一杯優(yōu)質(zhì)白酒的風(fēng)味形成,與高溫大曲中微生物的代謝活動(dòng)密切相關(guān)—— 微生物的活性強(qiáng)弱、代謝路徑差異,直接調(diào)控酒醅糖化發(fā)酵效率與最終酒體的風(fēng)味物質(zhì)合成。然而,傳統(tǒng)檢測(cè)手段受限于“群體分析”模式,無(wú)法區(qū)分單個(gè)微生物的代謝狀態(tài);平板計(jì)數(shù)、熒光染色等損傷性檢測(cè)方法,還會(huì)破壞細(xì)胞原有生理活性,難以真實(shí)反映微生物在大曲環(huán)境中的代謝特征,長(zhǎng)期制約著白酒釀造質(zhì)量的精準(zhǔn)把控。
如今,單細(xì)胞拉曼光譜技術(shù)與氘標(biāo)記探測(cè)法的結(jié)合,成功打破了這一技術(shù)瓶頸:該方法無(wú)需化學(xué)標(biāo)記、不破壞細(xì)胞完整性,可在原位無(wú)損狀態(tài)下捕獲單個(gè)微生物的拉曼特征光譜,通過(guò)分析與代謝相關(guān)的拉曼特征峰變化,實(shí)現(xiàn)微生物代謝活性的精準(zhǔn)量化;而長(zhǎng)光辰英P300 共聚焦拉曼光譜儀作為核心支撐儀器,憑借高靈敏度與高穩(wěn)定性,即便在高溫大曲等復(fù)雜基質(zhì)的環(huán)境中,也能精準(zhǔn)捕獲微生物的微弱代謝信號(hào),為檢測(cè)方案的落地提供了關(guān)鍵保障。
原文鏈接:
https://doi.org/10.1021/acs.analchem.5c03199
圖1:高溫大曲微生物代謝活性研究實(shí)驗(yàn)流程示意圖
相較于傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù),單細(xì)胞拉曼光譜技術(shù)在微生物代謝研究中展現(xiàn)出顯著優(yōu)勢(shì),而P300 通過(guò)技術(shù)優(yōu)化,進(jìn)一步放大了這一優(yōu)勢(shì),為白酒釀造研究提供可靠工具:
1. 高靈敏度信號(hào)采集,捕捉單細(xì)胞級(jí)代謝差異
2. 高穩(wěn)定性數(shù)據(jù)輸出,保障研究結(jié)果可重復(fù)
3. 自動(dòng)化單細(xì)胞分析,提升研究效率
在四川瀘州某醬香型白酒廠18 個(gè)不同發(fā)酵批次的高溫大曲研究中,基于 P300 的檢測(cè)方案成效顯著:確定48h為D2O最優(yōu)孵育時(shí)間,可通過(guò)C/D比精準(zhǔn)量化微生物代謝活性;將 18 個(gè)樣品清晰分為高(PA)、中(PB)、低(PC)三類代謝模式;篩選出 22 個(gè)涵蓋蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等關(guān)鍵組分的代謝關(guān)聯(lián)拉曼特征峰,且低活性樣品特征峰強(qiáng)度顯著更低;同時(shí)證實(shí) C/D 比、特征峰強(qiáng)度與大曲總酸度、液化酶/糖化酶活性等理化指標(biāo)顯著相關(guān),為工藝優(yōu)化提供直接數(shù)據(jù)支撐。
這些成果的取得,離不開(kāi)P300 在復(fù)雜基質(zhì)中精準(zhǔn)捕獲信號(hào)、保障數(shù)據(jù)穩(wěn)定的核心能力,充分印證了其在微生物代謝研究中的實(shí)用價(jià)值。
圖2:18個(gè)高溫大曲樣品的微生物活性評(píng)估。
A:基于C/D比的分類結(jié)果,不同顏色代表不同代謝活性;B:?jiǎn)渭?xì)胞拉曼光譜的LDA分析,不同符號(hào)代表不同代謝模式
圖3:不同代謝活性高溫大曲的拉曼特征峰PLS分析結(jié)果。
A:采用PLS模型區(qū)分不同代謝活性高溫大曲微生物拉曼光譜圖譜的載荷圖,縱軸VIP值表示對(duì)應(yīng)光譜峰對(duì)PLS模型的貢獻(xiàn)度;B:不同代謝活性高溫大曲的拉曼峰強(qiáng)度定量對(duì)比
作為單細(xì)胞拉曼光譜技術(shù)的成熟應(yīng)用載體,長(zhǎng)光辰英以P300為主的拉曼平臺(tái)技術(shù)優(yōu)勢(shì)不僅局限于白酒釀造領(lǐng)域,在多學(xué)科研究中均能發(fā)揮作用:
多領(lǐng)域應(yīng)用
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單細(xì)胞拉曼光譜技術(shù)為微生物研究提供了全新視角,而P300 通過(guò)對(duì)儀器性能的優(yōu)化與檢測(cè)流程的整合,將復(fù)雜的技術(shù)原理轉(zhuǎn)化為可直接應(yīng)用的研究工具 —— 既滿足科研人員對(duì)單細(xì)胞水平研究的深度需求,又能為產(chǎn)業(yè)端提供工藝優(yōu)化的量化依據(jù),推動(dòng) “實(shí)驗(yàn)室研究成果” 向 “產(chǎn)業(yè)實(shí)際應(yīng)用” 快速轉(zhuǎn)化。
若您希望探索單細(xì)胞拉曼光譜技術(shù)在更多領(lǐng)域的應(yīng)用,或需要針對(duì)特定樣本設(shè)計(jì)檢測(cè)方案,歡迎聯(lián)系長(zhǎng)光辰英,獲取P300 的詳細(xì)技術(shù)參數(shù)與應(yīng)用案例。
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