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2025年版《中國藥典》公示稿|黃芪和檳榔中赭曲霉毒素A測(cè)定解決方案

來源:島津(上海)實(shí)驗(yàn)器材有限公司 更新時(shí)間:2024-08-09 11:15:10 閱讀量:363
導(dǎo)讀:本文建立了檳榔中赭曲霉毒素A的測(cè)定方法。

標(biāo)

準(zhǔn)


7月8日,國家藥典委公示了檳榔標(biāo)準(zhǔn)草案,增訂了赭曲霉毒素 A 檢查項(xiàng)

7月26日,國家藥典委公示了黃芪標(biāo)準(zhǔn)草案,增訂了赭曲霉毒素 A 檢查項(xiàng)

2025年版《中國藥典》黃芪與檳榔的修訂草案公示稿中對(duì)于供試品溶液的制備,與2020年版《中國藥典》2351真菌毒素測(cè)定法中的赭曲霉毒素A測(cè)定法關(guān)于供試品溶液的制備有較大差異,差異見下表。

標(biāo)紅部分為差異


2025年版《中國藥典》

黃芪和檳榔國家藥品標(biāo)準(zhǔn)修訂草案公示稿

VS

2020年版《中國藥典》2351赭曲霉毒素A測(cè)定法

取供試品粉末約 3g,精密稱定,置于均質(zhì)瓶中,加入氯化鈉 3g,精密加入 70%甲醇 60ml

取供試品粉末約 20g,精密稱定,置于均質(zhì)瓶中,加入氯化鈉 4g,精密加入 80%甲醇 100ml

離心 10 分鐘(離心速度 8000r/min),精密量取上清液 5ml,置 50ml 量瓶中,用 PBS 緩沖液稀釋至刻度,搖勻,離心 15 分鐘(離心速度 8000r/min

離心10分鐘(離心速度4000r/min),精密量取上清液10ml,置50ml量瓶中,用稀釋至刻度,搖勻,離心10分鐘(離心速度4000r/min

精密量取上清液 20ml,通過免疫親合柱,流速每分鐘 3ml,用聚山梨酯 20 PBS 緩沖液 10ml 洗脫,棄去洗脫液

精密量取上清液10ml,通過免疫親合柱,流速每分鐘3ml,用水20ml洗脫

使空氣進(jìn)入柱子, 再用水 10ml 洗脫,流速每分鐘 6ml,棄去洗脫液,使空氣進(jìn)入柱子,將水?dāng)D出柱子,再用甲醇 1.5ml 洗脫,收集洗脫液,置 2ml 量瓶中,并用稀釋至刻度

使空氣進(jìn)入柱子,將水?dāng)D出柱子,再用適量甲醇洗脫,收集洗脫液,置2ml量瓶中,并用甲醇稀釋至刻度

產(chǎn)

參考最新公示稿中的方法,采用島津ShimNex CS C18SHIMSEN赭曲霉毒素A免疫親和柱可完成黃芪及檳榔中赭曲霉毒素A的測(cè)定。

ShimNex CS C18

(250mm×4.6 mm, 5μm,P/N:380-01230-01)

SHIMSEN赭曲霉毒素A免疫親和柱

(3mL,P/N:380-00914

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1

分析條件

儀器配置:島津高效液相色譜儀LC-20AD;

色譜柱:ShimNex CS C18 (250mm×4.6 mm,5μm;P/N:380-01230-01);

免疫親和柱:SHIMSEN赭曲霉毒素A免疫親和柱,3 mL (P/N:380-00914);

流速:1.0 mL/min;

進(jìn)樣量:5 μL-25 μL;

柱溫:30℃;

流動(dòng)相:乙腈-2%冰乙酸水溶液=49:51

檢測(cè)器:熒光檢測(cè)器;激發(fā)波長 333 nm,發(fā)射波長477 nm

2

色譜圖

赭曲霉毒素A標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖(進(jìn)樣量:5μL)

黃芪加標(biāo)樣品(加標(biāo)濃度:3μg/kg)液相色譜圖(進(jìn)樣量:20μL)

檳榔加標(biāo)樣品(加標(biāo)濃度:3μg/kg)液相色譜圖(進(jìn)樣量:20μL)


3

赭曲霉毒素A的檢測(cè)添加回收結(jié)果

將檳榔樣品進(jìn)行3 μg/kg 濃度加標(biāo)后,按照上述前處理方法處理后上機(jī),平行3 份樣品考察回收率和RSD,具體結(jié)果如下:



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