為什么檢測細胞狀態(tài)?
細胞狀態(tài)是直接反應細胞生理狀態(tài)的重要指標,我們可以通過確定測試分子是否對細胞增殖有影響或具有直接的細胞毒性效應來進行化合物篩選。所以評估細胞狀態(tài)是日常細胞操作中的一個關鍵步驟,也是后續(xù)處理的一個要求。
常見的細胞檢測有哪些?
? 細胞計數
? 細胞活力
? 細胞增殖
? 細胞凋亡
? 細胞死亡

常見的檢測細胞狀態(tài)的儀器有哪些?
? 細胞計數儀
? 流式細胞儀
? 成像(顯微鏡、高內涵等)
? 分光光度計
? 酶標儀
用于細胞活力檢測的多功能酶標儀
吸收光(MTT)
MTT(四氮唑藍)是一種適合于高通量篩選96孔的細胞活力測定法。它是利用活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶對MTT進行還原,形成不溶于水的紫色結晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞質中,Zui后使用特定的有機溶劑,如二甲基亞砜(DMSO)等溶解后,在570nm處進行吸收光的檢測,檢測的吸光度值越高,說明細胞中線粒體的代謝活力越強。

熒光(刃天青Resazurin)
活細胞會在細胞質中維持還原環(huán)境,刃天青(Resazurin)染料是一種氧化還原指示劑,當它被活細胞還原為試魯靈(Resorufin)后,可被579nm的激發(fā)光激發(fā),而產生584nm的發(fā)射熒光,熒光信號的強度與活細胞的數量呈正比,從而來判斷細胞的活力。

化學發(fā)光(Luciferase)
活細胞中可以產生大量的ATP,因此可以通過對ATP進行定量測定來檢測培養(yǎng)物中活細胞的數目,細胞裂解和產生的發(fā)光信號與存在的ATP量成正比,而ATP量直接與培養(yǎng)物中的活細胞數量成正比。

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圖片/部分來源于網絡視覺中國
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