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高效液相色譜(HPLC)的原理與正反模式

來(lái)源:安捷倫科技(中國(guó))有限公司 更新時(shí)間:2025-08-25 10:37:23 閱讀量:613
導(dǎo)讀:高效液相色譜(HPLC)是分析化學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)核心技術(shù)。常規(guī)的HPLC分析廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、質(zhì)量控制(QC)與質(zhì)量保證(QA),以及食品和環(huán)境檢測(cè)等多個(gè)領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)室中。

高效液相色譜(HPLC)是什么?

高效液相色譜(HPLC)是分析化學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)核心技術(shù)。常規(guī)的HPLC分析廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、質(zhì)量控制(QC)與質(zhì)量保證(QA),以及食品和環(huán)境檢測(cè)等多個(gè)領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)室中。此外,也存在一些專(zhuān)門(mén)化的液相色譜技術(shù),如制備型HPLC、凝膠滲透色譜(GPC)以及超高效液相色譜(UHPLC)。實(shí)際應(yīng)用中具體選擇何種技術(shù),取決于待測(cè)樣品的性質(zhì)與需要分析的含量。

 

高效液相色譜(HPLC)的分離過(guò)程包括將少量液體樣品注入填充有細(xì)小顆粒固定相(通常粒徑為3–5μm)的HPLC色譜柱中。通過(guò)高壓泵輸送的流動(dòng)相推動(dòng)樣品中各組分在色譜柱內(nèi)遷移,實(shí)現(xiàn)高效分離。在質(zhì)量控制(QC)與質(zhì)量保證(QA)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)分析中,所使用的液相流動(dòng)相典型流速范圍為1–2mL/min。

 

高效液相色譜(HPLC)的分離原理

高效液相色譜(HPLC)的分離原理主要基于樣品分子與色譜柱中填料顆粒之間發(fā)生的多種化學(xué)作用與物理吸附。這些相互作用直接決定了HPLC色譜柱的選擇性。目前存在種類(lèi)豐富的HPLC色譜柱和填料類(lèi)型,以適應(yīng)日益拓展的應(yīng)用需求。借助化學(xué)鍵合相所具有的不同選擇性,可實(shí)現(xiàn)測(cè)試樣品中各組分的有效分離。在此基礎(chǔ)上,當(dāng)這些被分離的組分隨流動(dòng)相離開(kāi)色譜柱后,會(huì)由HPLC檢測(cè)器進(jìn)行定性與定量檢測(cè)。

 

高效液相色譜(HPLC)的正相和反相模式

在高效液相色譜(HPLC)中,分離機(jī)制基于分子極性的差異。根據(jù)“相似相溶”原理,極性相近的分子間更容易發(fā)生吸附或相互作用;反之,極性差異大的分子間作用力較弱,甚至可能出現(xiàn)排斥。

 

在正相色譜(NP-HPLC)模式下,固定相為極性填料,流動(dòng)相為非極性溶劑。此時(shí),非極性物質(zhì)因與固定相作用較弱而洗脫較早,極性物質(zhì)則因較強(qiáng)保留而洗脫時(shí)間較長(zhǎng)。

 

而在反相色譜(RP-HPLC)——目前HPLC分析中最常用的分離模式中,固定相為非極性,流動(dòng)相為極性溶劑。極性物質(zhì)與固定相相互作用弱,因此優(yōu)先被洗脫;而非極性組分由于在固定相上有更強(qiáng)的保留,其在色譜柱中的保留時(shí)間顯著延長(zhǎng)。

 

高效液相色譜(HPLC)系統(tǒng)的產(chǎn)品推薦

安捷倫1260InfinityIII多方法系統(tǒng)是一款面向特定應(yīng)用的高效液相色譜(HPLC)系統(tǒng),能夠?qū)崿F(xiàn)極高的系統(tǒng)利用率和最小化人工干預(yù)。該系統(tǒng)支持多用戶(hù)在單一平臺(tái)上訪問(wèn)并運(yùn)行各自的個(gè)性化分析方法。該系統(tǒng)可存儲(chǔ)不同科學(xué)家的多種日常HPLC方法,并自動(dòng)切換執(zhí)行個(gè)性化方法,無(wú)需手動(dòng)更換色譜柱或溶劑。以下是安捷倫1260InfinityIII多方法系統(tǒng)的產(chǎn)品特性與性能指標(biāo)。

 

產(chǎn)品核心特性:

全自動(dòng)多方法運(yùn)行:系統(tǒng)可自動(dòng)在最多4根色譜柱和15種溶劑之間切換,實(shí)現(xiàn)無(wú)人值守操作,極大延長(zhǎng)了儀器有效運(yùn)行時(shí)間。

多用戶(hù)平臺(tái):支持多位用戶(hù)在同一系統(tǒng)上并行運(yùn)行各自專(zhuān)屬的日常分析方法,提高了設(shè)備共享性和利用率。

高壓兼容與靈活混合:可在高達(dá)800bar壓力下運(yùn)行方法,并利用BlendAssist軟件動(dòng)態(tài)混合儲(chǔ)備液,實(shí)現(xiàn)方法靈活性與高性能的統(tǒng)一。

綠色可持續(xù):該系列產(chǎn)品已獲得MyGreenLabACT環(huán)保標(biāo)簽,確認(rèn)其在產(chǎn)品生命周期內(nèi)對(duì)環(huán)境的影響更低。

 

關(guān)鍵性能指標(biāo):

系統(tǒng)壓力操作范圍:最高達(dá)800bar

流速范圍:0.2-10mL/min(視泵型號(hào)而定)

進(jìn)樣體積:0.1–100μL(標(biāo)準(zhǔn));0.1–1500μL(選配MultiDraw套件)

溶劑通道:最多可支持15種溶劑(需外接溶劑選擇閥)

色譜柱容量:4根

泵類(lèi)型:可選二元泵、四元泵或全能泵

 

適用場(chǎng)景

安捷倫1260InfinityIII多方法系統(tǒng)非常適用于制藥、化工、食品等需要進(jìn)行頻繁方法切換和質(zhì)量控制(QC)的實(shí)驗(yàn)室,是提升多項(xiàng)目研究效率的理想選擇。

 

關(guān)于安捷倫科技

安捷倫科技有限公司是分析與臨床實(shí)驗(yàn)室技術(shù)領(lǐng)域的全 球 領(lǐng) 導(dǎo) 者,致力于為提升人類(lèi)生活品質(zhì)提供敏銳洞察和創(chuàng)新經(jīng)驗(yàn)。安捷倫的儀器、軟件、服務(wù)、解決方案和專(zhuān)家能夠?yàn)榭蛻?hù)最具挑戰(zhàn)性的難題提供更可靠的答案。如需了解安捷倫公司的詳細(xì)信息,請(qǐng)?jiān)L問(wèn)www.agilent.com


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