胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)渾濁及白色絮狀物質(zhì)，并且在充分搖晃混勻后也還存在，無需太過于擔(dān)心，這屬于正常現(xiàn)象。

常見的幾種胎牛血清的沉淀：

1、纖維蛋白：血纖維蛋白是參與凝血過程的蛋白之一，血清中可能殘留少量血纖維蛋白，其在解凍后也可能形成肉眼可觀察到的、較大的達(dá)到1-2mm的沉淀物。越差的血清，沉淀越多，但好的血清在2-8℃條件下放1-2個月后也會出現(xiàn)少量的沉淀。

2、磷酸鈣：常見的一種沉淀物，會造成胎牛血清渾濁，并且在37℃培養(yǎng)的時候會增加。

3、脂蛋白：脂蛋白在血清中可能因各種原因發(fā)生變性，從而形成沉淀。

4、血清融解時，由于冰塊和蛋白融化的速度不一樣，因此局部可能因蛋白濃度過高而產(chǎn)生沉淀。

上面介紹的幾種常見的胎牛血清沉淀并不是污染。

如何判斷胎牛血清是否被污染呢？比較有效的方法是通過將胎牛血清接種在細(xì)菌培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，觀察是否存在細(xì)菌增殖，并且進(jìn)行革蘭氏染色，用油鏡觀察直接判斷是否為微生物污染。

胎牛血清沉淀的多少與胎牛血清質(zhì)量不成正比。如有胎牛血清沉淀產(chǎn)生，不用特意去除，可以將胎牛血清放置一會，通過分裝血清時，去掉最后少量的血清即可。若有少許沉淀進(jìn)入，不會影響實(shí)驗(yàn)，但可能會影響視野/細(xì)胞接觸抑制。如要完全去除沉淀物，可以在400-500g離心力下離心3min，去除大顆粒沉淀，取上清液使用即可。

胎牛血清出現(xiàn)沉淀是胎牛血清的正常特性，各類胎牛血清均有沉淀的出現(xiàn)，根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)測試經(jīng)驗(yàn)，胎牛血清沉淀的多少與胎牛血清的使用效果沒有必然關(guān)系。

1、生產(chǎn)工藝

 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中加入胎牛血清出現(xiàn)了小黑點(diǎn)，并且隨著培養(yǎng)過程小黑點(diǎn)越來越多，這與胎牛血清的生產(chǎn)工藝有很大關(guān)系。

目前胎牛血清的生產(chǎn)主要有兩種工藝：

① 自然凝聚生產(chǎn)獲得血清，該生產(chǎn)控制要求嚴(yán)格，自然凝集的胎牛血幾乎不會出現(xiàn)小黑點(diǎn)。

② 離心生產(chǎn)血清，該工藝可能會導(dǎo)致小黑點(diǎn)的產(chǎn)生。

2、細(xì)胞老化

在細(xì)胞的表面出現(xiàn)小黑點(diǎn)，表明細(xì)胞老化，在細(xì)胞間隙間出現(xiàn)的小黑點(diǎn)，說明細(xì)胞營養(yǎng)不足導(dǎo)致細(xì)胞碎片化，需要更換細(xì)胞或者更換等級更高的血清。

3、實(shí)驗(yàn)污染

細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的小黑點(diǎn)也有可能是因?yàn)槌霈F(xiàn)了污染。當(dāng)有小黑點(diǎn)形成后判斷是細(xì)胞污染還是細(xì)胞碎片，首先通過在鏡下觀察小黑點(diǎn)運(yùn)動狀態(tài)，很多會動的小黑點(diǎn)只是發(fā)生布朗運(yùn)動的細(xì)胞碎片，而細(xì)菌在運(yùn)動上則較為活躍和浮躁。然后判斷培養(yǎng)基的渾濁程度，如果細(xì)胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。

1、2℃~8℃解凍；

2、解凍的過程中間斷搖勻（隔一段時間輕柔搖勻）；

3、室溫或者水浴溶解均易造成沉淀增多。

1、非必須不用熱滅活（熱滅活會使血清中部分蛋白質(zhì)變性析出，影響血清品質(zhì)）；

2、不宜37℃預(yù)熱，血清和完全培養(yǎng)基通常室溫預(yù)熱即可；

3、避免反復(fù)凍融；

4、避免紫外線照射；

5、避免2-8℃長期保存，分裝后-20℃長期保存，按需溶解。

1、高度純凈：血清經(jīng)過多重過濾和凈化，以確保其純凈度，適合各種細(xì)胞培養(yǎng)。

2、營養(yǎng)成分豐富：血清含有豐富的氨基酸、維生素和微量元素，能夠滿足細(xì)胞生長的各種需求。

3、良好的細(xì)胞適應(yīng)性：血清已經(jīng)被證明能夠支持多種細(xì)胞的生長和分化，具有良好的適應(yīng)性。

4、嚴(yán)格的質(zhì)量控制：遵循嚴(yán)格的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，確保每一批次的血清都符合最高的。

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