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檢驗(yàn)生化分析儀常用分析方法(終點(diǎn)法、固定時(shí)間法和動(dòng)力學(xué)法)

來(lái)源:北京普朗新技術(shù)有限公司 更新時(shí)間:2022-09-21 15:30:22 閱讀量:1640

檢驗(yàn)生化分析儀是用于臨床及專業(yè)的化學(xué)檢測(cè),它通過(guò)對(duì)血液、尿液、腦脊液等的分析來(lái)測(cè)定各種生化指標(biāo),并結(jié)合其它臨床資料,進(jìn)行綜合分析,可以幫助診斷疾病,對(duì)器官功能做出評(píng)價(jià),鑒別并發(fā)因子,為疾病的治 療提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

檢驗(yàn)生化分析儀

檢驗(yàn)生化分析儀常用分析方法共有三大類,分別為終點(diǎn)法、固定時(shí)間法和動(dòng)力學(xué)法。

終點(diǎn)法: 

指經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的反應(yīng),反應(yīng)達(dá)到平衡,由于反應(yīng)的平衡常數(shù)很大,可認(rèn)為全部底物(被測(cè)物)轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物,反應(yīng)液的吸光度不再變化,只與被測(cè)物的濃度有關(guān)。這類方法通常稱為“終點(diǎn)”法,更確切地說(shuō)應(yīng)稱“平衡”法。

單試劑單波長(zhǎng)終點(diǎn)法:t1時(shí)刻加入試劑(體積為V),t2刻加入樣本(體積為S),然后攪拌并反應(yīng),之后開始測(cè)量反應(yīng)液的吸光度,在t3時(shí)刻反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn),t3-t2為測(cè)定時(shí)間。

反應(yīng)度:R=At3-At2-1×V/(V+S),或R=At3-ARBLK。

其中:Ati為i時(shí)刻的吸光度,ARBLK為試劑空白吸光度。

單試劑雙波長(zhǎng)終點(diǎn)法:基本上同“單試劑單波長(zhǎng)終點(diǎn)法”,只是對(duì)于每一個(gè)測(cè)定周期,其實(shí)際吸光度等于Aλ1-Aλ2。

雙試劑單波長(zhǎng)終點(diǎn)法:t1時(shí)刻加入第1試劑(體積為V1),t2時(shí)刻加入樣本(體積為S)之后立即攪拌,t3時(shí)刻加入第二試劑(體積為V2) 并立即攪拌,t4時(shí)刻反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)。t3-t2為孵育時(shí)間,t4-t3為測(cè)定時(shí)間。

在項(xiàng)目參數(shù)中,如果反應(yīng)起始時(shí)間設(shè)為0,則反應(yīng)度R=A時(shí)刻吸光度-雙試劑空白吸光度。如果反應(yīng)起始時(shí)間小于0,則反應(yīng)度R=At4  -雙試劑空白吸光度-t3到t2間設(shè)定點(diǎn)的吸光度×(V1+S)/(V1+S+V2)。雙試劑雙波長(zhǎng)終點(diǎn)法:  基本上同“雙試劑單波長(zhǎng)終點(diǎn)法”,只是對(duì)于每一個(gè)測(cè)定周期,其實(shí)際吸光度等于Aλ1-Aλ2。

固定時(shí)間法:

又稱為一級(jí)動(dòng)力學(xué)法、二點(diǎn)動(dòng)力學(xué)法等,指在一定的反應(yīng)時(shí)間內(nèi),反應(yīng)速度與底物濃度的一次方成正比,即v=k[S]。由于底物在不斷的消耗,因此整個(gè)反應(yīng)速度在不斷的減小,表現(xiàn)為吸光度的變化越來(lái)越小。這類反應(yīng)達(dá)到平衡的時(shí)間很長(zhǎng),理論上可以在任意時(shí)間段進(jìn)行監(jiān)測(cè),但由于血清成份復(fù)雜,反應(yīng)剛啟動(dòng)時(shí)反應(yīng)較復(fù)雜,雜反應(yīng)較多,必需經(jīng)過(guò)一段延遲時(shí)間才能進(jìn)入穩(wěn)定反應(yīng)期。

t1時(shí)刻加入試劑(體積為V),之后測(cè)量試劑空白的吸光度,t2時(shí)刻加入樣本(體積為S),t3時(shí)刻反應(yīng)穩(wěn)定,t4時(shí)刻停止對(duì)反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測(cè);t2-t3為延遲時(shí)間,t3-t4為測(cè)定時(shí)間。
單波長(zhǎng)反應(yīng)度(單雙試劑相同):R=At4—At3

雙波長(zhǎng)反應(yīng)度:R=(t4時(shí)刻主波長(zhǎng)吸光度-t4時(shí)刻次波長(zhǎng)吸光度)--(t3時(shí)刻主波長(zhǎng)吸光度-t3時(shí)刻次波長(zhǎng)吸光度)

動(dòng)力學(xué)法:

又稱零級(jí)動(dòng)力學(xué)法,指反應(yīng)速度與底物濃度的零次方成正比,也就是與底物濃度無(wú)關(guān)。因此,在整個(gè)反應(yīng)過(guò)程中,反應(yīng)物可以勻速地生成某個(gè)產(chǎn)物,導(dǎo)致被測(cè)定溶液在某一波長(zhǎng)下吸光度均勻地減小或增加,減小或增加的速度(ΔA/min)與被測(cè)物的活性或濃度成正比。動(dòng)力學(xué)法也被稱為連續(xù)監(jiān)測(cè)法;主要用于酶活性的測(cè)定。

實(shí)際上,由于底物濃度不可能足夠大,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,底物消耗到一定程度后,反應(yīng)速度不再為零級(jí),因此,零級(jí)動(dòng)力學(xué)法是針對(duì)于特定時(shí)間段而言的;同樣,由于血清成份復(fù)雜,反應(yīng)剛啟動(dòng)時(shí)反應(yīng)較復(fù)雜,雜反應(yīng)較多,必需經(jīng)過(guò)一段延遲時(shí)間才能進(jìn)入穩(wěn)定反應(yīng)期,各試劑商對(duì)這兩段時(shí)間有嚴(yán)格規(guī)定。

t1時(shí)刻加入試劑(體積為V),t2時(shí)刻加入樣本(體積為S),t3時(shí)刻反應(yīng)穩(wěn)定,tn時(shí)刻停止對(duì)反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測(cè);t3-t2為延遲時(shí)間,tn-t3為測(cè)定時(shí)間。單波長(zhǎng)反應(yīng)度(單雙試劑相同)R=(n∑AT-∑A∑T)/[n∑T2-(∑T)2],其中:n=t3到tn間的數(shù)據(jù)個(gè)數(shù)  ,T=時(shí)間 , A=某一時(shí)間的吸光度。雙波長(zhǎng)反應(yīng)度基本同單波長(zhǎng),只是某一時(shí)間的吸光度等于主波長(zhǎng)吸光度減去次波長(zhǎng)吸光度。

如今,檢驗(yàn)生化分析儀已經(jīng)走上了快速發(fā)展之路,自動(dòng)化程度更高、分析項(xiàng)目范圍更廣、配置更方便、分析速度更快、維修也更方便。國(guó)產(chǎn)檢驗(yàn)生化分析儀品牌有很多,常見的有普朗醫(yī)療、邁瑞、庫(kù)貝爾等等,這些都是國(guó)內(nèi)比較常見的生化分析儀。

其中普朗醫(yī)療是成立時(shí)間較早、售后較為完善的一家醫(yī)療設(shè)備廠家http://www.pl999.com/,檢驗(yàn)生化分析儀從半自動(dòng)到全自動(dòng)多個(gè)型號(hào)可選擇,公司生產(chǎn)的PUZS-600系列全自動(dòng)生化分析儀擁有可靠的光學(xué)系統(tǒng);穩(wěn)定的反應(yīng)系統(tǒng);靈活準(zhǔn)確的前處理系統(tǒng);完善高效的的清洗系統(tǒng);易用便捷的軟件操作系統(tǒng)等優(yōu)勢(shì)。自問(wèn)世以來(lái),此款設(shè)備備受是國(guó)內(nèi)各大研究機(jī)構(gòu)及醫(yī)院信賴選。想了解產(chǎn)品參數(shù),歡迎咨詢400-6656-888


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