小鼠凋亡因子BAX(BAX)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)

   BS-9178  小鼠凋亡因子BAX(BAX)ELISA試劑盒

   一、產(chǎn)品概述

   本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）定量檢測(cè)小鼠樣本中Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）的濃度。BAX是調(diào)控細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵蛋白，其表達(dá)水平與腫瘤、神經(jīng)退行性疾病等病理過(guò)程密切相關(guān)。

   二、實(shí)驗(yàn)原理

   捕獲抗體包被?：抗小鼠BAX單克隆抗體預(yù)包被于微孔板。

   樣本孵育?：樣本中的BAX與捕獲抗體結(jié)合。

   檢測(cè)抗體反應(yīng)?：辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體與BAX結(jié)合形成夾心復(fù)合物。

   顯色反應(yīng)?：加入TMB底物顯色，顏色深淺與BAX濃度成正比。

   三、試劑盒組成

   組分規(guī)格保存條件

   預(yù)包被微孔板96孔/48孔2-8℃密封冷藏

   BAX標(biāo)準(zhǔn)品6管2-8℃冷藏

   HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體6mL2-8℃避光冷藏

   顯色劑A（TMB）6mL2-8℃避光保存

   顯色劑B（終止液）6mL2-8℃冷藏

   濃縮洗滌液20mL2-8℃（需稀釋）

   四、樣本要求

   樣本類(lèi)型?：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿。

   處理建議?：

   細(xì)胞樣本：離心后取上清，避免反復(fù)凍融。

   組織樣本：按1:9（w/v）加入PBS勻漿后離心取上清。

   保存?：短期（≤7天）2-8℃保存，長(zhǎng)期需-80℃凍存。

   五、實(shí)驗(yàn)步驟

   1.試劑準(zhǔn)備

   洗滌液：濃縮液用蒸餾水按1:19稀釋。

   標(biāo)準(zhǔn)品梯度：用樣本稀釋液配制0-1000pg/mL系列濃度。

   2.操作流程

   每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本，37℃孵育90分鐘。

   棄去液體，拍干，每孔加滿洗滌液洗滌3次。

   每孔加入100μLHRP標(biāo)記抗體，37℃孵育60分鐘。

   重復(fù)洗滌步驟。

   每孔加入90μLTMB顯色液，避光室溫孵育15分鐘。

   每孔加入50μL終止液，立即測(cè)定OD值。

   六、數(shù)據(jù)分析

   標(biāo)準(zhǔn)曲線?：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制四參數(shù)擬合曲線。

   樣本計(jì)算?：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算樣本濃度，建議稀釋后復(fù)測(cè)。

   七、注意事項(xiàng)

   避免使用溶血或脂血樣本。

   洗滌需徹底，殘留液體影響精度。

   顯色液需避光保存，變藍(lán)后不可使用。

   不同批號(hào)試劑不可混用。

   八、性能參數(shù)

   靈敏度：≤5pg/mL

   檢測(cè)范圍：15-1000pg/mL

   重復(fù)性：CV<10%

   特異性：不與小鼠BCL-2、BCL-XL交叉反應(yīng)。

   九、常見(jiàn)問(wèn)題解答

   Q1：標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳？?

   A：檢查稀釋步驟，確保標(biāo)準(zhǔn)品充分混勻。

   Q2：OD值偏低？?

   A：確認(rèn)孵育時(shí)間，避免洗滌過(guò)度。

   注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。

   小鼠凋亡因子BAX(BAX)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)，本生，您信任的合作伙伴！本生試劑盒