人RNA結(jié)合基元蛋白8A(RBM8A)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
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BS-1656 人RNA結(jié)合基元蛋白8A(RBM8A)試劑盒
實(shí)驗(yàn)原理?
采用雙抗體夾心法(ELISA)定量檢測樣本中的RBM8A蛋白?:
包被抗體?:微孔板預(yù)包被抗RBM8A捕獲抗體。
抗原結(jié)合?:加入樣本/標(biāo)準(zhǔn)品后,目標(biāo)蛋白與捕獲抗體結(jié)合。
檢測抗體?:加入HRP標(biāo)記的檢測抗體形成復(fù)合物。
顯色反應(yīng)?:TMB底物在HRP催化下顯色(藍(lán)→黃),顏色深度與RBM8A濃度正相關(guān)?。
樣本處理與保存?
樣本類型?:血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織勻漿?。
處理要求?:
血清/血漿:離心去除顆粒(1000×g,10-30分鐘)?。
組織勻漿:生理鹽水搗碎后離心取上清?。
保存條件?:分裝后-70℃保存,避免反復(fù)凍融或溶血?。
試劑盒組成?
包被微孔板、標(biāo)準(zhǔn)品(濃度梯度:78-5000 pg/mL或類似范圍)?。
HRP標(biāo)記檢測抗體、TMB顯色液、終止液、洗滌緩沖液等?。
需自備器材?:酶標(biāo)儀(450nm)、移液器、恒溫箱、蒸餾水?。
操作步驟?
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按說明書梯度稀釋(如5000→78 pg/mL)?。
加樣與孵育?:
每孔加入50μL樣本/標(biāo)準(zhǔn)品,37℃孵育1小時(shí)?。
洗滌?:徹底清洗未結(jié)合物質(zhì)(建議自動(dòng)洗板機(jī)浸泡30秒)?。
顯色與終止?:
加入TMB顯色液(避光),37℃反應(yīng)15分鐘。
加入終止液后立即測定OD值(450nm)?。
注意事項(xiàng)?
質(zhì)量控制?:
批內(nèi)/批間精密度CV應(yīng)<12%?。
標(biāo)準(zhǔn)曲線需呈線性(R2≥0.99)?。
干擾因素?:避免溶血、脂血樣本及細(xì)菌污染?。
適用范圍?:僅供科研使用,不可用于臨床診斷?。
結(jié)果計(jì)算?
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,擬合方程計(jì)算樣本濃度?。
若樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍,需適當(dāng)稀釋后重測?。
注:以上資料僅供參考,如需進(jìn)一步技術(shù)支持或代測服務(wù),可聯(lián)系相關(guān)供應(yīng)商?。
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