Q1:實驗操作文獻上是搖7d,若有事耽擱了,CO2振蕩培養(yǎng)箱多搖了幾天會有什么問題?
A1:文獻中培養(yǎng)7天一般是具體培養(yǎng)條件下產(chǎn)量的平臺期,根據(jù)菌的生長情況確定的,或者可以說7天的時候產(chǎn)物量較高,建議在確定條件的情況下做一個動態(tài)或者半動態(tài)產(chǎn)量以及細胞量分析,找到對數(shù)期以及平臺期,便知道哪天結(jié)束發(fā)酵比較合適。
Q2:不知道哪種方法做活性成分分析?
A2:活性成分分析方面,首先要確定活性物質(zhì)是胞內(nèi)還是胞外,建議分開,取樣之后離心將上清和細胞分別處理,上清用各種溶劑萃取,細胞超聲破碎或者低溫烘干后研磨后,溶劑萃取,初期做的話建議先簡單萃取直接HPLC-MS來鑒定物質(zhì),后期需要大量純品時在濃縮,柱子之類的分離。可以看CO2振蕩培養(yǎng)箱相關(guān)文獻總結(jié)。
Q3、參數(shù)(時間、溫度、轉(zhuǎn)速)是如何確定的?
A3:CO2振蕩培養(yǎng)箱培養(yǎng)真菌的條件這個可以采取單因素或者做一個PB設計簡單搞定,也可根據(jù)文獻先有一個大概的培養(yǎng)條件。然后自己再進行更進一步的優(yōu)化。
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