2022年的春節(jié)已接近尾聲，科研的小伙伴已經(jīng)開(kāi)始忙碌起來(lái)了，對(duì)于新學(xué)期是不是也有新的計(jì)劃，發(fā)一篇sci的文章順利畢業(yè)，脫單flag，頭發(fā)多一點(diǎn)點(diǎn)，細(xì)胞養(yǎng)好，科研項(xiàng)目進(jìn)展順利，老師能給買(mǎi)臺(tái)心儀已久的顯微鏡；你想知道選擇什么種類(lèi)的顯微鏡，正置還是倒置，寬場(chǎng)顯微鏡、超高分辨率顯微鏡、激光共焦顯微鏡等等，小本本備好，我們開(kāi)始了。

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不同成像原理，不同分辨率的顯微鏡如何選擇

顯微鏡作為生命科學(xué)領(lǐng)域研究的必須工具，其結(jié)構(gòu)復(fù)雜，配置繁多，根據(jù)不同的配置和結(jié)構(gòu)，相應(yīng)的價(jià)格有很大的差異。那很多用戶(hù)在實(shí)際采購(gòu)過(guò)程中，看到長(zhǎng)串的配置不知如何去選擇，怎么用合理的價(jià)格去買(mǎi)到一個(gè)完全能夠滿(mǎn)足自己實(shí)驗(yàn)需求的顯微鏡呢？從今天這期推文開(kāi)始，將會(huì)著重介紹選擇顯微鏡的幾個(gè)關(guān)鍵核心問(wèn)題，目的是讓用戶(hù)能夠在自己的預(yù)算范圍內(nèi)選擇出符合自己實(shí)驗(yàn)需求的顯微鏡。

首先要知道顯微鏡從開(kāi)始誕生發(fā)展到現(xiàn)在，主要通過(guò)分辨率來(lái)劃分，分為寬場(chǎng)顯微鏡、超高分辨率顯微鏡、激光共焦顯微鏡以及電鏡。這一系列顯微鏡的分辨率從光鏡的200納米到超高與共聚焦的100多到幾十納米再到電鏡的0.2納米。

并不是說(shuō)顯微鏡的分辨率越高，就越適合我們的研究。分辨率越高，意味著其價(jià)格和操作的難度系數(shù)是逐級(jí)增長(zhǎng)的。那我們?nèi)绾稳ミx擇一個(gè)適合我們的顯微鏡呢？要根據(jù)老師和用戶(hù)自己樣品的大小去選擇。

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不同機(jī)型的選擇

我們?cè)诟鶕?jù)樣品的大小和觀察的實(shí)驗(yàn)需求，確定了某一類(lèi)型的顯微鏡之后。我們需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)樣品去選擇相對(duì)應(yīng)的合適機(jī)型。顯微鏡的主要機(jī)型，根據(jù)其光路設(shè)計(jì)的不同，主要分為體視顯微鏡、正置顯微鏡和倒置顯微鏡。

體視顯微鏡：體視顯微鏡，是一種具有正像立體感的顯微鏡，被廣泛應(yīng)用于材料宏觀表面觀察、失效分析、斷口分析等工業(yè)領(lǐng)域。以及生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)林、工業(yè)及海洋生物各部門(mén)。因?yàn)轶w視顯微鏡的光路設(shè)計(jì)，符合人體眼睛夾角的偏角，所以通過(guò)體視顯微鏡觀察物體時(shí)，類(lèi)似于我們眼睛的成像光路，這樣會(huì)讓我們看到立體的圖像呈現(xiàn)。正是由于此設(shè)計(jì)，體視顯微鏡的分辨率要遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)的正置或倒置顯微鏡。體視顯微鏡更多的是觀察小物體的宏觀表象，而不是更為精細(xì)的細(xì)節(jié)。

正置顯微鏡：正置顯微鏡更多的是要配合玻片來(lái)對(duì)樣品實(shí)現(xiàn)顯微觀察。如何來(lái)定義正置顯微鏡呢？顯微鏡物鏡朝下，觀察的樣品在物鏡的下方，這樣的顯微鏡我們稱(chēng)之為正置顯微鏡。一般適用于的觀察樣品為：透明樣品、薄的樣片、生物切片、涂片等。

但由于正置顯微鏡的機(jī)械設(shè)計(jì)，樣品位于載物臺(tái)與物鏡中間。低倍物鏡齊焦時(shí)，與載物臺(tái)之間的距離大約為三厘米左右。像無(wú)法切割的厚樣品，類(lèi)似礦石、零件或者是在孔板、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的細(xì)胞，就無(wú)法在正置顯微鏡下進(jìn)行觀察，那由此人們?cè)O(shè)計(jì)了倒置顯微鏡。

倒置顯微鏡：顧名思義，倒置顯微鏡與正置顯微鏡正好相反，那么定義也是相反的，物鏡朝上，要觀察的樣品在物鏡的上方，此類(lèi)顯微鏡我們稱(chēng)之為倒置顯微鏡。我們可以看到倒置顯微鏡，物鏡和載物臺(tái)之間不再放觀察的樣品，樣品是放于載物臺(tái)的上面，所以樣品的厚度就不會(huì)受到載物臺(tái)與物鏡之間距離的限制。因此倒置顯微鏡主要用于微生物、細(xì)胞、細(xì)菌、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察。

介紹了三種不同形式的顯微鏡，相信我們的老師和用戶(hù)對(duì)自己的樣品適用于什么類(lèi)型的顯微鏡已經(jīng)有了一個(gè)大體的判斷。當(dāng)我們更多的去觀察樣品的立體結(jié)構(gòu)，對(duì)細(xì)節(jié)和分辨率沒(méi)有更高追求的時(shí)候，我們通常會(huì)選擇體視顯微鏡。當(dāng)我們的樣品無(wú)法制成玻片或者不能放在玻片上時(shí)，我們就去選擇倒置顯微鏡。如果能制成玻片就選擇正置。為什么說(shuō)能制成玻片就去選擇正置呢？因?yàn)閷?duì)于倒置顯微鏡來(lái)說(shuō)，正置顯微鏡的高倍數(shù)觀察更方便，比如60X和100X的油鏡。同時(shí)，因?yàn)樗墓饴芬鹊怪酶?，搭配高分辨率聚光器后分辨率更高，?duì)比度更好。

通過(guò)我們這期推文的介紹，老師對(duì)于選擇哪種分辨率水平的顯微鏡，以及什么類(lèi)型的顯微鏡會(huì)有一個(gè)較為清楚的了解。這些只是我們采購(gòu)或選擇顯微鏡的第一步，就是我們確定顯微鏡的類(lèi)型。針對(duì)不同的觀察樣品，又會(huì)有其更為適應(yīng)的觀察方式，又有不同的光源，不同品質(zhì)的物鏡，供我們?nèi)ミx擇。欲知后事如何，且聽(tīng)下回分解。

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ECHO 顯微鏡可以申請(qǐng)?jiān)囉门叮?/b>

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