注：按照此梯度洗脫表運(yùn)行，存在系統(tǒng)壓力無法回歸到進(jìn)樣前，基線不穩(wěn)的情況，故設(shè)置每次進(jìn)樣前平衡10 min。

流速：1.0 mL/min；

進(jìn)樣量：5 μL；

洗針液：90%甲醇水溶液；

柱溫：30 ℃；

檢測(cè)器及檢測(cè)波長：檢測(cè)器為紫外-可見光檢測(cè)器，檢測(cè)波長為330 nm。

表1  對(duì)照品溶液色譜圖積分結(jié)果

由表1中數(shù)據(jù)可知，單咖啡酰酒石酸的理論塔板數(shù)為26213，滿足《中國藥典（2025年版）》中規(guī)定的單咖啡酰酒石酸峰理論塔板數(shù)應(yīng)不低于3000的要求；拖尾因子為1.21，具有良好的峰形。

將對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣7針，疊加的色譜圖如圖2所示，結(jié)果見表2。

圖2  對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣7針疊加的色譜圖

表2  對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣7針重復(fù)性數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

由表2中數(shù)據(jù)可知，將對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣7針進(jìn)行重復(fù)性測(cè)試，單咖啡酰酒石酸保留時(shí)間的RSD為0.11 %，峰面積的RSD為0.18 %，具有良好的定性定量重復(fù)性。

含量測(cè)定

按照色譜條件，將單咖啡酰酒石酸系列標(biāo)準(zhǔn)工作液上機(jī)測(cè)定，疊加色譜圖見圖3。單咖啡酰酒石酸在1 μg/mL~200 μg/mL濃度范圍內(nèi)，曲線的確定系數(shù)R²≥0.999，線性關(guān)系良好。

圖3  單咖啡酰酒石酸系列標(biāo)準(zhǔn)工作液疊加的色譜圖

以市售的熱炎寧合劑作為試樣，按流程對(duì)試樣進(jìn)行處理，計(jì)算試樣中單咖啡酰酒石酸的含量。供試品溶液的色譜圖如圖4所示。

圖4  供試品溶液的色譜圖

經(jīng)計(jì)算，熱炎寧合劑中單咖啡酰酒石酸的含量為1.30 mg/mL，滿足《中國藥典（2025年版）》中規(guī)定的含單咖啡酰酒石酸不得少于0.40 mg/mL的要求。