- 2025-01-10 10:53:30人間充質干細胞培養(yǎng)基(無酚紅)
- 人間充質干細胞培養(yǎng)基(無酚紅)是一種專為人間充質干細胞生長設計的培養(yǎng)基,它去除了酚紅指示劑,以避免對細胞產(chǎn)生潛在影響。該培養(yǎng)基含有細胞生長所需的營養(yǎng)物質、生長因子及調節(jié)物質,能夠維持細胞的穩(wěn)定生長和分化。無酚紅設計使得培養(yǎng)基更加安全、純凈,適用于對細胞生長環(huán)境要求較高的研究及應用場景。該培養(yǎng)基廣泛應用于干細胞研究、組織工程及再生醫(yī)學等領域,是人間充質干細胞培養(yǎng)的關鍵試劑。
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人間充質干細胞培養(yǎng)基(無酚紅)問答
- 2023-05-18 15:49:00顯微鏡用于臍帶間充質干細胞
- 臍帶間充質干細胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細胞。臍帶間充質干細胞具有較高的分化潛能,可向多個方向進行分化。它在骨、軟骨、肌肉、肌腱、韌帶、神經(jīng)、肝、內皮和心肌等組織工程方面具有廣闊的臨床應用前景。有報道從人臍帶中分離出MSCs,且細胞含量、增殖能力優(yōu)于MSCs,免疫原性比MSCs低 ,并且具有取材方便,無倫理學爭議等優(yōu)點,因此越來越受到研究工作者們的關注。近期有位客戶需要一臺顯微鏡用于觀察臍帶間充質干細胞,由于它是需要培養(yǎng)皿培養(yǎng)的,因此銷售經(jīng)理推薦細胞工廠顯微鏡MI52-CF。 顯微鏡MI52-CF觀察臍帶間充質干細胞細胞工廠MI52-CF采用優(yōu)良的無限遠光學系統(tǒng),可實現(xiàn)明視場、相襯觀察??蓪Ω吲囵B(yǎng)皿或圓筒狀燒瓶進行無沾染培養(yǎng)細胞觀察?;驅毎M織,透明液態(tài)組織的顯微觀察,可對培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)組織進行動態(tài)顯微觀察,也可對“細胞工廠”進行顯微觀察。可應用于科研院所、高等院校、醫(yī)療衛(wèi)生、生物醫(yī)藥、檢驗檢疫、農(nóng)牧乳業(yè)等部門。除此之外,熒光顯微鏡也可應用于人臍帶間充質干細胞主庫支原體熒光生物顯微鏡MF31-M采用無限遠平場消色差物鏡和大視野目鏡,可用雙目或三目觀察,搭配LED熒光激發(fā)裝置,實現(xiàn)明場和熒光顯微觀察,供臨床試驗室利用顯微放大原理觀察微小細胞、組織等樣本用。如果您對臍帶間充質干細胞顯微鏡感興趣或有疑問,歡迎與我們聯(lián)系,期待與您相約!來源:http://www.mshot.com.cn/kehuanli/202303313.html,轉載請保留出處,謝謝!
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- 2025-04-24 14:30:21濕熱試驗箱怎么充注冷媒
- 濕熱試驗箱怎么充注冷媒 濕熱試驗箱作為一種常見的環(huán)境試驗設備,廣泛應用于電子、汽車、航空等行業(yè)的產(chǎn)品可靠性測試。它能夠模擬高溫、高濕的環(huán)境,測試材料和設備在這種惡劣環(huán)境下的性能表現(xiàn)。冷媒作為濕熱試驗箱的核心組成部分之一,直接影響到設備的制冷效果與穩(wěn)定性,因此正確的充注冷媒不僅是設備正常運轉的前提,也是確保測試精度與設備壽命的重要環(huán)節(jié)。本文將詳細介紹濕熱試驗箱充注冷媒的步驟和注意事項,以幫助用戶準確操作。 濕熱試驗箱充注冷媒的準備工作 在開始充注冷媒之前,需要做一些準備工作。確保試驗箱處于關閉狀態(tài),并斷開電源,避免在操作過程中發(fā)生意外。然后,檢查冷媒的型號,確保使用與設備要求匹配的冷媒。不同型號的濕熱試驗箱可能需要不同類型的冷媒,錯誤的冷媒會導致設備性能下降或損壞。 充注冷媒的操作步驟 連接充注設備 將充注冷媒所需的設備連接至濕熱試驗箱的冷媒進氣口。常見的充注工具包括壓力表、充注管等。連接時要確保密封良好,避免冷媒泄漏。 打開冷媒瓶閥門 慢慢打開冷媒瓶的閥門,開始將冷媒注入濕熱試驗箱系統(tǒng)中。在充注過程中,要密切觀察壓力表的指示,確保壓力維持在推薦的范圍內。如果壓力過高或過低,可能需要調整充注量。 檢查冷媒充注量 每臺濕熱試驗箱的冷媒充注量通常都有明確的規(guī)定,用戶應根據(jù)設備說明書上的要求,確認充注的冷媒量。充注過量可能會導致壓縮機過載,而充注不足則會影響制冷效果。 釋放多余氣體 充注完成后,關閉冷媒瓶的閥門,并檢查系統(tǒng)的壓力,確認充注量已達標準。然后,輕輕釋放掉充注管中的多余氣體,確保不會有冷媒殘留在充注設備中。 檢測漏氣情況 充注完畢后,進行系統(tǒng)的密封性檢測??梢酝ㄟ^肥皂水或者專業(yè)的泄漏檢測儀器,檢查所有接口和管道是否有氣泡產(chǎn)生,確保冷媒系統(tǒng)的密封性良好。 注意事項 環(huán)境溫度:充注冷媒時,周圍環(huán)境的溫度會影響冷媒的充注壓力,因此要選擇合適的溫度范圍進行操作。 定期檢查:冷媒在使用過程中會逐漸減少,因此需要定期檢查冷媒的充注情況。如果發(fā)現(xiàn)壓力不穩(wěn)定或制冷效果下降,應及時補充冷媒。 安全操作:充注冷媒涉及到高壓氣體,因此操作人員必須佩戴必要的防護裝備,如手套和護目鏡等。 結論 濕熱試驗箱的冷媒充注是確保設備正常運行和測試精度的關鍵步驟。通過按照操作規(guī)范進行充注,可以有效提高設備的制冷效果和延長使用壽命。為了確保試驗箱在高溫高濕環(huán)境下的穩(wěn)定性,操作人員在充注過程中應嚴格遵守相關安全規(guī)定和操作流程,保證設備的長期穩(wěn)定運行。
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- 2025-02-11 12:45:12質構儀多少錢
- 質構儀多少錢?影響價格的因素解析 在當今快速發(fā)展的工業(yè)與科研領域,質構儀作為評估材料質地和性能的重要儀器,已經(jīng)被廣泛應用于食品、化工、醫(yī)藥、包裝等行業(yè)。很多企業(yè)和科研人員在選購質構儀時,常常關心的是其價格問題。本文將深入探討影響質構儀價格的多個因素,以幫助您更清楚地了解市場上的價格差異,從而做出更加明智的采購決策。 質構儀的價格并非單一標準,而是受多種因素影響。品牌是一個重要的價格決定因素。知名品牌的質構儀通常具有更高的研發(fā)投入、更強的技術支持和更長的使用壽命,因此其價格較高。質構儀的性能參數(shù),如測量范圍、精度、傳感器類型、軟件功能等,也會直接影響其定價。高端的質構儀通常具有更強的多功能性和更精確的測量能力,相應的價格自然更高。 質構儀的配置也在定價中扮演著重要角色。標準配置的質構儀通常價格較為親民,而如果用戶需要特殊配置或額外的附件,如溫控裝置、高壓環(huán)境適應性等,價格便會相應上升。使用場景也是一個不可忽視的因素。若質構儀用于特殊行業(yè)或特定材料的測試,可能需要定制化的解決方案,這會進一步增加其成本。 除了這些硬性因素,售后服務和保修期也常常影響價格的高低。高品質的售后服務不僅能夠保證設備的長期使用,還能有效提升設備的性價比。因此,一些廠商可能會將優(yōu)質的售后服務作為價格的一個附加值考慮在內。 質構儀的價格受到品牌、性能、配置、行業(yè)需求、售后服務等多方面因素的影響。根據(jù)不同的需求選擇合適的質構儀,可以為企業(yè)節(jié)省采購成本,同時確保測量精度和使用穩(wěn)定性。了解這些影響因素,能夠幫助消費者更好地評估和選擇適合自身需求的質構儀設備。
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- 2023-07-28 23:53:05鍋爐紅水處理
- 鍋爐紅水處理今年五月下旬,某制藥廠設備管理負責人找到我,提了一個問題并尋求解決辦法:圖1▲2號鍋爐在排污水有時呈紅色有時呈紅褐色我們制藥廠有2臺2噸型號為WNS2-1.25-Q的蒸汽鍋爐為生產(chǎn)供熱,1號鍋爐使用樹脂軟化水作為給水,2號鍋爐補水以回用的蒸汽冷凝水作為主,軟化水作為補充。使用軟化水的1號鍋爐爐水顏色正常,使用蒸汽冷凝水的2號鍋爐在排污時,爐水有時呈紅色有時呈紅褐色,增大排污后,仍沒有改善,爐水顏色發(fā)紅發(fā)渾,爐水靜置后底部是紅色沉淀。2號鍋爐回用的蒸汽冷凝水顏色偶爾有輕微發(fā)紅情況,凝水PH值為5.5,先后采取了在蒸汽冷凝水回收罐內添加碳酸鈉、氫氧化鈉、氨水增加其PH值的措施,2號鍋爐爐水顏色發(fā)紅情況改善不明顯。想請教是哪里出問題,怎么解決。圖2▲2號鍋爐爐水發(fā)紅,凝水微微發(fā)紅,1號鍋爐爐水顏色正常1.鍋爐爐水發(fā)紅的原因我回復:2號鍋爐爐水顏色發(fā)紅,鍋爐紅水是爐水中鐵離子濃度大顯色的原因,鐵離子是鍋爐系統(tǒng)腐蝕的產(chǎn)物,鍋爐長時間出現(xiàn)紅水意味著鍋爐正在遭受持續(xù)地腐蝕,引起蒸汽鍋爐系統(tǒng)腐蝕的原因通常是氧腐蝕和二氧化碳引起的酸性腐蝕共同作用。氧腐蝕來源于鍋爐系統(tǒng)無除氧措施或除氧設備效率不高;引起的酸性腐蝕二氧化碳來源于補水中碳酸根或碳酸氫根受熱分解成二氧化碳,或者蒸汽冷凝水開式回收空氣中溶解進入,蒸汽冷凝水相當于蒸餾水非常純凈,有試驗表明,1升純水中溶解1毫克二氧化碳,純水PH值從7直降到5,2號鍋爐蒸汽冷凝水PH值為5.5,是為二氧化碳酸性水,腐蝕速率不可小覷。鍋爐蒸汽系統(tǒng)腐蝕產(chǎn)生鐵離子,蒸汽冷凝水中鐵離子濃度每升在600微克以下通常是不顯顏色,2號鍋爐回用的蒸汽冷凝水顏色偶爾有輕微發(fā)紅情況,這時蒸汽冷凝水中鐵離子含量每升大概在700微克以上(國標要求鍋爐給水鐵離子每升小于300微克),鐵離子超標的蒸汽冷凝水直接進入鍋爐里,隨著鍋水不斷蒸發(fā)濃縮,不顯色的2價鐵離子受熱氧化成顯色的3價鐵離子,鍋爐爐水顏色開始發(fā)紅,正所謂鍋水發(fā)紅、爐水發(fā)紅、鍋爐排污水顏色發(fā)紅,鍋爐紅水大都是這個情況。2.鍋爐爐水發(fā)紅的危害鍋爐長時間紅水意味著鍋爐正在遭受持續(xù)地腐蝕。蒸汽冷凝水鐵離子超標,鍋爐爐水發(fā)紅,爐水中的鐵離子會附著在鍋爐受熱面上,形成氧化鐵垢。氧化鐵垢會對鍋爐產(chǎn)生3種危害。2.1鍋爐爐水發(fā)紅的危害1是,氧化鐵垢平均導熱系數(shù)為0.1-0.2kcal/mh·℃,大約是鋼的1/370,鐵銹垢導熱很差,鍋爐受熱面上附著氧化鐵垢,會降低鍋爐出力,鍋爐熱效率下降,增加天然氣燃料能源消耗,增加鍋爐運行成本。2.2鍋爐爐水發(fā)紅的危害2是,氧化鐵垢或鐵銹垢達到一定厚度,鍋爐爐管長時間過熱產(chǎn)生蠕變,鍋爐爆管就是時間早晚的問題。2.3鍋爐爐水發(fā)紅的危害3是,氧化鐵垢附著在鍋爐受熱面上,由于電化學腐蝕效應會造成垢下腐蝕即坑蝕出現(xiàn),隨著時間延長,腐蝕坑加深,鍋爐受熱面腐蝕坑穿孔泄漏亦是時間早晚的事情,形成安全生產(chǎn)的隱患。3.鍋爐紅水處理辦法要解決鍋爐爐水發(fā)紅問題,就是要降低爐水中鐵離子的含量,通常有2種路徑:3.1解決爐水發(fā)紅問題,降低爐水中鐵離子的含量路徑1是,在蒸汽冷凝水回收末端加裝物理除鐵過濾設備,除鐵設備過濾掉蒸汽冷凝水中鐵離子,讓蒸汽冷凝水顏色恢復正常,蒸汽冷凝水鐵離子達標能直接安全回用到鍋爐。高溫蒸汽冷凝水除鐵設備的缺點:高溫蒸汽冷凝水除鐵設備一次性投入大;高溫蒸汽冷凝水除鐵設備占地大,高溫蒸汽冷凝水除鐵設備運行維護費用不低;高溫蒸汽冷凝水除鐵設備濾料2-3年需要更換1次,濾料更換成本占設備造價三分之一左右;高溫蒸汽冷凝水除鐵設備不能提高蒸汽凝結水PH值;高溫蒸汽冷凝水除鐵設備既不能解決酸性蒸汽及冷凝水對鍋爐蒸汽系統(tǒng)和凝水回收系統(tǒng)設備和管線的腐蝕,也不能解決系統(tǒng)氧腐蝕,系統(tǒng)腐蝕一直存在,鐵離子來源也一直存在,高溫蒸汽冷凝水除鐵設備過濾除鐵是治標不治本。3.2解決爐水發(fā)紅問題,降低爐水中鐵離子的含量路徑2是,在在鍋爐給水或蒸汽冷凝水中投加化學藥劑,來解決系統(tǒng)氧腐蝕和二氧化碳引起的酸性腐蝕。常用的化學藥劑有碳酸鈉、氫氧化鈉、氨水、BF-31T四種。3.2.1投加碳酸鈉來解決鍋爐爐水發(fā)紅問題的優(yōu)劣勢在鍋爐蒸汽冷凝水中投加碳酸鈉能提高凝水、爐水的PH值,只能解決凝水及鍋爐本體的酸性腐蝕,不能解決氧腐蝕問題,只能部分緩解鍋爐紅水問題。鍋爐蒸汽冷凝水中投加碳酸鈉不利方面是,增加鍋水的含鹽量,碳酸鈉溶解電離后碳酸根受熱分解成二氧化碳是凝水PH值降低原因之一。3.2.2投加氫氧化鈉來解決鍋爐爐水發(fā)紅問題的優(yōu)劣勢在鍋爐蒸汽冷凝水中投加氫氧化鈉能提高凝水、爐水的PH值,只能解決凝水及鍋爐本體的酸性腐蝕,不能解決氧腐蝕問題,只能部分緩解紅水問題。鍋爐蒸汽冷凝水中投加氫氧化鈉不利方面是,氫氧化鈉是強堿也是強電解質,氫氧化鈉調節(jié)PH值的波動性較大,氫氧化鈉加入后水的PH很容易就升高,調節(jié)PH值更快更直接,也容易過頭不能投太多量,加入氫氧化鈉過量會造成鍋水堿度過高,出現(xiàn)汽水共騰;氫氧化鈉加入量不易控制,游離NaOH過量會造成相對堿度大,出現(xiàn)堿脆也會對設備造成腐蝕。3.2.3投加氨水來解決鍋爐爐水發(fā)紅問題的優(yōu)劣勢氨水是常見的PH值調節(jié)劑,有許多優(yōu)點,最主要是氨是弱堿性,投加的氨濃度一般都不大、成本小價格低廉,當pH值大于8時氨能將水中二氧化碳完全中和,生成NH4HCO3。在鍋爐給水中投加氨水能提高給水、爐水、凝水的PH值,只能解決鍋爐系統(tǒng)的酸性腐蝕,不能解決氧腐蝕問題,能部分緩解紅水問題。加氨的方式來調整爐水及蒸汽的PH值緩解腐蝕需要注意的4個問題。1、氨水有一定的腐蝕作用,又易揮發(fā)出氨氣, 液氨的儲存和使用是一個危險源;2、氨氣液相比不佳,氣相側多液相側少,氨水調節(jié)PH值保持時間不長,用量大;3、當給水中加入氨量過大時,在溶解氧的參與下,對銅的腐蝕比較強,銅質金屬換熱器及儀表附件設備易發(fā)生腐蝕;4、加氨來調節(jié)提高其PH能防止輸送中二氧化碳對管線的腐蝕,但是對于氧腐蝕就不能有效控制,蒸汽和凝結水系統(tǒng)氧腐蝕還是在進行,只能部分解決爐水發(fā)紅問題。3.2.4投加BF-31T凝水保護劑來解決鍋爐爐水發(fā)紅問題的優(yōu)劣勢 BF-31T凝結水系統(tǒng)保護劑是北京化工大學專屬權利產(chǎn)品,BF-31T凝結水保護劑主要成分為中和劑和成膜劑及其他助劑,具有成膜中和功能,穩(wěn)定性好,并有合理的氣液相分配比,能快速的控制鍋爐整體系統(tǒng)腐蝕。中和劑起到提高鍋爐給水、爐水、蒸汽及凝水PH值的作用,中和水中二氧化碳形成的弱酸腐蝕;成膜劑在金屬表面形成單分子層的具有憎水作用的保護膜,膜的分子間的空隙比二氧化碳和氧的截面小,防止腐蝕氣體分子O2、CO2接觸金屬從而防止了對金屬的腐蝕;合理的氣 液相分配比可有效的將藥劑分配在金屬管道中汽液兩相中,能很好解決汽液并存兩相系統(tǒng)的金屬腐蝕,尤其適合間歇性用汽設備保護和防腐。BF-31T凝結水系統(tǒng)保護劑現(xiàn)場使用工況要求簡單,對于凝水溫度及鐵含量沒有要求,一些設備除鐵對凝水溫度及含鐵量有要求。BF-31T凝結水系統(tǒng)保護劑藥劑不受生產(chǎn)負荷波動的影響有很好的的緩沖性能,不會影響水質處理的指標性能效果。BF-31T凝結水系統(tǒng)保護劑藥劑成本會隨著藥劑在系統(tǒng)的累積使用量會減少,沒有其他設備類反洗沖洗的廢水排放問題。 BF-31T凝結水系統(tǒng)保護劑覆膜速度快,凝水水質鐵離子(全鐵指標)72小時內迅速達標,為藥劑實驗提供了便捷??赏耆娲跗?、除氧劑使用。BF-31T凝結水系統(tǒng)保護劑相比市場常見設備除鐵工藝及其他措施,不需要巨大固定設備投資,且不需要耗費不菲的濾料更換(使用期限3年左右,總造價20-30%),不僅保護了系統(tǒng)設備及管線,延長鍋爐系統(tǒng)使用壽命,而且徹底斷絕鐵離子來源,讓凝水循環(huán)回用鍋爐安全使用,實現(xiàn)凝水除鐵標本兼治。各位同仁,你們單位蒸汽鍋爐有無發(fā)生鍋爐“紅水”現(xiàn)象?有發(fā)生過蒸汽冷凝水PH值偏低呈酸性的情況嗎?有無發(fā)生過蒸汽冷凝水顏色發(fā)紅或者顏色泛黃或者蒸汽冷凝水鐵超標情況?你們是怎么解決的?關于鍋爐阻垢除垢、防腐緩蝕你們在使用什么方法?關于鍋爐給水調節(jié)PH值、爐水發(fā)紅、回水有硬度、鍋爐腐蝕結垢爆管、蒸汽系統(tǒng)腐蝕、蒸汽冷凝水鐵超標、酸性蒸汽冷凝水顏色發(fā)紅、鍋爐水質檢測處理等問題,北京化工大學 顏輝 I86OO475386隨時歡迎各位同學溝通鍋爐相關新技術信息,隨時歡迎各位同仁分享鍋爐設備管理使用經(jīng)驗,相互學習。鍋爐紅水處理。4.鍋爐紅水處理試驗案例與該制藥廠設備管理負責人經(jīng)過深入溝通,解了制藥廠鍋爐的實際工況,建議采購10天的藥劑量,進行鍋爐系統(tǒng)防腐蝕紅水治理藥劑效能試驗。圖3▲2號鍋爐爐水水樣由于制藥廠鍋爐產(chǎn)氣量不大,采購了4桶共100升BF-31T凝結水系統(tǒng)保護劑,進行為期10天《某醫(yī)藥股份有限公司鍋爐系統(tǒng)防腐蝕紅水治理藥劑效能試驗》,試驗期間加藥量逐漸遞減的方式,以每天取2號鍋爐爐水和蒸汽冷凝水水樣作為外觀對比和第三方檢測數(shù)據(jù)作為藥劑效能判斷依據(jù)。圖4▲2號鍋爐蒸汽冷凝水水樣制藥廠鍋爐系統(tǒng)防腐蝕紅水治理藥劑效能試驗第2天,2號鍋爐蒸汽冷凝水水樣稍稍發(fā)紅的顏色外觀恢復正常(見2號鍋爐凝水水樣圖3);2號鍋爐爐水顏色發(fā)紅,紅色變化不大(見2號鍋爐爐水水樣圖4)。制藥廠鍋爐系統(tǒng)防腐蝕紅水治理藥劑效能試驗第3天,加大鍋爐排污量,加快爐水置換,2號鍋爐蒸汽冷凝水水樣顏色外觀完全通透(見2號鍋爐凝水水樣圖3);2號鍋爐爐水顏色發(fā)紅,紅色變淺(見2號鍋爐爐水水樣圖4)。制藥廠鍋爐系統(tǒng)防腐蝕紅水治理藥劑效能試驗第4天,加大鍋爐排污量,加快爐水置換,2號鍋爐蒸汽冷凝水水樣顏色外觀完全通透(見2號鍋爐凝水水樣圖3);2號鍋爐爐水顏色發(fā)紅,紅色繼續(xù)變淺(見2號鍋爐爐水水樣圖4)。制藥廠鍋爐系統(tǒng)防腐蝕紅水治理藥劑效能試驗第5天,加大鍋爐排污量,加快爐水置換,2號鍋爐蒸汽冷凝水水樣顏色外觀完全通透(見2號鍋爐凝水水樣圖3);2號鍋爐爐水顏色變淺紅(見2號鍋爐爐水水樣圖4)。制藥廠鍋爐系統(tǒng)防腐蝕紅水治理藥劑效能試驗第6天,加大鍋爐排污量,加快爐水置換。2號鍋爐蒸汽冷凝水水樣顏色外觀完全通透(見2號鍋爐凝水水樣圖3);2號鍋爐爐水紅色消失(見2號鍋爐爐水水樣圖4)。制藥廠鍋爐系統(tǒng)防腐蝕紅水治理藥劑效能試驗第7天,加大鍋爐排污量,加快爐水置換。2號鍋爐蒸汽冷凝水水樣顏色外觀完全通透(見2號鍋爐凝水水樣圖3);2號鍋爐爐水紅色消失,顏色恢復正常(見2號鍋爐爐水水樣圖4)。制藥廠鍋爐系統(tǒng)防腐蝕紅水治理藥劑效能試驗第8天,憑經(jīng)驗從2號鍋爐蒸汽冷凝水水樣和爐水水樣顏色判斷,鍋爐系統(tǒng)整體腐蝕已被完成控制住了,凝水鐵離子達標,鍋水顏色正常,鍋爐排污量恢復正常,2號鍋爐最后的爐水水樣和凝水水樣快遞第三方檢測,鍋爐系統(tǒng)防腐蝕紅水治理藥劑效能試驗提前結束。5.后記該制藥廠鍋爐正式采用BF-31T冷凝水保護劑防腐治理方案至今14個月,鍋爐一直安全穩(wěn)定運行,再未出現(xiàn)鍋爐系統(tǒng)設備及管線腐蝕,爐水發(fā)紅、排污水發(fā)紅,蒸汽冷凝回水顏色泛黃、鍋爐紅水等鐵離子超標問題。由于鍋爐運行穩(wěn)定,爐水水質良好,鍋爐排污量較治理前大幅下降,減少了污染和排放,節(jié)省了大量的能源和水資源。鍋爐紅水處理(顏輝)
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- 2020-11-12 15:26:35CloneSelect單細胞分離系統(tǒng)用于分選基因編輯的間充質干細胞
- 基因工程細胞的同質性對于很多應用都是必要條件,例如細胞株開發(fā)、基因ZL、組織工程以及細胞ZL與再生醫(yī)學。CRISPR/Cas9基因編輯存在脫靶等情況,無法直接得到均質的細胞,因此需要開展單細胞克隆,之后才能用于臨床。CloneSelect單細胞分離系統(tǒng)(CloneSelect Single Cell Printer)采用類似噴墨打印的技術,柔和地產(chǎn)生包裹細胞的液滴無接觸地直接分配到微孔板中(圖1)。同時,該系統(tǒng)借助智能圖像分析,確認細胞數(shù)目,分析細胞的形態(tài)(大小和圓度)及熒光強度,聯(lián)動的真空裝置將不符合要求的液滴(如空液滴或者含多個細胞的液滴)直接吸走,而符合要求的細胞液滴則分配至微孔板,從而實現(xiàn)對單個細胞的分選和接種。單細胞分離系統(tǒng)是一種可比移液器操作的柔和的單細胞分離技術,而流式分選由于高的液體剪切力和電壓的影響,會降低敏感細胞和部分受損細胞(如電轉后的細胞)的成克隆率,因此單細胞分離系統(tǒng)更適用于基因工程細胞的克隆,維持細胞活力,并提供直接的單克隆性圖像證據(jù)。圖1:CloneSelect f.sight單細胞分離系統(tǒng)最近發(fā)表的一篇文章(Characterization of CRISPR/Cas9 RANKL knockout mesenchymal stem cell clones based on single-cell printing technology and emulsion coupling assay as a low-cellularity workflow for single-cell cloning),作者用CRISPR/Cas9對間充質干細胞(MSC)開展RANKL基因敲除以提高其骨骼形成能力。整個實驗流程起始于轉染,接著用CloneSelect f.sight單細胞分離系統(tǒng)開展單細胞克隆,隨后在DNA、RNA以及蛋白質水平開展分析,ZH開展細胞功能分析(圖2)。圖2:基因編輯間充質干細胞的單細胞克隆及分析流程。(圖片來源:文獻1)。作者在CRISPR/Cas9基因敲除質粒中加入了GFP基因,轉染間充質干細胞后,用具備熒光分選功能的CloneSelect f.sight系統(tǒng)分選出轉染成功的單細胞。系統(tǒng)可設定細胞直徑、圓度和熒光強度等指標,分選出單個活細胞并接種至微孔板。圖3為系統(tǒng)分選基因編輯的間充質干細胞的5張連續(xù)的圖像。通過瀏覽單細胞分離過程中記錄的5張連續(xù)的圖像,作者統(tǒng)計單細胞接種的成功率為93.9±2.7%(n=451),即僅有~6%的孔為多細胞孔,或空孔或無法確認(圖4)。這一結果表明f.sight單細胞分離系統(tǒng)可以準確地識別細胞并成功將其接種至微孔內。圖3:CloneSelect f.sight系統(tǒng)分選間充質干細胞時采集的5張連續(xù)圖像,可用于證明單克隆性。(圖片來源:文獻1)。除了帶GFP的基因敲除質粒外,作者還將pmaxGFP質粒轉染至間充質干細胞作為對照用于評估單細胞分離效率和克隆率。此外,作者轉染了多個不同的基因敲除質粒。雖然不同的質粒因為大小不同而呈現(xiàn)各異的轉染效率,但是成克隆率都達到了30%。此外,作者還發(fā)現(xiàn)轉染質粒的間充質干細胞(31.3±8%)和未轉染的間充質干細胞(39.6±15.6%)在成克隆率上差異較小,這也表明f.sight的單細胞分選過程柔和,因此產(chǎn)生的系統(tǒng)偏差較小(圖4)。圖4:CloneSelect f.sight單細胞分離系統(tǒng)的高接種效率(左)和高成克隆率(右)。(圖片來源:文獻1)。接著作者采用surveyor assay、RT-PCR和emulsion coupling分別從DNA、RNA和蛋白質水平對基因編輯后的間充質單細胞開展分析。ZH作者選出一株雙等位基因敲除的間充質干細胞(g23d)檢測其成骨分化的能力,并以未編輯的MSC為對照開展平行實驗。細胞轉移到成骨分化培養(yǎng)基后,分別在第7天、14天和21天用茜素紅染色。在第14天,細胞失去細長的成纖維細胞樣形態(tài),開始呈現(xiàn)出成骨細胞樣的形態(tài),然后在第21天開始出現(xiàn)鈣沉積,發(fā)展過程與親本的MSC對照類似(圖5)。這表明基因編輯后的MSC其成骨分化能力并沒有因為基因編輯和篩選過程而受到影響。圖5:RANKL基因敲除的間充質干細胞(g23d)和親本間充質干細胞的培養(yǎng)和成骨分化。(圖片來源:文獻1)。在這個研究中,作者搭建了一整套實驗流程,起始于CRISPR/Cas9基因編輯,單細胞克隆以及DNA、RNA和蛋白質各個水平的分析和細胞功能測試。實驗流程中采用CloneSelect f.sight單細胞分離系統(tǒng)成功GX地分選出基因編輯后帶GFP的間充質干細胞。單細胞接種效率高達93.9% (± 2.7%),且成克隆率高達31.3% (±8%)。相比傳統(tǒng)的有限稀釋法和流式分選,CloneSelect單細胞分離系統(tǒng)具有GX率,高活率,操作簡單,單克隆性證據(jù)充分等優(yōu)勢,是基因工程細胞克隆的理想工具。
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