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氟油Fluo-Oil 135(FO135):平替3M HFE7500氟油,具有生物兼容性,適用于單細(xì)胞、ddPCR和細(xì)胞培養(yǎng)等

來(lái)源:泰初科技(天津)有限公司 更新時(shí)間:2025-03-05 12:45:12 閱讀量:387
導(dǎo)讀:3M公司將:?到2025年底,停止所有PFAS的生產(chǎn),PFAS包含HFE7500、HFE7200等氟油產(chǎn)品。Emulseo推出平替產(chǎn)品 Fluo-Oil 135氟油,具有一致的穩(wěn)定性、可靠性和最佳分子保留,確保您的項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)不會(huì)中斷。

3M公司將: 到2025年底,停止所有PFAS的生產(chǎn):3M將停止生產(chǎn)所有含氟聚合物、氟化流體和基于PFAS的添加劑產(chǎn)品。我們將幫助客戶(hù)有序過(guò)渡。3M打算在過(guò)渡期間履行目前的合同義務(wù)。

PFAS包含HFE7500、HFE7200、HFE7100系列氟油產(chǎn)品。

Emulseo推出替換性產(chǎn)品 Fluo-Oil 135氟油,具有一致的穩(wěn)定性、可靠性和最佳分子保留,確保您的項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)連續(xù)進(jìn)行,不會(huì)中斷。

Fluo-Oil 7500和HFE7500氟油的參數(shù)比較如下所示:

與3M HFE7500油產(chǎn)生液滴性能的測(cè)試比較

分別用3M HFE7500和Fluo-Oil 135氟化油稀釋FluoSurf neat表面活性劑,得到4w/w%的質(zhì)量濃度。


水滴產(chǎn)生或油包水液滴產(chǎn)生的兩相流速:

油相流速為300μL/hr,水相流速為100μL/hr。

水相為PBS溶液或100μM熒光素的PBS溶液(用于測(cè)試液滴的泄露)

倒置顯微鏡觀察和Image J軟件分析。


一、液滴尺寸及其分布

在Fluo-Oil 135和HFE7500油中,產(chǎn)生相似尺寸的水滴。在既定流速參數(shù)下,液滴的平均直徑為110μm。液滴尺寸的CV分別為2.3%(Fluo-Oil 135油)和2.9%(HFE7500油)。


二、液滴穩(wěn)定性

大多數(shù)研究團(tuán)隊(duì)使用液滴微流體進(jìn)行細(xì)胞封裝或 PCR 應(yīng)用。因此,需要通過(guò) PCR 的加熱循環(huán)以及在 37°C 下長(zhǎng)期孵育來(lái)產(chǎn)生穩(wěn)定的液滴。表面活性劑的選擇至關(guān)重要,但選擇油同樣重要,以確保可重復(fù)的實(shí)驗(yàn)以及單分散液滴群的生成和保存。


分別從三個(gè)方面測(cè)試液滴的穩(wěn)定性:一是把液滴重新注入到玻璃觀察腔室內(nèi);二是經(jīng)典的PCR熱循環(huán)過(guò)程,循環(huán)過(guò)程30次,每次熱循環(huán)為98°C運(yùn)行10s, 50°C運(yùn)行5s, 72°C運(yùn)行10s;三是置于37℃的培養(yǎng)箱內(nèi)放置3天。對(duì)1萬(wàn)個(gè)液滴進(jìn)行分析。


結(jié)論:

無(wú)論是在 Novec? HFE 7500 還是 Fluo-Oil? 135 中形成 FluoSurf? 穩(wěn)定的液滴,在 PCR 加熱循環(huán)后或在 37°C 孵育 3 天后,液滴平均尺寸在生成時(shí)保持不變 [約 110μm (0.7nL)] 。此外,液滴種群仍然是單分散的。根據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)算出在加熱循環(huán)后,只有 5% 的整體液滴的大小與平均初始液滴直徑的差異超過(guò) 10%。


將氟油從 Novec? HFE 7500 切換到 Fluo-Oil? 135 對(duì)液滴穩(wěn)定性沒(méi)有影響。


三、液滴內(nèi)的分子保留

基于液滴的化學(xué)或生化分析依賴(lài)于試劑在單個(gè)液滴中保持隔離。泄漏到連續(xù)相和液滴之間的交換,即使很低,也會(huì)影響結(jié)果的完整性,因此,分子保留是選擇氟化油時(shí)要考慮的重要參數(shù)。眾所周知,氟化油會(huì)限制液滴之間的分子交換,因此應(yīng)驗(yàn)證切換油的影響。


同時(shí)生成兩種油包水乳液[“空”(負(fù)載 PBS)和“滿(mǎn)”(負(fù)載熒光素)液滴],一次使用 Novec? HFE7500,然后使用 Fluo-Oil? 135 作為連續(xù)相。兩種混合物,每一種都包含兩個(gè)種群,在 37°C 下孵育,并在不同的時(shí)間點(diǎn)拍攝照片。使用 ImageJ 軟件對(duì)液滴內(nèi)熒光強(qiáng)度的演變進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)定量分析。

圖 3 顯示了兩個(gè)群體之間平均熒光強(qiáng)度差異的演變(染料加載和空

液滴)以及在初始時(shí)間點(diǎn)和 48 小時(shí)后相關(guān)的熒光和明場(chǎng)圖片。


在 24 小時(shí)的過(guò)程中,兩種氟化油產(chǎn)生的液滴中熒光素的泄漏率相似(約 15% 泄漏),并且在 Fluo-Oil? 135 中產(chǎn)生液滴的情況下保持恒定 3 天。相反,在 24 小時(shí)后, Novec? HFE7500 中液滴的泄漏繼續(xù)減少并達(dá)到 30% 左右。這種較長(zhǎng)孵育時(shí)間的較差保留性能可歸因于后一種油的粘度略低,加速了液滴之間更快的分子交換。


結(jié)論

對(duì)于基于液滴的微流體應(yīng)用,從一種氟化油類(lèi)型切換到另一種類(lèi)型可能會(huì)對(duì)微流體實(shí)驗(yàn)的過(guò)程產(chǎn)生重大影響,尤其是對(duì)液滴的有效生成產(chǎn)生重大影響。在 Novec? HFE7500 和 Fluo-Oil? 135 的情況下,已證實(shí)更換這兩種氟化油對(duì)實(shí)驗(yàn)條件和結(jié)果沒(méi)有影響。當(dāng)使用 Fluo-Oil? 135 作為連續(xù)相時(shí),甚至可以觀察到熒光素在液滴內(nèi)的更好保留。


氟化油Fluo-Oil? 135 是用于液滴微流體應(yīng)用的 Novec? HFE7500 的有效替代品。

與FluoSurf Neat含氟表面活性劑、表面處理疏水試劑Fluo-ST3搭配使用,效果更佳。


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