(zhèn)痛藥，可緩解普通到嚴(yán)重的疼痛。由于其在競技自行車運動中的濫用，2019 年國際自行車聯(lián)盟已將其列為禁用藥物。針對 Tramadol 及其代謝物 O-desmethyltramadol，CAMAG 開發(fā)了一種方法，能夠?qū)崿F(xiàn) 4 分鐘從樣品到結(jié)果的全自動分析 (圖 1)。研究者對 26 個真實樣品進行傳統(tǒng)血檢和 DBS 檢測，并將兩種方法進行了交叉驗證。結(jié)果顯示，借助 DBS-MS 500 HCT，DBS 檢測和傳統(tǒng)血檢的結(jié)果一致性良好 (圖 2)，證明了 DBS 興奮劑檢測的可行性。

DBS 興奮劑檢測，中國在行動

反興奮劑是一項長期而艱決的工作，需要世界各國的共同合作與努力。中國反興奮劑中心作為 DBS 項目的發(fā)起者之一，全方位參與項目的規(guī)則和方法研究。中國反興奮劑中心主任陳志宇表示，在全面總結(jié)、汲取備戰(zhàn)東京奧運會史上Z嚴(yán)反興奮劑工作成功經(jīng)驗基礎(chǔ)上，中國反興奮劑中心結(jié)合冬季項目備戰(zhàn)的特點，制定了 “更嚴(yán)” 的北京冬奧會反興奮劑工作方案和措施，以 “零容忍” 的態(tài)度全力實現(xiàn)北京冬奧會興奮劑問題 “零出現(xiàn)” 目標(biāo)。

反興奮劑中心與國際同行合作開展的干血點檢測項目將在 2022 年北京冬奧會和冬殘奧會中執(zhí)行。2021 年 6 月，反興奮劑中心發(fā)布 《反興奮劑中心關(guān)于開展干血點興奮劑檢查的通知》，并正式啟動 DBS 興奮劑檢查檢測工作。截至 2021 年 10 月底，北京冬奧會備戰(zhàn)興奮劑檢查總例數(shù)已突破 4000 例，到運動員進村，還將實施超過 2000 例檢查。

參考文獻：

1. 一起向未來！多項頂尖科技亮相北京冬奧會，光明網(wǎng)，2022 年 1 月 17 日.

2. WADA leads exciting collaboration on dried-blood-spot testing, WADA RELEASES, 03 OCT 2019.

3. Updates on Anti-doping and TUE Management in Paralympic Sport, International Paralympic Committee.

4. Luginbühl M, Angelova S, Gaugler S,L?ngin A, Weinmann W. Automated high-throughput analysis of tramadol and O-desmethyltramadol in dried blood spots. Drug Testing and Analysis. 2020.doi:10.1002/dta.2819.

5. Luginbühl M, Fischer Y, Gaugler S. Fully Automated Optical Hematocrit Measurement from Dried Blood Spots, Journal of Analytical Toxicology. 2020. doi:10.1093/jat/bkaa189.

6. Luginbühl M, Gaugler S. Dried blood spots for anti-doping: Why just going volumetric may not be sufficient. Drug Testing and Analysis. 2021; 13: 69–73. doi:10.1002/dta.2977.

7. 北京冬奧會將全面開展干血點興奮劑檢查，人民網(wǎng)，2021 年 6 月 16 日.

8. 實驗室認(rèn)可助力我國反興奮劑工作走向標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化，中國質(zhì)量報，2021 年 7 月 16 日.

9. 北京冬奧會反興奮劑備戰(zhàn)沖刺，新華網(wǎng)，2021 年 10 月 27 日.

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