前言
關(guān)黃柏是一種常用中藥,為蕓香科植物黃檗的干燥樹皮,性味苦,寒,歸腎,膀胱經(jīng)。具有清熱燥濕,瀉火除蒸,解毒療瘡的功效。用于濕熱瀉痢,黃疸尿赤,熱淋澀痛,瘡瘍腫毒,濕疹濕瘡等癥狀。關(guān)黃柏主要含小檗堿,巴馬汀,藥根堿,黃柏堿等活性成分,其中以小檗堿的含量Z高?!吨袊?guó)藥典》2020版第一部中關(guān)黃柏的含量測(cè)定參照高效液相色譜法測(cè)定,在此參考藥典中的分析條件對(duì)關(guān)黃柏的含量進(jìn) 行測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)部分
儀器
采用包含以下模塊的賽里安LC6000高效液相色譜儀系統(tǒng):
集成六通道真空脫氣的SCION LC6100四元泵
SCION LC6210 高精度、低殘留自動(dòng)進(jìn)樣器
SCION LC6310 柱溫箱
SCION LC6410 紫外檢測(cè)器
液相色譜條件
樣品的預(yù)處理
[樣品前處理]
關(guān)黃柏粉碎,過45目篩取本品粉末約0.2g,精密稱定,置50mL容量瓶中加60%乙醇40mL,超聲處理45min鐘,放冷加60%乙醇至刻度,搖勻,濾過取續(xù)濾液,待上機(jī)分析。
標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)定示例
▲ 標(biāo)準(zhǔn)樣品的色譜圖(濃度:50 μg/mL)
關(guān)黃柏的分析結(jié)果
對(duì)關(guān)黃柏進(jìn)行了含量的測(cè)定,其中大約含鹽酸小檗堿1.61%,鹽酸巴馬汀0.60%,均滿足藥典要求。
▲ 關(guān)黃柏的色譜圖
標(biāo)準(zhǔn)曲線
鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿在1~100μg/mL濃度范圍內(nèi)均得到R2=1.0000良好的線性關(guān)系。
▲ 鹽酸巴馬汀的標(biāo)準(zhǔn)曲線
▲ 鹽酸小檗堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線
重復(fù)性
(50 μg/mL 鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿混合標(biāo)液,n = 6)
對(duì)50μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)6次測(cè)定,考察了鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的保留時(shí)間和峰面積的重現(xiàn)性,均得 到了良好的結(jié)果。
系統(tǒng)適用性
(50 μg/mL 鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)溶液)
對(duì)系統(tǒng)適用性進(jìn)行了確認(rèn),理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算,結(jié)果得到鹽酸小檗堿的理論塔板數(shù)大于藥典規(guī)定值,滿足藥典要求。
結(jié)論
使用SCION 賽里安 LC6000-UV對(duì)關(guān)黃柏中的鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿進(jìn)行了測(cè)定,得到了良好的線性和重現(xiàn)性,理論塔板數(shù)滿足藥典要求,為關(guān)黃柏的品質(zhì)分析提供了解決方法。
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